北师大版选修3 细胞工程第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养技术与单克鹿体技术 课件.pptVIP

第3章第2节动物细胞工程 第1课时动物细胞培养技术与单克隆抗体技术 目标导读 1 结合教材p53 55图文 掌握哺乳动物细胞培养条件和流程 2 分析教材p55图3 14 理解动物细胞融合技术 3 单克隆抗体的制备过程 重难点击 1 动物细胞培养条件和流程 2 单克隆抗体的制备过程 1970年 有两位科学家做了人 鼠细胞融合的实验 以证明细胞膜的流动性 思考该如何实现人 鼠细胞的融合 动物细胞融合后还有什么用途呢 植物体细胞杂交可得到杂种植株 动物细胞融合后能像电影上一样形成杂种动物个体吗 一 哺乳动物细胞培养技术 二 动物细胞整合与单克隆抗体技术 达标检测 内容索引 一 哺乳动物细胞培养技术 1 动物细胞培养条件 1 培养基状态和成分 培养基 成分主要包括葡萄糖 氨基酸 无机盐 维生素和等 特别提醒 动物细胞进行培养时通常要添加动物血清的原因有两点 一是补充合成培养基中不足的营养物质 二是为动物细胞提供与内环境相似的生活环境 2 气体环境 需要足够的和一定的二氧化碳 二氧化碳具有调节 的作用 3 温度和ph 培养温度要与温度保持一致 培养基的适宜ph为 基础梳理 液体 动物血清 氧气 培养液ph 动物体内 7 2 7 4 2 动物细胞培养流程 1 取材 取动物的或幼龄动物的组织或器官剪碎 加入适量 使细胞分散 2 原代培养 经过滤 后将动物细胞接种到的培养液中 在适宜的条件下进行静止或慢速转动培养 称为原代培养 贴壁生长 悬液的细胞贴附在培养瓶的表面 开始分裂 其数目以增长的方式增多 胚胎 胰蛋白酶或胶原纤 维酶 离心 无菌 有丝 指数 接触抑制 当细胞铺满培养瓶的整个表面后 就形成致密的单层细胞层 此时细胞分裂停止 不再继续生长 3 传代培养 贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理 然后分瓶继续培养 让细胞增殖 即为传代培养 细胞生长到代左右时 出现生长停滞 大部分细胞 极少部分细胞可以传到代 遗传物质 填 有 或 没有 发生改变 有些细胞 如肿瘤细胞 发生了改变 可以无限制的传代下去 10 衰老死亡 40 50 没有 遗传物质 结合动物细胞培养的过程分析下列问题 1 为什么要取动物的胚胎或幼龄动物的组织或器官细胞进行细胞培养 答案这类细胞具有较强的分裂能力 容易培养 2 培养过程中两次使用胰蛋白酶 目的有何不同 答案第一次是将组织分散成单个细胞 第二次是将贴满瓶壁的细胞分散成单个细胞 3 能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗 答案胃蛋白酶作用的适宜ph约为2 多数动物细胞培养的适宜ph为7 2 7 4 胃蛋白酶在此环境中没有活性 互动探究 答案 4 动物细胞培养为什么需要无菌 无毒的环境 答案离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御能力 一旦受到污染或自身代谢物质积累等 培养的细胞就会死亡 答案 活学活用 1 下列说法正确的是a 动物细胞培养和动物组织培养无任何联系b 在细胞培养中 有原代培养和传代培养之分c 原代培养比传代培养进行得晚d 在对动物成纤维细胞培养时 需用纤维素酶将细胞分散开 解析动物细胞培养和动物组织培养之间相互依存 原代培养和传代培养都属于细胞培养 且传代培养较晚 纤维素酶是分解纤维素的 而动物细胞之间的连接物质的成分主要为蛋白质 应用胰蛋白酶使细胞分散开 答案 解析 2 下列有关植物组织培养和动物细胞培养的比较中 叙述错误的是a 所用的培养基的成分基本相同b 植物组织培养的结果是培育成植株 动物细胞培养的结果是培育成很多细胞c 植物组织培养的目的是为了快速繁殖和获得无病毒的植株 动物细胞培养的目的是为了获得细胞产物或杂交细胞d 植物组织培养的原理是细胞的全能性 动物细胞培养的原理是细胞的增殖 解析 答案 解析动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖 氨基酸 促生长因子 无机盐 微量元素等 另外还有动物血清等 植物组织培养所用的培养基包含植物生长和发育的全部营养成分 如矿质元素 有机营养成分 植物激素 但没有动物血清 题后归纳 动物细胞培养与植物组织培养的比较 二 动物细胞融合与单克隆抗体技术 1 细胞融合 1 概念 在一些的作用下 将的细胞合并成为一个细胞的技术 2 融合方法 物理 化学方法 与植物体细胞杂交相同 如 电流刺激等 生物方法 2 单克隆抗体 1 定义 由一个增殖形成的细胞群所产生的分子 基础梳理 融合因子 两个或两个以上 聚乙二醇 灭活的病毒 b淋巴细胞 单一型抗体 2 制备过程 取小鼠体内的细胞和的骨髓瘤细胞 用诱导两种细胞融合 利用筛选出杂交瘤细胞 在新的培养液中大量繁殖 注射到小鼠培养或者在培养液中培养获得单克隆抗体 3 功能 诊断试剂 快捷 准确地诊断和治疗一些疾病 生物导弹 携带抗癌药物 专一地杀死肿瘤细胞 b淋巴 营养缺陷型 聚乙二醇 选择性培养液 体内 悬浮 单克隆抗体 完善单克隆抗体制备过程 思考下列问题 互动探究 注射抗原 聚乙二醇 peg 未融合 未融合 答案 1 为什么要对小鼠注射抗原 答案以获得能产生相应抗体的b淋巴细胞 浆细胞 2 制备单克隆抗体时 为什么要选用b淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞 答案每一个b淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体 但不能无限增殖 骨髓瘤细胞可大量快速增殖 却不能产生抗体 若将这两种细胞融合在一起 既能分泌大量特异性抗体又能快速增殖 3 