阿莫西林胶囊含量测定

实验四实验四 HPLC法测定阿莫西林胶囊的含量法测定阿莫西林胶囊的含量 实验目的 实验目的 1 熟练掌握安捷伦 1100 液相色谱仪的操作 2 对液相色谱仪出现的一些故障和维护会进行简单维护 3 通过外标一点法计算药物浓度 4 采用高效液相色谱法对阿莫西林胶囊主成分阿莫西林进行含量测定 实验原理 实验原理 利用高效液相色谱仪的高选择性 高灵敏度等特点 通过记录已知浓度 的阿莫西林对照品的色谱峰面积 并测定未知浓度的阿莫西林胶囊的色谱峰面积 根据外标一点法计算胶囊中阿莫西林的标示量的百分含量 实验背景 实验背景 阿莫西林 Amoxicillin 为 内酰胺类抗生素 临床疗效好 可口服且不 易引起过敏 2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法 页码401 404 方法操作简便 快速 准确 专属性好 1 仪器与试药仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪 G1310 泵 G2280进样器 G1314A紫外波长检测器 阿莫西林对照品由中国食品药品检定研究院提供 纯度为86 4 乙腈为色谱纯 磷酸二氢钾为分析纯 阿莫西林胶囊由国内某药厂提供 50 ml容量瓶 小镊子 棉花 无水乙醇 2 色谱条件色谱条件 色谱柱 Zorbax SB C18色谱柱 4 6 mm 150 mm 5 m 流动相 50 mmol L磷酸二 氢钾溶液 乙腈 97 5 2 5 v v 流速1 0 ml min 检测波长254 nm 进样量20 l 柱温室温 3 实验方法及结果实验方法及结果 参照2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法 页码401 404 阿莫西林峰与杂质峰的分离度需大于1 5 3 1 流动相的配制 称取6 8 g磷酸二氢钾固体粉末 用1 L纯水溶解 量筒精密量 取975 mL磷酸二氢钾水溶液于试剂瓶中 精密量取25 mL乙腈溶液 两相混合 超 声10 min后用于流动相 3 2 对照品溶液的制备 精密称取阿莫西林对照品适量 置50 mL量瓶中 用流动 相溶解并稀释至刻度 摇匀 配制成0 5 mg mL的标准溶液 备用 3 3 样品溶液的制备 取阿莫西林胶囊5粒 准确称量后取出内容物 研匀 精密 称粉末25 mg 置50 mL量瓶中 用流动相溶解并稀释至刻度 备用 用少许棉花将 胶囊壳中残留药物拭尽 准确秤取空胶囊壳的重量 并算出5粒胶囊内容物的重量 进一步算出平均装量 3 4 样品测定 吸取标准溶液20 L注入液相色谱仪 记录峰面积和保留时间 取样 品20 L注入液相色谱仪 以外标法一点法进行含量测定 3 5 计算 A供 A标 C供 C标 含量 C供 50 M平均装量 M称样量 500 100 A供 A标 C供 C标 含量 C供 50 M平均装量 M称样量 500 100 含量 C供 50 M平均装量 M称样量 500 100 4 实验注意事项实验注意事项 4 1 高效液相色谱仪在进样之前需打开purge阀 加大泵流量 流速为2 3 ml min 并开启泵 排除管路中的气泡 4 2 进样前需用流动相平衡色谱柱15 min 按照色谱柱几何体积5 10倍流动相冲 洗色谱柱 确保色谱柱平衡良好 4 3 进样前所填写的sample information文件名和进样瓶位置是否填写正确 确保进 样的正确性 4 4 待基线稳定后进样 在采集色谱图过程中注意柱压变化 若柱压有显著增加或 降低 说明管路有堵塞或漏液现象 应立即停止进样 关掉泵流速 仔细检查排除 故障 4 5 所有进样结束后 需对管路进行用色谱甲醇或乙腈进行冲洗 色谱柱也用色谱 甲醇或色谱乙腈进行冲洗至少10 min后 保存色谱柱待下次使用 5 实验解答题实验