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文档简介
植物器官培养 植物花器官培养 烟草151李春黎 花器官培养是指整个花器及其组成部分 如花托 花瓣 花丝 花柄 子房 花茎和花药等 的无菌培养 背景 花期培养技术是由Nitsch 1949 建立的 花器官培养 定义 过程 取材 从健壮植株上摘取未开放的花蕾 已开花的不宜用于培养 因为消毒和培养都较困难 先用70 酒精消毒20s 再用饱和漂白粉溶液浸10到20min 或用0 1 升汞消毒4到6min 再用无菌水冲洗3到5次 接种培养 用整个花蕾培养时 只要把花梗插入固体培养基中 若用花器的某个部分 则分别取下 切成0 3cm 0 5cm左右的小片 接种到培养基中 放到培养室内培养 几周之后便可以得到完整的植株了 培养基 供微生物 植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料 一般都含有碳水化合物 含氮物质 无机盐 包括微量元素 以及维生素和水等 一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基 固体培养基的对应词 是微生物或动植物细胞的液状培养基 1 基本培养基 MS N6 B5等 2 激素 愈伤组织诱导 基本培养基 2 4 D 分化培养基 基本培养基 6 BA IAA 生根培养基 生长素 培养基的选择及植物激素对花器官培养的影响 培养实例 材料的选择与消毒 1 选材母株上取下还未开放的花蕾 以小的为好 2 冲洗在清水中冲洗 把萼片与花柄上的表皮毛轻轻擦去 再用流水冲洗几次后 再用蒸馏水冲洗3 消毒在无菌超净工作台上 用70 酒精表面消毒半分钟 再在饱和漂白粉溶液中消毒20min左右 取出用无菌水清洗3 4次 接种培养及植物再生 1 用镊子把花蕾上的萼片与花瓣 雌蕊 雄蕊去掉 2 并切下花托接种于MS 6 BA1mg L NAA0 22mg L的培养基上 3 然后培养在温度为26 左右光照强度为1500lx 光照时间为10h的培养室内 约两个星期后即可形成少量愈伤组织 约一个月后便分化出绿色芽点 并抽茎展叶长大成苗 2 1 NO 2 1 YES 选择生长末期或已进入休眠期的组织 则外植体对诱导反应迟钝或无反应 材料越小存活率越低 大多数植物应在生长开始的季节采样 选择生理年龄小的器官 注意事项 克服后代分离 缩短
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