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文档简介

单克隆抗体,单克隆抗体,什么是单克隆抗体,单:克隆:抗体:,单个细胞,无性繁殖,抗原 抗体,特异性结合,抗体是由何种细胞产生的?2 . 抗体是如何产生的?,单克隆抗体,抗体不纯,筛选单一浆细胞,不能增殖产生大量抗体,产量少、纯度低、特异性差,单克隆抗体,3、传统制备抗体的缺点是?,3、传统制备抗体的方法是?,如何获得化学性质单一、特异性强的抗体?,单克隆抗体,问题讨论,提示:,1 .什么样的细胞可以产生抗体?2 .什么样的细胞可以无限增殖?,瘤细胞和癌细胞有何区别?,共同点:两者都有无限增殖的能力不同点:瘤细胞不能转移,设计方案:一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,杂种细胞,单克隆抗体,单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,(选择性培养基),选择性培养基:使亲本细胞不能存活而杂种细胞可存活,单克隆抗体,诱导其融合的方法有哪些?,2.制备过程:,诱导其融合的方法有哪些?,融合后培养液中有几种细胞?,怎样筛选出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞有何优点?,注射抗原的目的是什么?,为何要进行克隆化培养和专一抗体检测,并多次筛选?,获得单抗的方法有哪些?,B BB B瘤 瘤瘤 瘤,细胞融合后培养液中有几种细胞?,已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加PEG促融,获得杂种细胞。,单克隆抗体,思考:,单克隆抗体,思考:,1. 小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合?2. 制备过程中应用哪些细胞工程技术手段?,细胞的同源性越近,融合形成的杂种细胞越易成活,细胞融合技术、细胞培养技术,单克隆抗体, 在基础理论研究中具有重要意义 在疾病诊断、治疗和预防方面,具有特异性高、灵敏度高等优越性。 生物导弹,(作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”治疗肿瘤),单克隆抗体的应用,单克隆抗体的应用,应用: 疾病的诊断、治疗和预防。优点:特异性强、灵敏度高。实例:1、各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断;2、在疾病治疗方面,单克隆抗体犹如人体卫士,能识别“自己”与“异己”,一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。3、若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”,将药物定向带到癌细胞所在部位,既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。,小结,两个过程,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个

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