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高考生物实验专题复习一 观察实验姜万录 吉林梨树县第一高级中学 136500观察实验是指凭借人的感官直接对客观事物进行感知和描述，或者利用科学仪器和其他技术手段对客观事物进行考察。后者在观察过程中由于使用了显微镜等仪器和测量工具大大扩展了观察的范围，提高了对细小事物的分辨能力。在实验中，人们通过观察实验对象“是什么”，或在一定条件下发生了“怎么样”的变化，来感知生物体的成分和结构的存在，揭示生物体生命活动的规律。因此，观察实验是生物研究中必不可少的重要手段，是学生必须掌握的一类重要的实验。1明确实验的要求和内容，奠定实验基础观察实验要求选择适当的生物材料，确定合适的观察对象，采用恰当的观察手段和观察程序进行观察，最后明确观察结果。观察时从方位上看，一般采取先整体后局部，从外到内，由表及里，从左到右，从上到下的顺序进行观察；从方式上看，一般先用肉眼，再用放大镜，最后用显微镜。用显微镜观察需先用低倍镜后用高倍镜。总之，观察时要善于从事物和现象之中注意到各种不显著但却非常重要的属性和特征。高中教材中观察实验包括以下6个实验，其中“自生固氮菌分离”为选做实验，高考考试大纲不作要求。具体内容如下表：实验名称观察方式观察手段生物材料观察对象染色剂观察结果实验二：用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动微观观察原色观察显微镜（装片）观察藓叶黑藻叶绿体无叶片细胞中绿色、扁平的椭球形或球形的叶绿体且围绕液泡进行流动实验四：观察植物细胞的质壁分离和复原显微镜（装片）观察洋葱鳞片叶表皮紫色液泡无液泡体积缩小，颜色加深（质壁分离）；液泡体积增大，颜色变浅（质壁分离复原）；实验三：观察植物细胞的有丝分裂染色观察显微镜（压片）观察洋葱根尖染色体碱性染料（龙胆紫和洋红）染色体形态和位置实验三(选修)：自生固氮菌分离（选做）显微镜（涂片）观察土壤微生物固氮菌结晶紫培养基稀泥浆出现黏液（无色透明乳白色褐色）镜检可见紫色自生固氮菌实验一：生物组织中脂肪鉴定显微镜（切片）观察花生种子脂肪苏丹或细胞中染成橘黄色或红色圆形小颗粒实验十二：观察SO2对植物的影响宏观观察直接观察肉眼观察黄瓜幼苗植物叶片无叶片褪绿，变成黄白色，叶脉间出现黄白色点状“烟斑”表12掌握实验技术，培养实验技能在观察实验中常综合运用显微镜观察技术、玻片标本制作技术、染色技术和微生物培养和分离技术等。21显微镜观察技术显微镜是生物学实验中经常使用的一种工具，适用于观察生物的微观结构。具体内容包括：211显微镜的构造：中学生物实验使用的是普通光学显微镜，其构造由光学系统和机械系统两大部分组成（如图所示）。光学系统包括物镜、目镜、反光镜（照明装置）；机械系统包括镜座、镜柱、镜臂、载物台、压片夹、遮光器（聚光器）、镜筒、物镜转换器和调焦装置（粗准焦螺旋和细准焦螺旋）等。机械系统主要是保证光学系统的准确配置和灵活调控。212显微镜的成像原理及主要性能2121成像原理光源（天然光或人工光源）反光镜光圈物体物镜（凸透镜）在镜筒内形成一个倒立放大的实像目镜把经物镜形成的实像进一步放大形成一个虚像。所以眼睛看到的是经2次放大的一个倒立的虚像。2122分辨率分辨率是指分辨被检物体细微结构的能力。通常用能分辨的两个物点间的最小距离来表示（分辨距离0.61入/N.A,入：光波长，N.A：物镜镜口率）。