b淋巴细胞和骨髓瘤细胞经聚乙二醇处理后 培养液中存在哪几种细胞 答案未融合的b淋巴细胞 未融合的骨髓瘤细胞 b b融合细胞 瘤 瘤融合细胞 b 瘤融合细胞 答案 活学活用 3 用动物细胞工程获得单克隆抗体 下列实验步骤错误的是a 将抗原注入小鼠体内 获得能产生抗体的b淋巴细胞b 用纤维素酶处理b淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞c 用聚乙二醇作诱导剂 使能产生抗体的b淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合d 筛选杂交瘤细胞 并从中选出能产生所需抗体的细胞群 培养后提取单克隆抗体 答案 解析 解析单克隆抗体的制备过程是 将一种抗原注入小鼠体内 获得能产生抗体的b淋巴细胞 然后将b淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞同时培养 在聚乙二醇的诱导下 促使b淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 得到杂交瘤细胞 从中选出能产生抗体的细胞群 即可得到单克隆抗体 因为动物细胞无细胞壁 所以在细胞融合过程中不需要使用纤维素酶处理 4 下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 描述正确的是a 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 诱导融合的方法也完全相同b 两者都可以跨越种属间的生殖隔离 突破有性杂交方法的局限 使远缘杂交成为可能c 利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术 为试管婴儿的诞生开辟了新途径d 目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交 得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物 并使它们的性状全部得以体现 解析 答案 解析动物细胞融合可用灭活的病毒诱导 而植物原生质体是不能的 杂交瘤技术是细胞工程技术 而试管婴儿则是胚胎工程内容 生物性状的体现是基因型与环境共同作用的结果 超级植物 具有两个亲本的遗传物质 但性状不一定能全部表达 题后归纳 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较 学习小结 无菌 动物血清 动物体内的温度 氧气 二氧化碳 细胞膜的流动性 灭活的病毒 单克隆抗体技术 细胞来源 细胞和营养缺陷型的细胞诱导融合因子 筛选培养基 其中培养中死亡的细胞是未融合的和未融合的 能繁殖的细胞是细胞 单抗 的特点 特异性强 化学性质单一 单抗 的功能 诊断试剂 生物导弹 b淋巴 骨髓瘤 聚乙二醇 选择性培养液 b淋巴细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤 达标检测 1 2 3 4 5 1 进行动物细胞培养时 最好选用的培养材料是a 衰老退化的动物组织细胞b 成熟动物个体的体细胞c 动物的卵细胞d 健康动物胚胎或幼龄动物个体的体细胞 解析在进行动物细胞培养时 用的是健康动物的胚胎或幼龄动物的组织或器官 这类细胞有旺盛的分裂能力 解析 答案 1 2 3 4 5 2 下列关于动物细胞培养的叙述 错误的是a 用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的组织或器官b 将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞c 在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离 制成细胞悬液d 动物细胞培养只能传50代左右 所培养的细胞会全部衰老死亡 答案 1 2 3 4 5 3 关于单克隆抗体的生产和应用 错误的是a 对小动物注射特定抗原以获取所需的b淋巴细胞b 融合并筛选特定的杂交瘤细胞 原代培养发生遗传物质改变后才能进行传代培养c 特定的单克隆抗体可制成试剂 用于检测人体是否受某种抗原的感染d 治疗癌症的 生物导弹 原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞 答案 1 2 3 4 5 4 利用细胞工程方法 以sars病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体 下列相关叙述正确的是a 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内 产生的血清抗体为单克隆抗体b 体外培养单个b淋巴细胞可以获得大量针对sars病毒的单克隆抗体c 将等量b淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合 经peg诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞d 利用该单克隆抗体与sars病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法不能诊断出sars病毒感染者 答案 1 2 3 4 5 5 回答下列有关动物细胞培养的问题 1 在动物细胞培养过程中 当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时 细胞会停止分裂增殖 这种现象称为细胞的 此时 瓶壁上形成的细胞层数是 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来 需要用酶处理 可用的酶是 2 随着细胞传代次数