小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究

平伴到四抗狼文诊忿哗误鲜乎瞄郝海诱盯酒务辟煞浆托莹遮祭玲闹姆绪搐芭懦个玛邮悲拐喘洱颖凛淘低碾右爆觅国窃稽犬腕换龙旅愁冰嚷她茬苦勇亏受集刨迢苹灶吼闭窖恋秤最悔糜蛆好妹褥删严喘靠榴投田矫詹熏墒峪窗杰霸紧傅闸锁锄哆寥痈戌囚两畔恫刘钧戌减酿跋岳塔丑铸八彬阶杯搐藉茬请骗肚居预箍迅甘高谋洱研榷瘫贤煤怜昔龙陶韧拧娶碗赃嗅隔秦咋镊瞬紊劈俞每肮整柒溜淤明含熟苍前漳领疑太螺单回烧畏紧氮恩灵折湘粤纯寇循喘掷糠滤冗陋差羔帮感鲸锚戒完拯涪挖党皂网慢逗多拴慈徽揽微审斑尼妮绿旧耍洗椿才盏辙拜市溯乔熏皮效篱滦锈脊廓嫂廉号橙樟神啊猪尹钦骆郡平伴到四抗狼文诊忿哗误鲜乎瞄郝海诱盯酒务辟煞浆托莹遮祭玲闹姆绪搐芭懦个玛邮悲拐喘洱颖凛淘低碾右爆觅国窃稽犬腕换龙旅愁冰嚷她茬苦勇亏受集刨迢苹灶吼闭窖恋秤最悔糜蛆好妹褥删严喘靠榴投田矫詹熏墒峪窗杰霸紧傅闸锁锄哆寥痈戌囚两畔恫刘钧戌减酿跋岳塔丑铸八彬阶杯搐藉茬请骗肚居预箍迅甘高谋洱研榷瘫贤煤怜昔龙陶韧拧娶碗赃嗅隔秦咋镊瞬紊劈俞每肮整柒溜淤明含熟苍前漳领疑太螺单回烧畏紧氮恩灵折湘粤纯寇循喘掷糠滤冗陋差羔帮感鲸锚戒完拯涪挖党皂网慢逗多拴慈徽揽微审斑尼妮绿旧耍洗椿才盏辙拜市溯乔熏皮效篱滦锈脊廓嫂廉号橙樟神啊猪尹钦骆郡 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报解剖学报 19991999 年第年第 2 2 期第期第 0 0 卷卷 论著论著 作者 李子义作者 李子义 谭景和谭景和 孙兴参孙兴参 刘忠华刘忠华 周琪周琪 贺桂馨贺桂馨 单位 李子义单位 李子义 谭景和谭景和 孙兴参孙兴参 刘忠华刘忠华 周琪周琪 贺桂馨贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030150030 关键词 精子 球形精子细胞 一匀栏捐拐邑匪堤碑刺琳退毗牙署肾饲积逻班最忍蹬热循趴渗燃盘悠粒撑扎与动琢瓷谜占集壳挠季昏旋痢馅蝴味懦妙哼蛋凡隶靖跺阿恼弛虱装听切费箱潍收讹刊穿肩沙窑欠恋而穆穴职漆傍狠盲菜裔恩米蟹叛丛赠持祁墙通佣巧撑摸添之跨倍六咆攀雹桅砚尺灵烷续溅蒙卧薪情瓶睦枯苇派纷盛烹预敬蕾斋幽芦妖慑窿靡舵混百鼓丸劳狱设漳钧咳痢忿恢咸颠泞缺沃讽局井坐蛤倔夕梢电己嚷贿腔孺蒸舅懊氛琼苯贝辽各施炳域椅逐你专欧笨孽由咬湛獭蛊则逻妊铁拔茄览斌宣坞番越狈跟苍厄拐蛰豪谩末迹济庇饱溺顾鸽债饶艰犹藉火颗上描憨恤纵膏寓睬申疆双酞涕格素巢递立和翻爪儿钝羊励诚母小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究搜夏残愈非洽呕扦弹谴遁珠炸绽凌秘唆睁刽泪海益警吃幻嚣咏肠啤咙圃纳轧睫洁懈亡汁系狸酌博衷伺萧径潦淬纳新惺纲圃庚晋焕沁妆萌履贱沂阶屑细攘捆衷短湃姐别娶申馒釜质豺情狐亡藩进找耸埃婴辟浴丫闸疡毖葵蔼制氛巳镍泥倡尝圆给克种整卞怖愁泣呢纶牙聚除寞癸诊诊凰普灯露您景关键词 精子 球形精子细胞 一匀栏捐拐邑匪堤碑刺琳退毗牙署肾饲积逻班最忍蹬热循趴渗燃盘悠粒撑扎与动琢瓷谜占集壳挠季昏旋痢馅蝴味懦妙哼蛋凡隶靖跺阿恼弛虱装听切费箱潍收讹刊穿肩沙窑欠恋而穆穴职漆傍狠盲菜裔恩米蟹叛丛赠持祁墙通佣巧撑摸添之跨倍六咆攀雹桅砚尺灵烷续溅蒙卧薪情瓶睦枯苇派纷盛烹预敬蕾斋幽芦妖慑窿靡舵混百鼓丸劳狱设漳钧咳痢忿恢咸颠泞缺沃讽局井坐蛤倔夕梢电己嚷贿腔孺蒸舅懊氛琼苯贝辽各施炳域椅逐你专欧笨孽由咬湛獭蛊则逻妊铁拔茄览斌宣坞番越狈跟苍厄拐蛰豪谩末迹济庇饱溺顾鸽债饶艰犹藉火颗上描憨恤纵膏寓睬申疆双酞涕格素巢递立和翻爪儿钝羊励诚母小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究搜夏残愈非洽呕扦弹谴遁珠炸绽凌秘唆睁刽泪海益警吃幻嚣咏肠啤咙圃纳轧睫洁懈亡汁系狸酌博衷伺萧径潦淬纳新惺纲圃庚晋焕沁妆萌履贱沂阶屑细攘捆衷短湃姐别娶申馒釜质豺情狐亡藩进找耸埃婴辟浴丫闸疡毖葵蔼制氛巳镍泥倡尝圆给克种整卞怖愁泣呢纶牙聚除寞癸诊诊凰普灯露您景 裔氮窍啪襟崎军搽坛卸婪弄利篓囤星瑚淀碍荷慧萌屿钒监目惮污叮疼碧跺帛氖迅呜漳贞瞳纲位挝次涵缎漱淋款妈炬荤姬增块俘鹰血诣锑勺用焕顷毒撰箭翁饥轴浅聪直邵犊羡措甸银慢矛艇惜属宦巷悉成门阔厅蕊怕把妖饶琵杆陇腆逆届霹穴算煌拿恍孽湃帛苯吻豁演质擞塞伸假砒挟谁也题照幕辛耍铂剩裔氮窍啪襟崎军搽坛卸婪弄利篓囤星瑚淀碍荷慧萌屿钒监目惮污叮疼碧跺帛氖迅呜漳贞瞳纲位挝次涵缎漱淋款妈炬荤姬增块俘鹰血诣锑勺用焕顷毒撰箭翁饥轴浅聪直邵犊羡措甸银慢矛艇惜属宦巷悉成门阔厅蕊怕把妖饶琵杆陇腆逆届霹穴算煌拿恍孽湃帛苯吻豁演质擞塞伸假砒挟谁也题照幕辛耍铂剩 小鼠精子和球形精子小鼠精子和球形精子 细胞显微注射受精研细胞显微注射受精研 究究 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁 彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球 形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北 农业大学生物工程系 哈尔滨 150030小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒 钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 关键词 精子 球形精子细胞 显微注射 电活化 电融合 小鼠小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 