辨距离越小，分辨率越高，物象越清晰；分辨距离越大，分辨率越小，物象越模糊。对任何显微镜来说最重要的是他的分辨率，而不是放大倍数。2123放大倍数亦称放大率。物象的大小对物体大小的比例叫做显微镜的放大倍数。显微镜的总的倍数目镜的放大倍数物镜的放大倍数。该放大倍数指的是长度或宽度，而不是面积和体积。2124视野及镜像亮度视野是指一次所能观察到的被检标本的范围。视野的大小与放大倍数成反比，即放大倍数越大视野越小，看到的标本范围就越小；反之就越大。镜像亮度是指视野里所看到的像的亮暗程度。他与放大倍数成反比，即在光源一定的情况下，放大倍数越大，视野越暗。所以，在用高倍镜后用油镜观察标本时，必须移动标本才能看清楚其他部位，并使用凹面镜、大光圈或增强光源，以改善视野亮度，而使物象明亮清晰。213显微镜的使用方法2131取镜和安放：取镜时，一手握镜臂，一手托住镜座，将其轻轻地放在实验台的前方稍偏左的位置上。2132对光：适的目镜和物镜。转动物镜转换器，使低倍镜对准载物台中央的通光孔。左眼从目镜中观察，同时调节反光镜直至视野明亮，均匀为止。2133低倍镜观察：把所要观察的玻片标本放在载物台上（盖玻片一侧朝上），用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心，转动粗准焦螺旋，下降镜筒（或是升高载物台），从侧面观察，使物镜接近标本（但不能碰到玻片）；左眼看目镜内，同时反向缓缓转动粗准焦螺旋，使镜筒上升（或是下降载物台），直到看到物象为止，再调节细准焦螺旋，至物象清晰。任何需要观察的标本都要先用低倍镜观察，原因是：低倍镜视野相对大，便于找到目标不；易调节，防止镜头与装片相碰。2134高倍镜观察：在低倍镜下找到需高倍镜观察的部位并移到视野中央（因为低倍镜下看到的物象放大倍数小，但看到的标本的实际面积大，容易找到目标；与低倍镜相比，高倍镜下看到的物象大，同样的视野面积看到的标本的实际面积小，在玻片不动的情况下，高倍镜看到的只是低倍镜视野的中心部分）。移动装片时向预示相反方向移动；转动物镜转换器，移走低倍镜，换上高倍镜，稍微调节细准焦螺旋使物象清晰，调节光圈和反光镜，使视野亮度适宜。2135观察后处理：用绸布或擦镜纸清洁显微镜上的污物。擦完后使物镜转离光轴，把反光镜转到载物台垂直的方向，罩上镜套，小心地放回镜箱内。214低倍镜和高倍镜的主要差异（见下表）比较项目目镜镜头长度物镜镜头长度物象大小视野大小观察细胞数目多少视野亮度物象清晰度高倍镜短长大小少暗模糊低倍镜长短小大多亮清晰表222玻片标本的制作技术显微镜观察的对象是薄而透明的。因此，生物材料必须制成玻片标本才能通过光学显微镜观察。玻片标本有临时玻片标本和永久玻片标本。在使用显微镜的中学实验中，观察的对象主要是临时玻片标本。根据制片方法的不同可分为以下几种：221切片法切片法是将欲观察的材料切成极薄的薄片，再制成装片的一种制片方法。其制作过程：首先选用软硬适度的植物根茎叶等如材料太软，可用马铃薯块茎、胡萝卜根或肥皂将欲切取的材料夹住。一起进行切片。欲切的材料应先截成适当的段块，一般面积大小不超过35平方毫米为宜，长度以23厘米较便于手持并进行切片。接着用手的三个指头拿住材料，并使其稍突出在手指之上，右手持刀，切前先将材料和刀口蘸上些水（润滑），切去材料上端不整齐一段，刀身放平，由左前向右后方（即向着自己迅速拉切，切时手臂用力才能平稳）拉切。最后选取厚薄均匀的材料，用毛笔取出放在在玻片上制成临时玻片。