选修一+42血红蛋白的提取和分离练习

班级班级 姓名姓名 第第 组组 高中生物选修高中生物选修 1 1 测标题测标题 血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离 第第 1 页页 42血血红红蛋蛋白白的的提提取取和和分分离离 练练习习 命题人 赵雨润 审核人 赵雨润 一 选择题 1 凝胶色谱法分离蛋白质的原理依据是 A 根据蛋白质分子的大小 B 根据蛋白质分子质量的大小 C 根据蛋白质所带电荷的多少 D 根据蛋白质溶解度的大小 2 使用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺电泳过程中 不同蛋白质的电泳迁移率完全取决 于 A 电荷的多少 B 分子的大小 C 肽链的多少 D 分子形状的差异 3 SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入 SDS 的作用是 A 增大蛋白质的相对分子质量 B 改变蛋白质的形状 C 排盖不同种蛋白质间的电荷差别 D 减少蛋白质的相对分子质量 4 下列说法错误的是 A 在一定范围内 缓冲溶液能够抑制外界的酸和碱对溶液 pH 的影响 维持 pH 不 变 B 缓冲溶液通常由于 1 2 种缓冲剂溶解于水中配制而成 C 电泳是指带粒子在电场的作用下发生迁移的过程 D 透析袋能使大分子自由进出 而将小分子保留在袋内 5 电泳过程中 什么样的分子迁移速度最快 A 纤维状 大分子 B 纤维状 小分子 C 球状 大分子 D 球状 小分子 6 下列关于电泳的说法中 不正确的是 A 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 B 带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动 C 蛋白质在 SDS 一聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率完全取决于它所带净电荷的多少 D 蛋白质在 SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小 7 凝胶色谱法洗脱时加入磷酸缓冲液 下列说法不正确的是 A 在一定范围内 能对抗外来大量强酸 强碱对 pH 的影响 维持 pH 基本不变 B 选用磷酸缓冲液 PH 7 0 可用 Na2HPO4和 NaH2PO4按相应配比配制 C 缓冲溶液通常是由一种或两种化合物 缓冲剂 溶解于水中制得 调节缓冲剂的 配比就可制得不同 pH 范围的缓冲液 D 缓冲溶液广泛应用于生化实验 微生物培养 组织切片和细菌的染色等研究 8 下列关于凝胶色谱法的原理及操作 不正确的是 A 是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法 B 在洗脱过程中 大分子不能进入凝胶内部而最先流出 小分子则可以进入凝胶内 部而流速缓慢 以致于最后流出 高中生物必修高中生物必修 1 1 测标题测标题 血红蛋白提取和分离血红蛋白提取和分离 第第 2 页页 C 凝胶内部有很微细的多孔网状结构 其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相 应关系 D 一般情况下 凝胶对要分离的物质没有吸附作用 因此所有要分离的物质都应 该被洗脱出来 9 凝胶色谱法分离蛋白质时 凝胶的种类较多 但其共同的作用是 A 改变蛋白质分子通过凝胶时的路径 B 吸附一部分蛋白质 从而影响蛋白质分子的移动速度 C 将酶或细胞固定在凝胶中 D 与蛋白质分子进行化学反应 从而影响其移动速度 10 为了提取血红蛋白 从学校附近的屠宰场索取新鲜的猪血 对猪血处理的正确操作 是 A 要在采血容器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠 B 取血回来后 马上进行高速长时间离心 C 将离心后的血细胞加入清水缓慢搅拌 D 重复洗涤直到上清液呈红色为止 11 分离血蛋白溶液时 将搅拌好的混合液转移到离心管中 离心后 可以明显看到试 管中的溶液分为四层 从上往下数 其中第二层是 A 无色透明的甲苯层 B 脂溶性物质的沉淀层 C 血红蛋白的水溶液 D 其它杂质的暗红色沉淀物 12 蛋白质提取和分离分为哪几部 A 样品处理 凝胶色谱操作 SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳 B 样品处理 凝胶色谱操作 纯化 C 样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定 D 样品处理 纯化 粗分离 纯度鉴定 13 下列有关凝胶色谱的操作 错误的是 A 封堵玻璃管口的橡皮塞中间打孔 孔径的大小要能够插入 0 5mL 的移液管 B 插入橡皮塞内的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面 C 凝胶色谱柱装填前要将色谱柱垂直固定在支架上 D 装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所要的凝胶量 14 凝胶色谱法分离蛋白质使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶 SephadexG 75 其中 G 和 75 的含义分别是 A G 表示凝胶的使用量 75 表示加 75g 的水 B G 表示凝胶的交联程度 75 表示需要加热到位 75 C G 表示凝胶的交联程度 膨胀程度及分离范围 75 表示每克凝胶膨胀时 吸水 7 5 g D G 表示凝胶的膨胀体积 75 表示每克凝胶膨胀后体积可到 75 cm3 15 下列有关透析的叙述中 错误的是 A 用于透析的薄膜要具有选择透过性 班级班级 姓名姓名 第第 组组 高中生物选修高中生物选修 1 1 测标题测标题 血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离 第第 3 页页 B 透析膜一般是用硝酸纤维素制成的 C 透析能使小分子自由进出 而将大分子保留在袋内 D 透析可用于更换样品的缓冲液 16 将经处理破裂后的红细胞混合液以 2000r min 的速度离心 10 min 后 离心管中的溶 液分为四层 从上到下的顺序依次是 A 血红蛋白 甲苯层 脂质物质层 沉淀层 B 甲苯层 沉淀层 血红蛋白 脂质物质层 C 脂质物质层 