陕西省延长县中学高中生物《52 植物种苗脱毒技术》导学案 中图版选修1

用心 爱心 专心1 延长县中学学生自主学习导学案延长县中学学生自主学习导学案 科科 目目 生物课课 题题课型课型 设计人设计人 审查人审查人审批人审批人序号序号 学习学习 目标目标 1 了解植物病毒的侵染规律及分布特点 2 掌握作物脱毒的培养过程 3 了解应用脱毒种苗的实践意义 自主学习自主学习 1 农作物在种植过程中经常会受到 和 等 病原体感染 导致产量降低 品种退化 2 分生区一般不会受到病毒侵染 在植物生长过程中 侵入植物体的病毒可以通过 和 扩散到所有的组织器官 但是植物的茎尖等分生组织处于 阶段 其组织内 还未形成 此时植物体内的病毒只能通过 移动到分生区 而这一移动过程远不及 速度 所以分生区一般 不会受到病毒侵染 3 种苗脱毒 把 从感染病毒的植株上剥离 在 条件下进行组织培养 从而获得不含 的 这一过程称 为种苗脱毒 合作学习合作学习 实践案例 实践案例 马铃薯脱毒苗的培养 1 材料用具 略 注意 这里所提到的 MS 培养基是灭完菌的 2 活动程序 1 取材和消毒 剪下后用 冲洗 10min 在无菌室内用 消毒后 再用 冲洗 2 3 次 2 剥离和接种 在 40 倍 下操作 用解剖针细心剥取所需的茎尖 约 0 1 0 5cm 将茎尖接种于 MS 培养基上 接触培养基 用心 爱心 专心2 3 培养 将接种的茎尖置于 25 C 1500 3000Lx 光照条件下培养 4 移栽 茎尖长成 3 4 片叶的小植株 即可移栽 3 结果分析 1 检测马铃薯脱毒是否成功 2 计算脱毒成功率 探究活动探究活动 1 草莓脱毒苗的培养 2 探究切取茎尖的最佳长度 设计对照实验 自变量是 当堂检测当堂检测 1 马铃薯可以进行的生殖方式是 A 出芽生殖和有性生殖 B 分裂生殖和营养生殖 C 营养生殖和有性生殖 D 出芽生殖和营养生殖 2 马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖 种植的世代多了以后往往会感染病毒 而减产 为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植 获得无病毒幼苗的最佳 办法是 A 选择优良品种进行杂交 B 进行远缘植物体细胞杂交 C 利用茎尖进行组织培养 D 人工诱导基因突变 3 植物组织培养过程的顺序是 外植体 根 芽 愈伤组织 脱分化 再分化 植物体 A B C D 4 科学工作者把胡萝卜的韧皮部细胞分离出来 将单个细胞放入培养基中培 养 获得了许多完整的植株 这些植株的共同特点是 A 彼此性状相似 B 变异频率较高 C 单倍体 D 都是纯合子 用心 爱心 专心3 课堂小结课堂小结 课后练习课后练习 课本 66 页 1 2 题 自学反馈自学反馈 背景知识背景知识 无病毒苗的获得 一 材料的培养和灭菌 为了获得无菌的茎尖 应把供试植株种在无菌的盆土中 放在温室栽培 浇水要浇在土中 不要浇在叶片上 如材料取自田间 可切取插条 在实验室 内进行溶液培养 由这些插条的腋芽长成的枝条 其污染程度比直接从田间植 株取来的枝条少得多 自外 定期喷施内吸杀菌剂 如 0 1 多菌灵和 0 1 链 霉素 也十分有效 二 茎类剥离 取幼苗茎尖 2 3cm 小段 剥去可见的大叶 放在烧杯内用自来水冲洗 1h 左右 