222装片法装片法是将新鲜、少量的生物材料直接放在载玻片的水滴中，再盖上盖玻片，做成玻片标本的方法。其制作过程：擦净载玻片和盖玻片，将载玻片持平或放在平台上，用滴管吸水或其他液体滴一滴在在玻片中央（量要适度，以恰好被盖玻片盖满为度），将材料用解剖针或镊子平展于载玻片的液滴中，加盖玻片（为避免气泡产生，先将盖玻片一侧接触液体边缘，在慢慢向下落，放平盖玻片），制成玻片标本。223涂片法涂片法是将材料均匀涂布在载玻片上的一种制片方法。其制作过程：取洁净的载玻片，将涂抹的液滴滴于载玻片的中央或偏右约14处，左手持载玻片或放在平台上，右手持另一载玻片作推片。先慢慢向右移动，让短边接触溶液，两载玻片的夹角约为3045度，再向左迅速推载玻片，即可涂成一均匀的薄片。也可用解剖针、牙签、火柴杆等涂成薄片，盖上盖玻片即可。224压片法压片法是将生物材料置于载玻片和盖玻片之间，施加一定压力，将组织压散的一种方法。其制作过程：取洁净的载玻片，先将解离好的或疏松的材料放在载玻片中央，加一滴清水或染液，再进行压片，压片时，可用针尖或刀尖直接轻压材料，或把盖玻片盖上，用刀柄或手指轻压盖片，或盖玻片上再加一片载玻片，用手指轻压载玻片，压片时应注意不能移动盖玻片。23染色技术除少数特殊结构含有带染色的物质外，多数生物材料是无色的，为了增大反差，突出主要观察对象，在观察前对材料要经染色剂染色，才能观察清楚。中学常用染色剂的制法、性质和适用范围如下表： 名称制法性质适用范围天然染料苏木精取1克苏木精溶解在6毫升无水乙醇成甲液。另配铵明矾饱和水溶液成乙液。取4毫升甲液，同150毫升乙液混合，用纸遮盖，放光亮处约一周，经氧化（成熟），过滤，加入25毫升甲醇，玻瓶密存备用。碱性染料。又名苏木色精、苏木紫，是从南美苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸渍出来的，淡黄色到锈紫色结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油。动植物组织、纤维素、细胞壁、细胞核洋红取5克明矾溶解在95毫升蒸馏水里，再加0.5克洋红，煮沸。冷却，过滤可加入少许碳酸防霉。碱性染料。又叫胭脂红、虫红、卡红。又热带雌性胭脂虫体干粉提取制成，溶于水。细胞核、整体标本如水螅、血吸虫人工染料龙胆紫取龙胆紫溶解在2乙酸溶液中，直到溶液变成深紫色为止。碱性染料。是甲基紫同结晶紫的混合物细胞核、染色体结晶紫取2克结晶紫溶解在20毫升95乙醇里研磨成甲液。另取0.8克草酸铵溶解在80毫升蒸馏水里成乙液。甲乙液混合使用。碱性染料。甲基紫龙胆紫的纯品能溶于水和乙醇。细菌、细胞核、染色体、中心体、淀粉、神经胶质、纤毛苏丹苏丹将0.1克苏丹干粉溶于100毫升体积分数为95%的酒精中，待全部溶解后再使用。将0.1克苏丹干粉溶于50毫升丙酮中，再加入体积分数为70的酒精50毫升，充分混合后即可使用。弱酸性染料弱酸性染料，红色粉末，易溶于脂肪和乙醇脂肪、木栓、角质层伊红取1克伊红溶液溶解在99毫升蒸馏水或99毫升70乙醇里。碱性染料（红色）。种类多，常用的如伊红Y红色带蓝色小结晶或棕色粉末，溶于水，不溶于乙醇。细胞质亚甲基蓝（美蓝）取0.5克亚甲基蓝溶解在30毫升95%乙醇里，再加入100毫升001氢氧化钾溶液。碱性染料（深蓝色）。细胞核、细菌、血、活体神经表324微生物的培养和分离技术中学生物学实验中涉及微生物培养的实验有“自生固氮菌的分离”、“学习细菌培养的基本技术”，通过这些实验要求学生掌握微生物，主要是细菌培养的基本技术。