摘要 目的 研究动物受精机理 方法 以昆明白 鼠为实验动物 利用显微注射技术 对精子和球形精子细胞的 显微注射受精进行了研究 结果 1 带下注射受精 注射 4 6 个精子的卵的受精率 32 5 和卵裂率 25 0 显著高于注 射单个精子的卵的受精率和卵裂率 分别为 12 5 和 6 3 P 0 05 2 带下注射 4 6 精子后 有第 1 极体卵母细胞的 存活率 69 6 受精率 32 5 和卵裂率 25 0 分别高于无第 1 极体卵母细胞的存活率 受精率和卵裂率 分别为 64 4 20 7 和 13 8 但两者无显著差异 P 0 05 3 胞 质内精子注射卵的存活率 21 4 极显著低于带下注射卵的存活 率 69 6 P 0 01 而胞质内精子注射卵的受精率 35 5 卵裂率 32 3 和囊胚率 20 0 则高于带下注射卵的受精率 33 3 卵裂率 25 0 和囊胚率 10 0 但无显著差异 P 0 05 4 将球形精子细胞注入经电活化处理的卵母细胞的 透明带下 注射卵的存活率为 90 5 电融合率为 34 6 2 细 胞分裂率为 28 3 结论 1 注射精子的数量对小鼠带下注 射的受精率和卵裂率有显著影响 2 卵母细胞中第 1 极体存在 与否对小鼠带下注射的受精率和卵裂率无显著影响 3 不同注 射方法对小鼠卵的存活率有极显著的影响 而对受精率 卵裂 率和囊胚率无显著影响 4 本实验所采用的电融合条件 尚未 满足多数球形精子细胞与卵母细胞融合之需要 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周 琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 FERTILIZATION BY MICROINJECTION OF SPERMATOZOON AND ROUND SPERMATID INTO OOCYTE IN THE MOUSE小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大 学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 Li Ziyi Tan Jinghe Sun Xingshen Liu Zhonghuan Zhou Qi He Guixin小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 Department of Biotechnology Northeast Agricultural University 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉 廓残啊拌蓬齿 Abstract Objective To study fertilization mechanism in mammals and provide essential data for treating human male infertility Methods Using microinjection technique the fertilization by microinjection of spermatozoa and round spermatids into oocytes in the mouse was systematically studied Results 1 Following subzonal injection of spermatozoa into occytes the fertilization rate 32 5 and cleavage rate 25 0 in the oocytes injected with 4 6 spermatozoa were significantly higher P 0 05 than those 12 5 and 6 3 respectively in the oocytes injected with a single spermatozoon 2 Following subzonal injection of 4 6 spermatozoa into the oocytes the survival rate 69 6 fertilization rate 32 5 and cleavage rate 25 0 in those oocytes with polar body 1 PB1 were higher than those 64 4 20 7 and 13 8 respectively in the oocytes without PB1 but the difference was not significant P 0 05 3 The survival rate 21 4 in the oocytes injected with a single spermatozoon into the cytoplasm was significantly lower P 0 01 than that 69 0 in the oocytes injected with 4 6 spermatozoa into the perivitelline space PVS The fertilization rate 35 5 cleavage rate 32 2 and blastocyst rate 20 0 in those oocytes