移入无菌室进行严格消毒 先用 95 酒精快速浸泡一下 再放入 5 的漂 白粉溶液内消毒 7 10min 也可用市场上出售的次氯酸钠溶液稀释为 5 然 后用无菌水冲洗 3 4 次 在双筒解剖镜下一手用细镊子将茎芽按住 另一手用 解剖针仔细地将幼叶剥去 最后露出圆滑的生长点 用注的针头侧刃或自制的 解剖针 仔细地切取带有 1 2 个叶原基的生长点 随即接种到试管培养基上进 行培养 这样外植体 生长锥带 1 2 个原叶基 的培养 严格来说 应称为分 生组织培养 以上操作必须严格在无菌条件下的超净工作台中进行 所用器具都应浸泡 于 70 的酒精中 使用前要在究竟灯上烧灼灭菌 注意不使解剖针 刀太烫 以免损伤组织 解剖镜台应垫载玻片 每剥离一个茎尖应以酒精棉团擦拭 手 也应经常用 70 酒精擦试 茎尖很幼嫩 暴露时间越短约好 因为超净台的气 流和酒精灯发出的热都会使茎尖迅速变干 三 茎尖培养 目前常使用的的基本培养基是 MS 培养基或 White 培养基 它有较高浓度 的无机盐 对促进组织分化和愈伤组织生长是有利的 在培养基中可酌情添加 5 10 椰乳 0 1 1 0mg L 的吲哚乙酸 萘乙酸 苄基腺嘌呤等 有的还需添 加活性炭 根据培养种类不同 添加的生长调节剂可适当调整 茎尖培养的生长可能有 4 种类型 组织不增大 不久变褐死亡 这可 用心 爱心 专心4 能是生长点受伤所致 组织渐变绿 但体积增大缓慢 可把组织转到 NAA 浓度高于 0 05mg L 的培养基上 并提高温度以加速其生长 组织基部不 产生或少量产生愈伤组织 而生长点发育正常 一个月内可形成无根的小植株 这是最理想的情况 当长有 2 3 片西欧啊叶时 应把小植株转到无生长素的培 养基上 促进生根 茎尖基部产生大量愈伤组织而生长点很少伸长 不理 想 这时应把这些愈伤组织转移到无生长素的培养基上 并降低培养温度 以 抑制愈伤组织生长促进其分化 四 提高脱毒效果 感染了病毒的蜘蛛在切取茎尖进行培养之前 进行高温处理 低温处理或 化学处理 可以提高脱毒效果 1 高温处理又称温热疗法 某些病毒受热以后不稳定 失去活性 根据这个原理 把植物放在高于正常温度的环境中 组织内部的病毒 受热后部分或全部钝化 但寄主植物的组织很少或不会受到伤害 高温处理有两种方法 1 汤浸渍处理 适用于切下的材料 在 50 C 左右的温水中浸渍数分 钟至数小时 方法简便易行但易致材料受伤 2 热风处理 将生长的盆栽植物移入室内或生长箱内 处理温度和时间 因植物种类和器官生理状况而异 一般为 35 40 C 短则几十分钟 长可达数 月 每一种植物高温处理有他的临界温度 超出这个温度或温度虽在此范围内 但处理时间过长 组织就受伤 可以采用变温方法 即每天 40 C 处理 4 h 16 20 C 处理 20 h 这样 既可保持芽眼的活力 亦可清除芽眼中幼叶的 病毒 2 低温处理 亦称冷疗法 菊花植株在 5 C 条件下分别处理 4 个 月或 7 5 个月 没有菊花矮化病毒 CSV 的无病毒苗分别是 67 和 73 而没有菊花褪绿斑驳病毒 CCMV 的无病毒苗分别是 22 和 49 未经处理的茎尖则无脱毒效果 3 化学处理 又称化学疗法 一些化学药品如嘌呤和嘧啶 类似 物 氨基酸 抗生素处理 可在某种程度上抑制植物体内或离体叶片 内病毒的合成 但仍不能是病毒失活 近年发现三氮唑核苷 1 D 呋喃核糖 1