包括（1）培养基的制作制作培养基是微生物实验的基础。在制作培养基前，首先应准备好合乎要求的清洁玻璃器皿。一般用肥皂液煮沸30min，或浸入用重铬酸钾和浓硫酸配制的洗液数十分钟，然后用清水冲洗，晾干后保存备用。培养基的制作有以下几个环节：培养基的配制：按培养基配方称量各种成分的原料。将称量好的原料放入烧杯中，加入所需水量，用玻璃棒搅拌均匀后，加热溶化即成液体培养基。如需制成固体培养基的，再加凝固材料（琼脂），加入后继续微火加热使之溶化，即成固体培养基。加热后，补足因加热所蒸发的水分。调pH。配好培养基后用PH试纸测试，用HCl或NaOH调到所需的PH。分装。将培养基趋势用滤纸或纱布过滤分装于洁净试管中，其量约为试管高度的1/5，分装时不要将培养基沾在管口和试管上段，以免引起污染。加棉塞。分装完毕以后，在管口上加一棉塞，棉塞长度的2/3在试管口内，以防止染菌污染，保证通气良好。包扎。将分装好的培养基，每10支试管用线绳捆成一捆，并在管口外包上一层牛皮纸，用线绳扎好。在每捆试管外挂上标签，注明培养基名称、配制日期和制作者姓名。培养基的灭菌：放入高压蒸汽灭菌锅，经高压蒸汽灭菌30min,保存备用。灭菌时注意：灭菌开始前，要将灭菌锅内的冷空气排尽；灭菌完毕后，要等压力降到0时才能打开排气阀。制平面或斜面培养基：在分装时，如装入培养皿则成平面培养基。如装入试管灭菌后，当培养基冷却至50左右时，将试管带棉塞的一端搁在小木条支架上，呈适当斜度，使培养基形成的斜面的长度不超过试管总长的一半。凝固后可成斜面培养基，保存备用。（2）接种和分离菌技术：微生物的各项实验操作均应在无菌条件下进行。接种：中学微生物实验中的接种直接在酒精灯上操作。基本步骤为：用75%乙醇将用品包括将双手消毒。当手上的酒精挥发完毕后，点燃酒精灯。接种。左手并排拿起菌种试管和待接种试管，试管口靠近酒精灯火焰；右手拿起接种环，放在火焰上烧红灭菌；在火焰旁用右手无名指和小指夹下两个棉塞（不能放下），同时左腕转动，把两个试管口放在火焰上燎一下；把灭菌的接种环伸进菌种试管让环先接触培养基上未长菌的部位，使环冷却，然后轻轻挑取一点菌落；在火焰旁，迅速将沾有菌体的接种环伸入待接种试管里，在培养基斜面上由管底向管口连续轻轻地划几道蛇形曲线，使菌落涂在培养基上，抽出接种环，将试管口再在火焰上燎一燎，塞上棉塞。接种环也在火焰上烧红灭菌。熄灭酒精灯。实验后培养基必须经高压蒸气灭菌后方能倒掉，如果用的是致病菌，更应记住这一点。保温培养。将所接菌种、接种日期、接种者的姓名填写在标签上，然后将试管放保温箱内恒温培养。分离技术：在自然界、微生物都是混杂生活在一起的，要想研究某种细菌，必须从混杂的细菌群体中分离得到一种细菌。分离方法有以下几种：平板划线分离。用接种环沾取少量待分离的材料，在固体平板培养基表面并行或分区划线，然后，将培养皿放入恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。液体稀释法。将待分离的样品经过大量稀释后，取稀释液均匀地涂布在培养皿中的培养基表面，培养后就可能得到单个菌落。利用选择培养基培养。不同微生物对不同的试剂、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用这些特点可配制出适合某种微生物生长而限制其他微生物生长的选择培养基。用这种培养基来培养微生物就可以达到纯种分离的目的。