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文档简介
第四节细胞培养与细胞杂交 一 植物细胞培养 外植体培养 诱发产生愈伤组织 用于研究植物的生长发育 分化和变异 进行无性繁殖 制取代谢产物 悬浮细胞培养 适合于进行产业化大规模细胞培养 制取植物代谢产物 原生质体培养 培养脱壁后的细胞 特点 比较容易摄取外来的遗传物质 如DNA 便于进行细胞融合 形成杂交细胞 适宜条件下可产生细胞壁 经诱导分化成完整植株 单倍体培养 通过花药或花粉培养可获得单倍体植株 PlantCellCulture AnimalCellCulture 二 动物细胞培养 群体培养 massculture 将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中 让细胞贴壁生长 汇合 confluence 后形成均匀的单细胞层 克隆培养 clonalculture 培养高度稀释的细胞悬液 细胞贴壁生长 每一个细胞形成一个细胞集落 称为克隆 转鼓培养法 为制取细胞产品而设计 大容量旋转培养 使培养的细胞始终处于悬浮状态之中 原代培养 primaryculture 即 培养直接来自动物机体的细胞群 将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶称为传代或传代培养 Passage 细胞株 cellstrain 从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群 细胞系 cellline 从肿瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞 可无限繁殖 克隆 clone 亦称无性系 指由同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群 表 实验室中常用的几种细胞系 HenriettaLacks Americanblack diedofcancerofuterinecervixin1951 三 细胞融合 通过培养和介导 两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合 cellfusion 或细胞杂交 同核体 相同基因型的细胞融合而成 异核体 不同基因型的细胞融合而成 自发融合 同种细胞在培养过程中自发合并的现象 诱发融合 异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合 诱导细胞融合的方法 生物方法 仙台病毒 副流感病毒和新城鸡瘟病毒 化学方法 聚乙二醇PEG 物理方法 电击和激光 单克隆抗体技术正常淋巴细胞 如小鼠脾细胞 具有分泌抗体的能力 但不能长期培养 瘤细胞 如骨髓瘤 可以在体外长期培养 但不分泌抗体 于是英
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