蛋品质实验方案

蛋品质测定蛋品质测定 蛋品质的优劣不仅影响蛋的种用价值 而且还影响蛋的食用价值和商品价值 所 以对蛋品质进行检测很重要 一 材料和方法一 材料和方法 1 实验材料及仪器 1 1 1 实验鸡蛋 相同饲养条件和日龄的儋州鸡 海兰褐新鲜鸡蛋各 25 枚 1 1 2 实验器材 称重用的电子秤 测蛋壳颜色的分光测色仪 游标卡尺 蛋壳强 度测定仪 蛋白高度测定仪 测蛋黄颜色的罗氏比色扇 蛋白蛋黄分离器 1 2 1 实验测量指标 蛋重 蛋形指数 蛋壳颜色 蛋壳厚度 蛋壳强度 蛋白高度 蛋黄颜色 哈氏单位 鸡蛋等级 蛋黄重 蛋壳重 含蛋壳膜 蛋白重 1 2 2 实验方法 1 蛋重 蛋重受品种 品系 开产日龄 产蛋阶段 营养水平 气温等影响 国际市场 鸡蛋以 58 克为标准 用精确到 0 1 克的电子秤进行称重 2 蛋形指数 蛋的形状由蛋形指数来表示 蛋形指数指蛋的长径和短径的比例 蛋形指数是蛋 的质量的重要指标 它与受精率 孵化率及运输有直接关系 正常鸡蛋的蛋形指数是 1 32 1 39 标准是 1 35 用游标卡尺测量其长径及短胫径 3 蛋壳颜色 蛋壳颜色是鸡品种的重要标志 我们用分光测色计测定 蛋壳颜色越深 测定值 越小 反之则越大 我们设定黑色的测定值为 0 纯白色的测定值为 100 所测到的蛋 壳颜色介于这两个数之间 4 蛋壳厚度 蛋壳厚度指蛋壳的致密度 蛋壳厚度一般在 370um 左右 用蛋壳厚度测定仪在蛋 壳的大头 中间 小头分别取样测量 求其平均值 测量需去掉蛋壳上的内外壳膜 如未去掉则为表观厚度 5 蛋壳强度 蛋壳强度是指蛋对碰撞或挤压的承受能力 是蛋壳致密坚固性的重要指标 蛋壳 强度与鸡的品种 营养水平等密切相关 将蛋垂直放在蛋壳强度测定仪上 钝端向上 测定蛋壳表面单位面积承受的压力 6 蛋白高度 蛋白高度是体现鸡蛋蛋白品质的指标 随着鸡蛋保存时间延长 蛋白高度会逐渐 降低 用蛋白高度测定仪测量蛋黄边缘与浓蛋白边缘的中点的浓蛋白高度 测量呈正 三角形的三个点 求平均值 7 蛋黄颜色 测定蛋黄颜色是比较蛋黄色泽的深浅度 蛋黄颜色与鸡的品种 饲料等有关 8 哈氏单位和蛋的等级 哈氏单位是由蛋重按蛋白高度加以校正后计算而得的值 范围一般从 100 最好 到 3 最差 随着鸡蛋保存时间的延长 母鸡年龄的增长和温度升高 哈氏单位会降 低 蛋的等级是反映鸡蛋品质的综合指标 哈氏单位 100 Log H 1 7W0 37 7 57 蛋 的最佳哈氏单位指标为 75 80 9 蛋黄重 蛋壳重 通过测定蛋黄和蛋壳的重量来获得 蛋的营养成分分析蛋的营养成分分析 一 材料和方法一 材料和方法 1 实验材料及仪器 1 1 材料 1 1 1 实验鸡蛋 相同饲养条件和日龄的儋州鸡 海兰褐新鲜鸡蛋各 25 枚 1 1 2 实验药品 蒸馏水 乙醇 高氯酸 硝酸 高锰酸钾 钒钼酸铵显色剂 50 g mL 的磷标准液 浓硫酸 硫酸铜 硫酸钾 氢氧化钠 硼酸 盐酸 混合指示剂 石油醚 盐酸 硫酸 氨水 草酸铵 甲基红 总胆固醇试剂盒 1 1 3 实验设备 电子数显卡尺 恒温水箱 电子天平 电炉 恒温烘箱 高温炉 粉碎机 离心机 分光光度计 电子秤 凯氏定氮仪 脂肪测定仪 1 2 1 实验测量指标 水分 粗蛋白 CP 粗脂肪 EE 无氮浸出物 NFE 胆固醇 钙 总磷 1 2 2 实验方法 1 水分 鸡蛋中水分测定采用 水分 鸡蛋中水分测定采用 GB 6435 1986 烘箱干燥法 烘箱干燥法 清洗称量皿 烘至恒重 称取样品 放入调好温度的烘箱 100 105 烘 1 5 小时 于干燥器冷却 称重 再烘 0 5 小时 称至恒重 两次重量差不超过 0 002g 即为恒重 2 粗蛋白 粗蛋白 CP 粗蛋白测定采用 粗蛋白测定采用 GB T 6432 1994 定氮分析仪法 