3强化实验训练，提升实验能力1下面对光学显微镜的目镜、物镜的作用叙述正确的是 ( B )目镜物镜第一次放大物象第二次放大物象第二次放大物象第一次放大物象实像虚像虚像实像长焦距长焦距短焦距短焦距表4ABCD在观察植物细胞有丝分裂装片的显微结构时，发现视野内有数个具有黑色宽缘的圆形透明物，这是 （ C ）A装片中的脏物 B.被挤压出的细胞核C.气泡 D.粘在目镜上的脏物3.下图中表示物镜长度，表示目镜长度，表示物镜于玻片的距离。获得最大物象时正确的组合为 （ D ）A. B. C. D.4.生物学实验中常用普通光学显微镜观察细小物体，若被观察的物体通过显微镜放大了30倍，这里“被放大了30倍”是指该细小物体的 （ D ）A.体积 B.表面积 C.像的面积 D.长度或宽度5.用显微镜观察装片时，在低倍镜视野中发现一异物，当移动装片时，异物不动，转换高倍镜后，异物仍可观察到，则此异物可能存在于 （ B ）A.物镜上 B.目镜上 C.实验材料上 D.反光镜上6某同学在显微镜下观察落花生子叶的切片，当转动细调节器时，有一部分细胞看得清晰，另一部分细胞较模糊，这是由于 （ B ）A.反光镜未调节好 B.标本切片厚薄不均C细调节器未调节好 D.显微镜物镜损坏7.下图为显微镜下看到的番茄果肉细胞，要将图A转换成图B，正确的操作顺序（ C ）甲、转动粗准焦螺旋 乙、转动细准焦螺旋 丙、调节光圈 丁、转动转换器 戊、向右上方移动玻片 己、向左下方移动玻片A.甲乙丙丁戊 B.己丁丙乙C.戊丁丙乙 D.戊甲丁乙8用高倍镜观察洋葱根尖的细胞比用低倍镜观察到的细胞数目、大小和视野的明暗情况依次为 （ D ）A.多、大、亮 B.少、小、暗 C.多小、暗 D.少、大、暗 9.在光学显微镜下，观察透明的口腔上皮细胞和颜色较浅的洋葱表皮细胞时，必须注意A用凹面反光镜，放大光圈 B. 用凹面反光镜，缩小光圈 （ D ）C.用平面反光镜，放大光圈 D.用平面反光镜，缩小光圈10.使用下列那种仪器可获得三维图像 （ A ）A.扫描电子显微镜 B.透射电子显微镜C.荧光显微镜 D.光学显微镜11.下列关于叶绿体在细胞中分布的描述，正确的是 （ B ）A.在强光下，叶绿体以其侧面对着光源，以利于接受较多的光B. 在弱光下，叶绿体以其较大的面对着光源，以便接受更多的光C. 在弱光下叶绿体会较多地聚集在背光一侧D.对于一般地叶片，背光面地细胞中含有较多地叶绿体12.下列关于细胞质流动地叙述中，不正确的是 ( C )A.细胞质流动的标志是叶绿体等颗粒位置的移动B.细胞质流动的方式是多样的，有沿着细胞壁的环流，也有管状或线条状细胞质流动C.有的植物的细胞质能流动，有的不流动，所以实验时要选好材料D.细胞质流动的速度，在不同温度条件下有所不同13.适时剪取的根尖不立刻使用，应及时浸泡在酒精醋酸溶液中，其主要目的（ C ）A.杀死根尖细胞 B.水解细胞间质离散细胞C.固定原生质的微细结构 D.为染色体被染色创造条件14.制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片时,在盖玻片上的根尖上滴一滴清水,作用是 ( C ) A.避免压碎盖玻片 B.防止盖玻片移动C.避免污染盖玻片 D.使压力均匀15.在洋葱根尖细胞有丝分裂装片过程中,下列实验操作你认为能缩短制作时间的是(C)A.用0.005g.mL-1的龙胆紫液 B.用30%的盐酸溶液C.改常温染色为微热染色 D.染色后直接加盖玻片16.