血红蛋白 甲苯层 沉淀层 D 甲苯层 脂质物质层 血红蛋白 沉淀层 17 若以鸡蛋蛋白液为材料进行蛋白质鉴定实验 发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后 会粘固在试管壁上 下列关于这一现象形成原因的描述正确的是 A 鸡蛋蛋白液稀释不够 搅拌不匀 B 只添加了双缩脲试剂 A 未添加双缩试剂 B C 鸡蛋蛋白液不是合适的实验材料 D 蛋白液与双缩脲试剂的反应时间不够长 18 制作凝胶色谱柱时 橡皮塞顶部凹穴内插入的移液管的部位及长度是 A 移液管头部 5 cm B 移液管尾部 5 cm C 移液管头部 3 cm D 移液管尾部 3 cm 二 非选择题 19 对血红蛋白的研究结果表明 血红蛋白实际上是由珠蛋白 原卟啉和二价铁离子 Fe2 所组成的结合蛋白质 有 4 条肽链各结合一个辅基即血红素 O2结合于 Fe2 上 血红蛋白与氧疏松结合形成氧合血红蛋白 HbO2 这种氧合作用于氧分压高时 容易进行 于氧分压低时易于解离 红细胞结合和携带 O2的过程并不影响二价铁离 子 也就是说不使之氧化为三价铁离子 Fe3 无携带 O2的能力 CO 与 Hb 的亲和力 大于 O2 结合成 HbCO 后不能重新分离 致使 Hb 丧失运输 O2和 CO2的机能 此称一 氧化碳中毒即煤气中毒 1 用凝胶色谱法分离出血红蛋白时 待 接近色谱柱底端时 才用试管收集 血红蛋白因含 而呈现红色 2 要使血红蛋白从红细胞中释放出来 可选用 的方法 3 红细胞具有运输氧的功能 是因为具有 的特性 4 亚硝酸盐为强氧化剂 进入人体后 可使血红蛋白失去运输氧的功能 导致组织 缺氧 其可能的原因是 20 凝胶色谱技术是 20 世纪 60 年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术 由于 设备简单 操作方便 不需要有机溶剂 对高分子物质有很高的分离效果 目前已 经被生物化学 分子生物学 生物工程学 分子免疫学以及医学等有关领域广泛采 高中生物必修高中生物必修 1 1 测标题测标题 血红蛋白提取和分离血红蛋白提取和分离 第第 4 页页 用 不但应用于科学实验研究 而且已经大规模地用于工业生产 参照右上图 完 成问题 1 a b 均为蛋白质分子 其中先从层析柱中洗脱出来的是 原因是 2 自己制作凝胶色谱柱时 在色谱柱底部 d 位置相当于多孔板的结构可由 替代 3 装填凝胶色谱柱时 色谱柱内不能有气泡存在 原因是 4 若选用 SephadexG100 则 G 表示 100 表示 5 洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体 相同 不同 洗脱时 对 洗脱液的流速要求是 21 红细胞含有大量血红蛋白 红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的 血红蛋白的主 要功能是携带 O2或 CO2 我们可以选用猪 牛 羊或其他脊椎动物的血液进行实验 来提取和分离血红蛋白 请完成下列有关问题 1 血红蛋白提取和分离的程序可分为四步 和 2 实验前取新鲜的血液 要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠 取血回来 马上 进行离心 收集血红蛋白溶液 加入柠檬酸钠的目的是 以上所述的过程即是样品处理 它包括 收集血红蛋白溶 液 3 收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析 这就是样品的粗分离 透析的目的是 透析的原理是 4 然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化 最后经 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯 度鉴定 样品纯化的目的是 血红蛋白有什么特点 这一特点对进行蛋白质的 分离有什么意义 班级班级 姓名姓名 第第 组组 高中生物选修高中生物选修 1 1 测标题测标题 血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离 第第 5 页页 练习 42 答案 1 5BBCDD 6 10CACA 11 15BCBCA 16 18DAA 19 1 红色区带 血红素 2 将红细胞置于蒸馏水中 加体积分数为 40 的甲苯 并搅拌使之破裂 3 红 细胞中的血红蛋白与氧在氧分压高时容易结合 在氧分 压低时又容易分离 4 亚硝酸盐可使血中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白 20 1 a a 相对分子质量大 无法进入凝胶内部的通道 只能在凝胶外部移动 路程 较短 移动速度较快 2 尼龙网和尼龙纱 3 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱 次序 降低分离效果 4 凝胶的交联程度 膨胀程度及分离范围 凝胶得水值 即 每克凝胶膨胀时吸水 10 g 5 相同 保持稳定 21 1 样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定 2 防止血液凝固 红细胞的洗涤 血红蛋白的释放 3 去除相对分子质量较小的杂质 透析袋能使小分子自由进 出 而大分子则保留在袋内 4 通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除 去 血红蛋白呈现红色 在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收 集洗脱液 这使血红蛋白的分离过程非常直观 大大简化了实验操作 练习 42 答案 1 5BBCDD 6 10CACA 11 15BCBCA 16 18DAA 19 1 红色区带 血红素 2 将红细胞置于蒸馏水中 加体积分数为 40 的甲苯 并搅拌使之破裂 3 红 细胞中的血红蛋白与氧在氧分压高时容易结合 在氧分 压低时又容易分离 4 亚硝酸盐可使血中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白 20 1 a a 相对分子质量大 无法进入凝胶内部的通道 只能在凝胶外部移动 路程 较短 移动速度较快 2 尼龙网和尼龙纱 3 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱 次序 降低分离效果