定氮分析仪法 凯氏定氮法操作步骤 测定原理 鸡蛋经加硫酸消化使蛋白质分解 其中氮素以氨的形式与硫酸化合成硫酸 铵 然后加碱蒸馏使氨游离 用硼酸液吸收形成硼酸铵 再用盐酸标准溶液或硫酸标 准溶液滴定 根据盐酸消耗量计算出总氮量 再乘以一定的数值即为蛋白质含量 其 化学反应式如下 1 消化反应 有机物 含 C N H O P S 等元素 H2S04 NH4 2S04 C02 S02 S03 H3PO4 CO2 2 蒸馏反应 NH4 2SO4 2NAOH 2NH3 2H2O NA2SO4 2NH3 4H3BO3 NH4 2B4O7 5H2O 3 滴定反应 NH4 2B4O7 2HCH 5H2O 2NH4CH 4H3BO3 或 NH4 2B407 H2S04 5H20 NH4 9SO4 4H2BO2 试剂与仪器 1 硫酸钾 2 硫酸铜 3 浓硫酸 4 4 硼酸溶液 饱和溶液 5 40 氢氧化钠溶液 6 混合指示剂 临用时把 溶解于 95 乙醇的 0 l 甲基红溶 液 10 毫升和 溶于 95 乙醇的 0 l 甲基蓝溶液 5 毫升混合而成 7 0 1N 盐酸标准 溶液或 0 1N 硫酸标准溶液 8 凯氏定氮仪一套 1 样品消化 精密称取 0 200 2 00g 固体样品或 2 5g 半固体样品或吸取 10 20ml 液体 样品 约相当氮 30 40mg 移入干燥的 500ml 定氮瓶中 加入 0 5g 硫酸铜 10g 硫 酸钾及 20 毫升硫酸 稍摇匀后于瓶口放一小漏斗 将定氮瓶以 45 度角斜支于有小孔 的石棉网上 小火加热 待内容物全部炭化 泡沫完全停止后 加强火力 并保持瓶 内液体微沸 至液体呈蓝绿色澄清透明后 再继续加热 0 5 小时 取下放冷 小心加 100ml 水 放冷 取与处理样品相同量的硫酸铜 硫酸钾 硫酸 用同一方法做试剂空白试验 2 蒸馏 吸收 按图装好定氮装置 接收瓶内加入 50ml 4 硼酸溶液及混合指示剂 5 滴 并使冷凝管的下端插入液面下 将 70ml 40 氢氧化钠溶液慢慢通过安全漏斗进入 蒸馏烧瓶中 用直火加热蒸馏 30 分钟 移动接收瓶 使冷凝管下端离开液面 再蒸馏 1min 然后用少量水冲洗冷凝管下端外部 取下接收瓶 接收瓶内的溶液呈蓝色 3 滴定 以 0 1N 盐酸标准溶液定至溶液灰色或淡紫色为终点 同时作一试剂空白测 定除不加样品外 丛消化开始操作完全相同 4 计算 蛋白质 V1 V2 N 0 014 F 100 m V1 样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积 ml V2 试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶 液的体积 ml N 硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度 0 014 1N 硫酸或盐酸标准溶 液 1ml 相当于氮克数 m 样品的质量 体积 g ml F 氮换算为蛋白质的 系数 3 粗脂肪粗脂肪 EE 粗脂肪测定采用 粗脂肪测定采用 GB T 6433 2006 残余法残余法 粗脂肪测定 残余法 一 方法原理 一定量的样品经有机溶剂浸提脂肪 称剩余物重 有重量的减少求得脂肪重量计算脂肪含 量 二 试剂 1 无水乙醚 3 仪器 脂肪提取器 水浴 干燥器 烘箱 4 四 操作步骤 1 取经脱脂处理后烘干过的滤纸 折叠成一头开口的纸包 用铅笔编号 然后称重 分析天平 W1 2 取粉碎样品 1g 左右 小心放人纸包内 将口折封 在 100 烘 1 小时 放干燥器中 冷却 后 称重 W2 3 将纸包放人脂肪提取器内 加入无水乙醚 使乙醚能全部浸没纸包并有部分流人下 部 烧瓶中 4 安装好浸提器 注意接口不漏气 