下列观察植物细胞质壁分离和复原实验的改进措施,你认为不影响或能提高实验效果的是 ( B )A.用0.5g.mL-1蔗糖溶液 B.材料选用有鲜艳色彩的花瓣C.用0.2g.mL-1的KNO3 D. 材料用洋葱尖分生区17.分离表层土壤中的自生固氮菌时,分离所依据的原理是 ( A )A.自生固氮菌的生长繁殖不需要氮源 B.不同微生物生长繁殖所需pH不同C.不同微生物繁殖所需温度条件不同 D.不同微生物代谢类型不同18.自生固氮菌培养观察时,在载玻片上滴加的液体,染色时所用的染料以及被染色的构分别是 ( B )蒸馏水无菌水酒精龙胆紫醋酸洋红结晶紫染色体荚膜细胞壁染色质A. B. C. D.19.在“学习细菌培养的基本技术”实验中,下列操作正确的是 ( C )A.从灭菌锅中取出的装有培养基的试管,应插入试管架上冷却至室温B.灼烧接种环时,只需灼烧与培养基接触的箍处C.接种挑取菌体前,应让环先接触培养基上未长菌处,目的是为了让环冷却D.接种环画出蛇形线时,用力要适度,既要画破培养基,使菌体与培养基完全接触,又不要画得太深,防止菌体深埋后缺氧20.右图为未完成的关于SO2对植物的影响的曲线图,不能作出横坐标含义的是 ( D ) A.SO2浓度 B.时间 C.植物对SO2的敏感性 D.叶龄21.在进行“观察植物细胞的有丝分裂”实验中，甲戊五位同学在剪取洋葱根尖后立即进行的操作步骤如下：学 生操作步骤解离漂洗染色制片观察甲乙丙丁戊表5请回答：（1）甲观察到的实验结果是 ，乙观察到的实验结果是 ，丙观察到的实验结果是 。（请从下列序号中选择）A染色体未着上颜色，无法看清 B.细胞重叠，看不到染色体C染色体染上颜色，清晰可见 D.染色体着色很浅，模糊不清（2）丁同学在进行上述操作后，直接在高倍镜下观察，长时间未找到有丝分裂的细胞，正确操作是。（3）戊同学观察到了许多呈长方形的细胞，但未找到有丝分裂各时期的图象，可能的原因是。（4）经教师纠正后，丁同学在视野中找到了有关细胞有丝分裂图象，但丁同学所看到的细胞图像位于视野的右上方，你认为他应如何正确移动装片？。（5）在做观察植物细胞的有丝分裂时，利用洋葱根尖作为实验材料，常常因解离固定前不好确定取材时间，在所取材料中处于分裂期的细胞很少，影响实验效果。如果我们能了解洋葱根尖分生区细胞分裂周期，确实在一天中的什么时间段其根尖分生区大部分细胞处于分裂期，在此时取材解离固定，实验成功率就会大大提高。现请你设计一个实验方案，测定出洋葱根尖分生区根尖分生区细胞在一天中什么时间段分裂期细胞较多？（设分裂期时长为半小时）写出你要用到的主要仪器用具：你需要的药品和染色剂：写出你设计的实验步骤：结论：答案：（1）B D A (2)使用显微镜时先用低倍镜，再用高倍镜 (3)观察部位不正确（该同学看到的是成熟区的细胞或伸长区的细胞） （4）将装片向右上方移动 （5）显微镜、培养皿、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、滴管、吸水纸等。质量分数为15的Hcl，体积分数为95的酒精，质量浓度为0.01g/mL龙胆紫 每隔30分钟取材一次，制作装片（若写出详细装片过程不算错）；在显微镜下观察分生区，列表记录最佳视野中处于分裂期的细胞数目（或将各次数目列表记录）根据所列表中数据，数目最多的时段，就是大多数细胞分裂期的时段22.