葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度本

,生物化学与分子生物学教研室xxxQQ:xxxxxxxxxx电话:xxxxxxxxxxx,血糖测定（葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法）及肾上腺素对血糖浓度的影响, 尿糖检测,实验课安排,二、注射肾上腺素,三、30min（尿糖检测）,四、注射后取血,五、血糖检测,一、注射前取血,实验内容：测定血糖浓度，观察肾上腺素对血糖浓度的影响半定量测量尿糖实验要求：掌握葡萄糖氧化酶测定血糖的方法、原理、测定操作、正常参考值、临床意义熟悉尿糖测定及意义,血糖的调节,血糖过高,血糖不足,胰高血糖素糖皮质激素,血糖的来源和去路,血糖,氧化分解,合成,转化,H2O+CO2+ATP,糖原,其它糖、非糖物质,食物,糖原,非糖物质,消化吸收,分解,糖异生,胰岛素,血糖平衡,肾上腺素,血糖调节相关神经系统：下丘脑+自主神经,尿糖,注射葡萄糖,血糖指血液中所含的葡萄糖，它是给机体提供能量的主要物质，也是体内糖代谢情况的重要生理指标。,一）神经系统调节：下丘脑+自主神经二）体液调节，也叫激素调节，有升糖激素和 降糖激素三）还有一些器官：肝、肌肉以及肾脏等,化学感受器,肾上腺素是肾上腺髓质分泌的一种儿茶酚胺类激素，主要在应激状态下发挥升高血糖的作用。,肾上腺素,机制,cAMP,肝、肌细胞的膜受体,血中的肾上腺素,磷酸化酶,葡萄糖,乳酸,肝糖原,糖酵解,乳酸循环,级联激活,受刺激,结合,促进,肌糖原,分解,糖代谢紊乱,高血糖,低血糖,6.9,3.0,3.89-6.11,检测,1.临床医生：作为疾病诊断依据、指导用药以及判断升糖药或降糖药的疗效2.糖尿病患者：监控自身血糖及尿糖变化，调节饮食、运动、就医等生活规律。,肾糖阈8.96-10.08,单位：mmol/L,尿糖,正常血糖,病理性,病理性,生理性,生理性,临床上重要的糖代谢紊乱也主要是血糖浓度过高（高血糖症）和过低（低血糖症）。,血糖测定方法,葡萄糖氧化酶法广泛使用,特异性强、价廉、操作简单福林-吴宪法邻甲苯胺法己糖激酶法超微量还原铁氰化钾法,第一步：,第二步：,葡萄糖氧化酶法原理,葡萄糖氧化酶（GOD）,辣根过氧化物酶（POD）,9,具体操作（1）空腹称重（已称好）（2）耳缘静脉取血取血部位去毛，接着擦拭酒精，涂二甲苯、凡士林。用三棱针刺破耳缘静脉放血，离心管收集血液2-3ml（干棉球压迫止血），离心，1500rpm，10min，取出放试管架上备用。（3）注射肾上腺素腹侧皮下注射肾上腺素(0.4mL/kg体重)，记录在注射时间，操作如图：,正确抓兔,耳缘静脉,皮下注射,1.注射时，把兔子皮肤提起来，在褶皱处，竖着进针1.5-2cm。2.注射完后等一会再把针头拔出。轻按注射部位。30 min后再采血。,错误抓兔,（5）取4支试管，按下表加入试剂:,（6）混匀后，37OC水浴15min；取出冷却，空白管调零，505nm处比色测定。,（4）注射后取血: 2-3ml,离心，取出备用。,(ml),血糖检测结果记录,计算：,1.注射前、后的血糖浓度,2. 注射后血糖浓度增高率,（mmol/L）,家兔血糖正常参考值（5.34-6.62 mmol/L),1.葡萄糖氧化酶试纸法（干化学法）：特异性强，临床常用。检测原理是葡萄糖氧化酶法。,2.班氏定性试验：价廉，操作简单，比较常用，但易受尿中还原性物质干扰。,尿糖测定,班氏定性试验原理：,根据沉淀显色的深浅，对尿糖作半定量检测。,煮沸,分解,操作步骤,待完全沉淀到管底后（10min），对比判断标准判定结果。,尿糖结果判断标准,尿糖检测结果记录,【注意事项】1.微量加样枪的使用2.先加0.02ml，完全冲到管底。3.0.02ml加样要精确,下一次实验牛血清白蛋白的分离、纯化及鉴定,尿糖：指尿中的葡萄糖。,重吸收,原尿,尿糖,血液,葡萄糖,肾糖阈：尿