水浴加热下部烧瓶 温度约 50 通水冷凝回流 10 小时左右 控制每小时回流 10 次左右 5 打开脂肪提取器 取出纸包 风干 然后在 105 烘于 1 一 2 小时 6 置于干燥器 中冷却后 称重 W3 五 计算 月旨肪 w2 w3 100 w2 w1 式中 W1 滤纸包空重 g w2 滤纸包 样品 重 g W3 滤纸包 残余物 重 g 4 无氮浸出物 无氮浸出物 NFE 粗灰分测定采用 粗灰分测定采用 GB T 6438 2007 饲料中粗灰分测定 饲料中粗灰分测定 原理 试样在 550 度灼烧后 所得残渣 用质量分数表示 残渣中主要是氧化物 盐 类等矿物质 也包括混入饲料中的沙石 土等 故称粗灰分 实验步骤 1 用分析天平称取以灼烧的坩埚质量 2 在已知质量的坩埚中称取 2 5 克式 样 在电炉上低温炭化至无烟为止 3 炭化后 将坩埚移入高温炉中 与 550 20 度下灼烧 3h 取出 在空气中冷却约 1 分钟 放入干燥器冷却 30 分钟 称重 5 总磷 总磷测定采用 总磷 总磷测定采用 GB11893 89 钼黄比色法 钼黄比色法 实验原理 将试样中有机物破坏 使磷元素游离出来 在酸性溶液中 用钒钼酸铵处 理 生成黄色的络合物 在波长 400nm 下进行比色测定 此法测得结果为总磷量 其 中包括动物难以吸收利用的植酸磷 实验步骤 1 试样的分解 称取 2 5 克试样于坩埚中 电炉低温炭化至无烟 高温炉 550 20 度灰化 3h 冷却 向盛有灰分坩埚中加盐酸 10 毫升 浓硝酸溶液 2 3 滴 小心煮沸 用滤纸过滤于 100 毫升容量瓶中 用热水洗涤 5 6 次 用 水定容 摇匀 为试样分解液 2 P 标准曲线的绘制 准确移取磷标准溶液 0 1 2 5 10 15 毫升于 50 毫升容量瓶中 各加入钒钼酸铵显色试剂 10 毫升 用水稀释 至刻度 摇匀 放置 10 分钟 以 0 毫升溶液为参比 用 10mm 比色池 在 400nm 波 长下 用分光光度计测定各个溶液的吸光度 以 50 毫升溶液中磷含量为横坐标 吸光 度为纵坐标绘制标准曲线 3 式样的测定 准确移取试样分解液 2 毫升 50 毫升 容量瓶中 加 10 毫升钒钼酸铵显色剂 用水稀释至刻度 摇匀 放置 10 分钟 以 0 毫升溶液为参比 用 10mm 比色池 在 400nm 波长下 用分光光度计测定溶液 吸光度 用标准曲线查的式样分解液的含磷量 6 钙 钙测定采用 钙 钙测定采用 GB T 5009 92 2003 高锰酸钾滴定法 高锰酸钾滴定法 原理 将试样有机物破坏 钙变成溶于水的离子 并与盐酸反应生成氯化钙 在溶液 中加入草酸铵溶液 使钙成为草酸钙白色沉淀 然后用硫酸溶液溶解草酸钙 再用高 锰酸钾标准滴定溶液滴定游离的草酸根离子 根据高锰酸钾标准滴定溶液的用量 可 以计算出式样的含钙量 实验步骤 1 试样溶液制备 称取 2 5 克试样于坩埚中 炭化 550 20 度炭化 3h 向盛有灰分坩埚中加 1 3 HCL 10 毫升 并滴浓 HNO3 2 3 滴 小心煮沸 用滤纸过滤于 100 毫升容量瓶中 用热水洗涤 5 6 次 用水定容即可 2 草酸钙沉 淀 移取 10 毫升溶液 烧杯中 加水 100 毫升 调 PH 值 2 5 3 0 指示剂甲基红两 滴 滴氨水 红变橙黄 滴盐酸呈红色 电炉上煮沸 滴加 10 毫升草酸铵溶液 且不断搅拌 煮沸 5 分钟 静置过滤 3 沉淀洗涤 过滤沉淀 用氨水溶液洗沉 淀 6 8 次 至无草酸根离子为止 4 沉淀溶解与滴定 滤纸 沉淀 烧杯中 硫 酸溶液 10 毫升 50 毫升水 加热至 80 度左右 用 0 0493mol L 高锰酸钾标准滴 定溶液滴定至终点 30 秒不退色 5 空白试验 一张滤纸 干净烧杯 硫酸溶液 10 毫升 50