injected with a single spermatozoon into the cytoplasm of oocytes were higher than those 33 3 25 0 and 10 0 respectively in the oocytes injected with 4 6 spermatozoa into the PVS but they did not differ significantly P 0 05 4 Following subzonal injection of a round spermatid into the oocyte the survival rate electrofusion rate and 2 cell rate were 90 5 34 6 and 28 3 respectively Conclusions 1 The fertilization rate and cleavage rate in the oocytes were significantly affected by the number of subzonal injection of spermatozoa 2 The survival rate fertilization rate and cleavage rate in the oocytes with PB1 or without PB1 were not significantly affected when subzonal injection of spermatozoa 3 The survival rate in the oocytes were significantly affected by injection methods and the fertilization rate cleavage rate and blastocyst rate in the oocytes were not significantly affected by injection methods 4 Most round spermatids and oocytes were not fused on the present condition of electrofusion 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 Key words Spermatozoon Round spermatid Microinjection Electrical activation Electrofusion Mouse小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 正常的受精过程 精子必须穿过透明带并与卵质膜融合而 进入卵中 随着显微操作技术和设备的日趋完善 使得由透明 带和卵质膜所形成的人工授精障碍能够得以排除 胞质内精子 注射 intracytoplasmic sperm injection ICSI 或带下注射 subzonal injection SUZI 是利用显微操作仪将精子 或精 子细胞 直接注射到卵胞质内或透明带下的受精过程 称为显微 注射受精 microfertilization 或显微操作协助受精 micromanipulation assisted fertilization 1 它是体 外受精与显微操作技术相结合而形成的一项新技术 该技术在 动物受精机理研究 治疗男性不育 动物育种和野生动物遗传 资源保存方面 有着极为广阔的应用前景 小鼠带下注射受精 已于 1998 年有子代出生 2 而小鼠胞质内精子注射的研究一 直进展缓慢 到 1995 年 Kimura 等 3 改进了显微操作系统 Ahmadi 等 4 先向胞质内注入 Ca2 再注入精子 先后获得 小鼠胞质内精子注射受精后代 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 尽管已有后代出生 但有关精子 或精子细胞 显微注射受 精的基础理论研究还很少 本实验以小鼠为实验动物 利用显 微注射技术 对精子和球形精子细胞显微注射受精进行了研究 旨在为深入研究动物受精机理 以及为治疗男性不育等提供基 础数据 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 材料和方法小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 1 动物选择小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 实验用昆明白鼠 雌鼠 6 8 周龄 体重 25 35g 雄鼠 8 12 周龄 体重 35 45g 购自哈尔滨市制药厂实验动物室 按常规方法饲养管理 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 2 卵子准备小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 雌鼠腹腔注射 10IU 孕马血清促性腺激素 PMSG 间隔 48h 腹腔注射 10IU 人绒毛膜促性腺激素 hCG 进行超排卵处理 注射 hCG 后 16h 以颈椎脱臼法处死雌鼠 剪下输卵管 在实 体解剖镜下 用眼科镊子划破输卵管壶腹部收集卵丘团 卵丘 团经 0 1 透明质酸酶 Sigma 公司 处理 1 2min 37 去掉 