血浆凝血酶原时间测定(手工法).doc_第1页
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血浆凝血酶原时间测定(手工法)1.检验原理凝血过程是通过适量的凝血活酶、钙离子和孵育血浆触发，然后测定纤维蛋白凝块形成时间。PT的长短反映了血浆中凝血酶原、纤维蛋白原和因子、的水平，本试验是外源性凝血系统常用的筛选试验。2.导致PT检测过高原因标本自身高和用药后高（比如肝素），抽血过程中抗凝剂未充分混匀或者抗凝剂失效，加了肝素的针头抽出的血液放入血凝管送检。3.手工适用状态当标本在血凝仪器CA1500上血浆凝血酶原时间未能检测出来，测量状态为完成，数据显示错误报警ERR032（无凝结物），对标本和试剂进行全面评估后，怀疑是血浆凝血酶原时间太长（100S）（排除非自身原因），立即采用手工操作测定凝血酶原时间。4.检验方法4.1试剂准备：按照试剂瓶标签上标明的量（4mL），用去离子水复溶ThromborelS试剂，颠倒混匀810次，使用前用水浴箱预温到375分钟，也可直接使用CA1500上的PT（经水浴箱37复温5分钟）。请注意：试剂使用前小心混匀。 4.2检验步骤及方法：3000r/min离心标本10分钟，用加样枪吸取血浆100uL到小塑料试管37孵育1分钟，加Thromborel S 试剂（已预温到37）200uL并同时开启秒表计时，不断轻轻倾斜试管，记录至液体停止流动所需要的时间，记录时间，重复以上操作2次，取最准确的那次时间（一般最后一次测量值准确度最高），即为该患者凝血酶原时间。5.结果计算在LIS系统上输入该患者的凝血酶原时间，其它根据下列公式计算：凝血酶原活度（PTA）=（对照PT对照PT*0.6）（患者PT-对照PT*0.6） *100%凝血酶原比值（PTR）=患者PT/对照PT国际标准化比值（INR）= PTRISI6.报告确定无误后及时报告危急值，并在LIS上输入计算出来的结果，在备注栏中注明“手工法结果”，审核报告发出。7.标本存放1小时内（3000r/min*10min）分离血浆，室温放置不超过2小时，28保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70不超过6个月），只能冻融1次，在37迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。8试剂储存条件及有效期未开封的Thromborel S 试剂2-8储存，有效期24个月。复溶试剂的稳定性：37（已开瓶）8小时 ， 15-25（已开瓶）2天，2-8（未开瓶）5天注意试剂有效期限：质控品的测定值不在其指定范围之内，即表示试剂失效。9参考文献9.1.叶应妩.王毓三等全国临床检验操作规程第三版，东南大学出版社。
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