人教版选修3 DNA重组技术的基本工具 课件（24张）.ppt

基因工程 按照人们的愿望 进行严格的设计 并通过体外dna重组和转基因等技术 赋予生物以新的遗传特性 发光基因 dna重组技术的基本工具 问题探讨 手术刀 缝合针 运输工具 培育抗虫棉需要哪些基本工具 限制性核酸内切酶 主要来源 作用特性 作用对象 识别dna的特定核苷酸序列 切割特定部位的两个核苷酸之间的键 磷酸二酯键 原核生物 作用结果 产生黏性末端或者平末端 自主学习 阅读课本4 5页的相关内容 填写完善 脱氧核苷酸的结构 g a 3 5 磷酸二酯键 3 端 5 端 3 端 5 端 磷酸二酯键 8 仔细观察各限制酶识别的特定序列有何特点 限制酶的识别序列 中轴线 在g与a之间切割 ecori限制酶的作用 大肠杆菌的一种限制酶 ecor 专门识别dna分子中含有 gaattc 这样的序列 一旦找到就从g和a之间剪断 黏性末端 黏性末端 ecori限制酶的切割 被限制酶切开的dna两条单链的切口 带有几个伸出的核苷酸 他们之间正好互补配对 这样的切口叫黏性末端 smai只能识别cccggg序列 并在c和g之间切开 中轴线 smai限制酶的作用 在g与c之间切割 平末端平末端 smai限制酶的切割 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时 切开的dna两条单链的切口 是平整的 这样的切口叫平末端 你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗 原核生物易受自然界外源dna的入侵 但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制 以防止外来病原物的侵害 限制酶就是细菌的一种防御性工具 当外源dna侵入时 会利用限制酶将外源dna切割掉 以保证自身的安全 所以 限制酶在原核生物中主要起到切割外源dna 使之失效 从而达到保护自身的目的 寻根问底 练习使用ecor 剪切目的基因 模型构建1 1 要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几刀 可产生几个黏性 平 末端 2 如果把两种来源不同的dna用同种限制酶来切割 会怎样 讨论 会产生相同的黏性 平 末端 要切两刀 产生四个黏性 平 末端 难点突破二 载体需要具备的条件 讨论分析 合作学习 1 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样 2 作为载体没有限制酶的切割位点将怎样 3 如果载体对受体细胞有害将怎样 4 目的基因是否进入受体细胞 你如何鉴定 大肠杆菌结构模式图 dna 质粒载体结构模式图 目的基因插入位点 氨苄青霉素抗性基因 复制原点 难点突破2 载体需要具备的条件 讨论分析 合作学习 基因进入受体细胞的载体 条件 种类 1 有一个至多个限制酶切割位点2 有标记基因3 可以复制4 对受体细胞无害 2 噬菌体衍生物3 动植物病毒 1 质粒 难点突破3 dna连接酶的作用 小组合作 动手探究 dna连接酶 只连接互补的黏性末端 连接互补的黏性末端和平末端 磷酸二酯键 来源不同 以下是两种限制酶切割后形成的dna片段 试分析 gc aattc gc cttaacg g cg g 1 其中 和是由一种限制酶切割形成的末端 两者要重组成一个dna分子 所用dna连接酶通常是 2 和是由另一种限制酶切割形成的末端 两者要形成重组dna片段 所用的连接酶通常是 反馈练习 t4dna连接酶 e colidna连接酶 模拟重组dna分子的构建 模型构建2 下图为三种限制酶bamh hind 和bgl 的识别序列及切点 它们切割出来的黏性末端可以互补配对的是 ggatcccctagg aagctt