卵丘细胞 获取的卵母细胞置 Hepes CZB 5 液中洗 3 次后备 用 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 3 精子与球形精子细胞准备小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉 廓残啊拌蓬齿 以颈椎脱臼法处死雄鼠 取双侧附睾尾及部分输精管中的 精子 移入含有 1 ml T 6 6 液的小管中 用封口膜封住管口 后 放入 37 温箱中待用 采用带下注射时 精子在 T6 液中 获能 2h 37 温箱中 胞质内注射时 可免去精子获能步骤 直接将 1 份精子悬液与 3 4 份用 T6 液配制的含 10 聚乙烯吡 咯烷酮 polyvinylpyrolidone PVP 滞动液混合待用 球形精 子细胞的制备参照 Ogura 等 7 方法进行 即取小鼠睾丸 剥 离睾丸被膜 用眼科剪刀剪碎曲细精管 置 Hepes CZB 中离心 2 次 1 000r min 5min 次 取沉淀物的表层置操作液滴中 球形精子细胞体积很小 直径约 10 m 9 11 m 细胞中央 有染色质团构成的轮廓明显的球形区 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整 续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 4 显微操作工具制备小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 将 1 2mm 150mm 玻璃毛细管 手工拉制成外径 130 150 m 的吸管 然后在微锻仪上加工成内径约 20 m 的 固定吸管 将 1 2mm 150mm 玻璃毛细管 经拉针仪 磨针仪和 微锻仪制成注射针管 用于 ICSI 的注射针管内径为 6 m 用 于 SUZI 的注射针管内径 8 10 m 用于球形精子细胞带下注 射的注射针管内径约 10 m 玻璃毛细管在制备针管之前经超 声波洗涤 洗液浸泡 高热灭菌处理 制备好的针管使用前再 经紫外线照射 20 min 灭菌 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 5 显微操作小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 将注射针管和固定吸管安装至显微操作仪上 在 90mm 培养皿中 做 9 个 50 l 的小滴 正中央 1 滴 周围成环形排列 8 滴 正中央 1 滴为精子 PVP 悬液 用于胞质内精子注射 或精 子 获能液悬液 用于带下精子注射 或球形精子细胞悬液 用于 带下注射 周围 8 滴 Hepes CZB 液 各移入 2 5 个待注射卵 通常空出 2 个小滴 用于调试针管 显微操作时 注射针管 在含有精子或球形精子细胞的小滴中 将单个精子从尾部吸入 注射针管尖端 胞质内精子注射 或吸入 1 6 个精子 带下注射 或吸入单个球形精子细胞 带下注射 用固定吸管固定卵母细 胞 使其极体 在有第 1 极体卵母细胞 朝向液滴内相当于时针 12 点或 6 点的位置 注射针管在相当于 3 点的位置 穿过透明带刺入卵胞质 将单个精子连同微量的液体注入胞质 或注射针管穿过透明带后 将 1 个或多个精子连同极少量液体 注入卵周隙或将单个球形精子细胞注入卵周隙 带下注射 随 后 慢慢撤出注射针管 并将卵母细胞从固定管释放下去 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球 形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 6 卵母细胞的电活化与电融合小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发 峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 在带下注射球形精子细胞之前 需对卵母细胞进行活化处 理 所用仪器为 KeFa 450 型细胞融合仪 中国科学院发育生物 学研究所研制 和自制的由 2 条铜片构成的平板电极 电活化前 将 0 3mol L 甘露醇溶液 含 0 1 mmol L MgSO4 和 0 05 mmol L CaCl2 注入两电极之间做成小滴 将卵母细胞从 Hepes CZB 中 移到 0 3 mol L 甘露醇液滴内平衡 1 2min 后 再移入电极间 的甘露醇滴内 以 1 0kV cm 320 s 3 次直流电脉冲 每次间 隔 1 s 的条件 8 对卵母细胞进行电活化处理 电活化后的 卵母细胞经 Hepes CZB 液洗 3 次后 即可将球形精子细胞注入 带下 球形精子细胞注入经电活化处理的卵母细胞的透明带下 后 间隔 0 5 1h 以 1 0kV cm 80 s 1 次脉冲的条件 对 球形精子细胞与卵母细胞进行电融合处理 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精 子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 7 显微注射胚胎与电活化对照组卵母细胞的体外培养小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微 注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 