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2009-2014六年福建高考生物选做题(09福建)(10分) 转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四种限制酶切割位点。请回答: (1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶 ,对 进行切割。(2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有 ,作为标记基因。(3)香蕉组织细胞具有 ,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。(10福州市质检)32(10分)1962年,日本科学家下村修从一种水母身上分离出绿色荧光蛋白(GFP)。1992年后,马丁、沙尔菲等人成功实现GFP基因在高等动植物细胞中的高效表达。下图是转基因绿色荧光鼠的培育过程: (1)将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是 。A追踪目的基因在细胞内的复制过程 B追踪目的基因插入到染色体上的位置 C追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构 (2)转基因绿色荧光鼠的培育过程中,首先需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝。PER反应体系中,起模板作用的是 ,模板首端或末端和引物的结合是遵循 原则,然后在耐热DNA聚合酶作用下进行复制。耐热DNA聚合酶能经受95高温,与高等动物细胞内DNA复制过程相比:PCR反应体系不需要 酶的参与。 (3)图过程称作 。(2010福建高考)32.生物现代生物科技专题红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限,目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO),其简要生产流程如右图。(1) 图中所指的是_技术。(2) 图中所指的物质是_,所指的物质是_。(3) 培养重组CHO细胞时,为了便于清除代谢产物,防止细胞产物积累对细胞自身造成危害,应定期更换_。(4) 检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的_细胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。(2011高考)32生物现代生物科技专题必答题(10分)一对表现型正常的夫妇,生了一个镰刀形细胞贫血症(常染色体隐性遗传病)患儿。在他们欲生育第二胎时,发现妻子的双侧输卵管完全堵塞,不能完成体内受精。医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断,过程如右图。请回答:(1) 过程是指在体外进行的_处理,从而使精子与卵子结合成受精卵;过程称为_。(2) 在对胎儿进行镰刀形细胞贫血症的产前基因诊断时,要先从羊水中的胎儿细胞提取物质_进行PCR扩增,然后用MstII对扩增产物进行切割,产生多个片段的酶切产物。据此判断,MstII是一种_酶。(3)不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同,形成不同的电泳条带。该家庭成员的镰刀形细胞贫血症基因分析的电泳带谱如,据此判断该胎儿为_(正常/患者/携带者)。(2012高考)32现代生物科技专题肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图。请回答:()进行过程时,需用酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位,以驱动let-7基因转录,该部位称为。()进行过程时,需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。()研究发现,let-7基因能影响RAS的表达,其影响机理如图。据图分析,可从细胞提取进行分子杂交,以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中(RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。5.生物现代生物科技专题(lO分)科研中常用Gfp基因表达的绿色突光蛋白作为标记,示踪细胞的生命活动过程。下图为 绿色荧光小鼠制备流程图。请回答:(1)图中所用的胚胎干细胞可以从囊胚的_或原始生殖腺中分离出来。将该细胞培养在添加了抑制因子的培养液中,是为了能够维持其_的状态,以保持干细胞的全能性。(2)图中步骤所用的G418是一种抗生素,它通过影响核糖体功能而阻断蛋白质合 成,对细胞有毒性,可导致细胞死亡。Neo基因表达的蛋白可以将G418转变成无 毒形式。添加G418的目的是_(3)移人代孕母鼠b的胚胎中,含有领基因的千细胞只有分化成_细胞后,小鼠c的子代才有可能出现绿色突光小鼠。(4)可以使用_方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白(2013福建高考)33 生物-现代生物科技专题必答题(10 分)克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2 基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR 技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答:(1)图中重组细胞的细胞核来自 细胞,早期胚胎移入受体子宫后继续发育,经桑椹胚、囊胚和 胚最终发育为克隆猪。(2)在PCR 过程中可检测出cDNA 中Bcl-2 cDNA 的分子数,进而计算总mRNA 中Bcl-2 mRNA 的分子数,从而反映出Bcl-2 基因的转录水平。图中X 表示 过程。从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA 的核苷酸序列,以便根据这一序列设计合成 用于PCR 扩增,PCR 扩增过程第一轮循环的模板是 。(2014福建高考)33、生物现代生物科技专题必答题(10分)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:(1)步骤中在核移植前应去除卵母细胞的_.(2)步骤中,重组胚胎培养到_期时,可从其内细胞团中分离出ES细胞。(3)步骤中,需要构建含有Rag2 基因的表达载体。可以根据Rag2基因的_设计引物,利用PCR技术扩增 Rag2基因片段。用Hind和Pst限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有_ 酶的酶切位点。(4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的_,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。(2014全国一)40、生物选修3:现代生物科技专题(15分)某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、 Y和Z,每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如下图所示甲若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B琳巴细胞(染色体数目40条),井将该细胞与体外培养的小鼠骨四髓细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试瞥中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检侧,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。 回答下列问题:(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血消抗体效价需达到1600以上,则小鼠最少需要经过 次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、 Y、 Z这三只免疫小鼠中,最适合用于制备B琳巴细胞的是 小鼠 ,理由是_ 。(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未触合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有 ,体系中出现多种类型细胞的原因是 。(3)杂交瘤细胞中有 个细胞核,染色体数目最多是 条。(4)未融合的B琳巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是_ 。(2012高考)答案】(10分)(1)限制性核酸内切酶(或限制) 启动子(2)胰蛋白(3)RNA RAS蛋白2010福州32(10分,每空2 分 ) (1)C 目的基因 (2) 碱基互补配对 DNA解旋 (3)胚胎移植(2011高考)(10分)(1)精子获能 胚胎移植(2)DNA 限制性核酸内切酶(3)正常(2010福建高考)2010福建32. PCR Mrna rhEPO 培养液 杂交瘤(09福建)10分)(1)Pst、EcoR,含抗病基因的DNA、质粒,(2)抗卡那霉素基因(3)全能性,脱分化、再分化。5. 内细胞团 不分化 筛选出导入目的基因的胚胎干细胞(或筛选出携带绿色荧光蛋白基因的胚胎干细胞;或筛选出导入基因表达载体的胚胎干细胞) 生殖 抗原-抗体杂交
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