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1 第第 2 2 章章 细胞工程细胞工程 一 知识框架一 知识框架 克 隆 植 物 克 隆 动 物 克 隆 植物细胞的全能性和 植物组织培养方法 植物细胞全能性的含义 植物组织培养程序 植物细胞全能性的体现 植物克隆的成就 细胞培养和器官培养 原生质体培养和植物细胞工程 多途径上的植物克隆实践植物克隆的发展 动物细胞的培养和克 隆的形成 动物细胞 组织培养 动物组织培养技术的发展 细胞株系 克隆培养法 动物的细胞融合技术 及其应用 细胞融合与细胞杂交 杂交瘤技术和单克隆抗体制备 动物的克隆 动物细胞全能性的表现程度 动物难于克隆的根本原因 细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 2 二 列表比较二 列表比较 1 植物组织培养和动物细胞培养的比较 项目主要原理培养基结果培养目的 植物组 织培养 细胞全能性固体 营养物质 激素 植株快速繁殖无病毒植株 生产细胞产物 人工种 子 动物细 胞培养 细胞增殖液体 营养物质 动物血清 细胞株或 细胞系 获得细胞或细胞产品等 2 动物细胞融合与植物细胞杂交的比较 项目 细胞融合 原理 融合方法诱导手段用途 植物体细 胞杂交 细胞膜的 流动性 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 离心 电刺激 振动 聚乙二醇 诱导 克服远缘杂交不 亲和的障碍 获 得杂种植株 动物细胞 融合 细胞膜的 流动性 使细胞分散后诱 导细胞融合 同上 再加上灭 活的病毒诱导 制备单克隆抗体 的技术之一 3 植物细胞工程与动物细胞工程 细胞工程植物细胞工程动物细胞工程 基本原理细胞生物学和分子生物学的原理和方法 工程学手段改造细胞 操作水平细胞整体水平 细胞器水平操作 实质内容改变遗传物质 产生新的性状 获得细胞产品 技术手段 植物体细胞杂交 植物组织培 养技术 动物细胞培养 动物细胞融合 单克 隆抗体制备技术 胚胎移植 核移植 等 理论基础植物细胞全能性细胞增值 应用白菜 甘蓝等杂交植物单克隆抗体的制备 杂交瘤细胞 4 单克隆抗体与常规抗体比较 项目分泌特点生产 单克隆抗体杂交瘤细胞特异性强 灵敏度高产量高 易纯化分离 常规抗体各淋巴 B 细胞特异性差 灵敏度低产量低 分离困难 三 知识拓展三 知识拓展 1 1 花药离体培养 花药离体培养 花药离体培养主要在无菌条件下 取出花药或从花药中取出花粉粒 置于人工培养基上 进行培养 形成花粉胚或花粉愈伤组织 通过再分化长出根 茎 叶 最后长成植株 由于 这种植株体细胞所含的染色体数目只有正常植株体细胞的一半 故又称为单倍体植株 花药 离体培养属于植物组织培养 但由于利用的花粉是成熟的生殖细胞 因此这个过程属于特殊 3 的有性生殖过程 2 2 人工种子 人工种子 人工种子是指通过植物组织培养技术获得具有胚芽 胚根 胚轴等结构的植物胚状体 并且用适当方法将胚状体包裹起来 用以代替天然种子进行繁殖的一种结构 目前研制的人 工种子 是由胚状体 作为保护性外壳的人工种皮和提供发育所需营养的人工胚乳三部分组 成的 人工种子有许多优点 首先 它解决了有些作物品种繁殖能力差 结子困难或发芽率低 等问题 其次 可以工业化生产 提高农业的自动化程度 再次 在人工胚乳中还可以添
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