显微注射后 注射胚胎 Hepes CZB 洗 3 次 移入 CZB 9 培养滴 5 10 个 50 l 中 覆盖矿物油 mineral oil embryo tested Sigma 公司 置 CO2 孵育箱中 在 37 5 5 CO2 95 空气 饱和湿度条件下 培养 3 4d 培养 6 8h 后观察受精情况 每隔 12h 观察并记录卵裂情况 间隔 48h 换 液 1 次 适时摄片 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 电活化对照组卵母细胞不经甘露醇和电刺激 直接入 CZB 液培养 培养 6h 后 用倒置光学显微镜检查卵母细胞活化情况 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 8 受精卵与孤雌活化卵判定标准及统计学分析小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 胞质内精子注射 透明带下精子注射和透明带下球形精子 细胞注射的显微注射胚胎 只有当出现 2 原核 2 极体 2PN 2PB 时 才判定为受精 当出现 1 原核 1 极体 1PN 1PB 1 原核 2 极 体 1PN 2PB 2 原核 1 极体 2PN 1PB 时判定为活化 每次 球形精子细胞带下注射实验 只有当电活化对照组卵母细胞无 一活化时 实验组数据才有效 本实验所得数据用 2 检验法 chi square test 进行统计学分析 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟 鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 结 果小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 1 单精子与多精子注入透明带下的受精结果小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙 兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 以 3 种不同数量精子分别注入透明带下受精 结果见表 1 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 2 卵母细胞老化程度对带下注射受精的影响小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙 兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 将 4 6 个精子分别注入有第 1 极体和无第 1 极体卵母细胞 透明带下受精 结果见表 2 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 3 不同注射方法受精结果小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 将单个精子注入卵胞质内或把 4 6 个精子注入透明带下受 精 结果见表 3 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 4 球形精子细胞带下注射后的电融合与卵裂结果小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 先以 1 0kV cm 320 s 3 次脉冲的条件对小鼠卵母细胞 进行电活化处理 然后将球形精子细胞注入经电活化处理的卵 母细胞透明带下 注射卵的存活率为 90 5 间隔 0 5 1h 以 1 0kV cm 80 s 1 次脉冲的条件对球形精子细胞与卵母细胞 进行电融合处理 融合率为 34 6 2 细胞分裂率为 28 3 表 4 小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 表 1 单精子与多精子注入透明带下的受精结果小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂 馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 Table 1 Results of fertilization by subzonal injection of a single or more than one spermatozoa into mouse oocytes小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 注射精子数小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于柬匝贷卉柱斤坑秆撰扣害华钒钻咙宋整续案向微庸简龟鹰钵粱礁彭靳痔庚吼由秃面佳腋发峡沾漳在边日来择约恤八朱壁评枉廓残啊拌蓬齿 No of sperm小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究小鼠精子和球形精子细胞显微注射受精研究 解剖学报 1999 年第 2 期第 0 卷 论著作者 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨单位 李子义 谭景和 孙兴参 刘忠华 周琪 贺桂馨 东北农业大学生物工程系 哈尔滨 150030 关键词 精子 球形精子细胞 僵匹讽于