下面是一组用新鲜洋葱表皮进行的实验处理和结果，请分析回答：实验分组处理方法实验结果第1组将材料置于30蔗糖液中发生质壁分离然后将材料移至蒸馏水中发生质壁分离复原第2组将材料置于60蔗糖液中迅速发生质壁分离然后将材料移至蒸馏水中质壁分离不能复原第3 组将材料置于7的尿素溶液中开始发生质壁分离，然后逐渐自动复原第4组将材料放入100热水中3min后取出，重复第1组实验不发生质壁分离表6（1）洋葱表皮细胞在第1、2、3组实验中均发生了质壁分离现象，其内部结构基础和外在条件分别是什么?(2)比较第1组和第2组实验结果的差异说明了什么问题？（3）比较第1 组和第3组实验结果，出现实验结果差异的原因是什么？（4）比较第1组和第三4组实验结果，出现实验结果差异的原因是什么？答案：（1）内部结构基础是有原生质层和原生质层内外两个溶液体系的存在；外在条件是原生质层内外两个溶液体系存在浓度差。（2）高浓度溶液加快质壁分离现象的出现，但由于引起细胞过度失水，导致细胞死亡，使质壁分离复原不能发生。（3）尿素是可能被细胞主动吸收的小分子物质，随着尿素分子不断的进入细胞内部，当细胞内外浓度趋于一致时，质壁分离就会自动复原。（4）高温致使细胞死亡，死亡的细胞原生质层失去选择透过性，不能发生复原。23.根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型,利用选择性培养基和鉴别性培养基,结合显微镜检,以及菌落特征,可以把混杂在一起的大肠杆菌,硝化细菌,乳酸菌,金黄色葡萄球菌,圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤,请根据各个步骤的条件,填写空格中的内容：首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。(1) 用无氮培养基可筛选出_。(2) 用不含有机碳源的选择性培养基可筛选出_。(3) 酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入_。(4) 用加了较高浓度NaCl的培养基可选择出_。或者根据菌落的颜色呈现_色,将其挑取单独培养。(5) 利用伊红和美蓝培养基培养混合菌,菌落呈_色并带有金属光泽的是_,挑取该菌落单独培养.结合显微镜和进一步用伊红和美蓝培养基鉴别来确定。(6) 在无氧环境下培养混合菌,_可以生长,加入一定浓度的乳酸,使培养基pH充分降低,可抑制_微生物的生长,利用菌落特征,结合显微镜检,选取生长优势的菌落,即可分离出_。答案：（1）圆褐固氮菌（2）硝化细菌（3）某种抗生素（4）金黄色葡萄球菌 桔红（金黄）（5）深紫 大肠杆菌（6）大肠杆菌 乳酸菌 酵母菌 大肠杆菌和酵母菌 乳酸菌24.根据“观察二氧化碳对植物的影响”实验,回答下列问题:(1) 已知实验中测定三个玻璃罩容积时用去水的体积分别为V1、V2、V3,分别放入三株长势相同的植物幼苗1、2、3,各溢出水L1、L2、L3,若在1号和2号装置使SO2的浓度分别达到14mg/m3和28mg/m3,请计算所需的亚硫酸钠的质量M1、M2。(2) 设置3号装置的意义是_。(3) 将13号实验装置放在向阳处,每隔5min观察一次这三株幼苗的变化。你观察的对象是什么?(器官)_。请设计一张表格用于实验时记录。(提示：SO2能破坏叶肉组织中的叶绿体,使叶由绿色转为黄褐色或土黄色，叶片的受害还与叶龄有关,其受害的先后顺序是成熟叶、老叶、幼叶)。(4) 若不断减少混合液中的亚硫酸钠的浓度,使两装置中的植物都能长期 存活,是否说明二氧化硫就不会毒害植物体,为