【三年高考】2012-2014年全国高考生物真题汇编：（人教版）选修1专题2《微生物的培养与应用》.doc

全国高考生物试题分章整理2014年专题2微生物的培养与应用（上海卷）26图8表示四种微生物培养物（）在添加利福平前后的细胞内RNA含量。由此可以判断古细菌和酵母菌可能是A B C D【答案】B【解析】利福平抑制细菌RNA的合成，使DNA和蛋白的合成停止，只能作用于细菌。而古细菌是一类很特殊的细菌，核糖体对氯霉素不敏感、RNA聚合酶和真核细胞的相似，其复制、转录和翻译接近真核生物；利福平也对酵母菌等真核生物无效，所以加利福平前后，古细菌和酵母菌中的RNA变化不大。（课标卷）39生物选修1：生物技术实践（15分）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是 。（3）示意图A和B中， 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的 的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。【答案】（1）检测培养基平板灭菌是否合格 3.8107（2）灼烧； 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落（3）B 、溶解氧 营养物质【解析】（1）为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：（2）接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是：通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到菌落。（3）由题图可知B图为平板划线法接种的结果（菌落相对均匀分布）。（4）震荡培养可以增加液体培养基的氧气含量，促进好氧型微生物的生长；另外震荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。（课标卷）39.生物选修1：生物技术实验（15分）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 。（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。 （3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲+-+培养基乙+-+注：“+”表示有，“”表示无。据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；【答案】（1）纤维二糖 葡萄糖 （2）红色 透明圈 （3）不能 液体培养基不能分离单菌落 不能 乙培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌【解析】（1）纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，如下图：纤维素纤维素酶纤维二糖葡萄糖葡萄糖苷酶（2）刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。（3）分离和鉴别纤维素分解菌的培养基位固体培养基，且需以纤维素为唯一碳源。（四川卷）10.有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 （1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_。（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_，这些植物激素一般需要事先单独配置成_保存备用。（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_。（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_，该实验设计是否合理？为什么？_。 【答案】（1）氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖（2）细胞分裂素 母液（3）接种环 接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质。 不合理，缺少空白对照【解析】（1）微生物生长所需要的主要营养物质包括：碳源、氮源、水和无机盐。使用选择培养基是因为他是允许特定的微生物生长，同时又能抑制或阻止其他微生物的生长的培养基。（2）植物组织培养常需要添加的植物激素有生长素和细胞分裂素。MS培养基的成份一般先分别配制成母液备用。（3）平板划线法接种时常使用接种环划线。第二区域只有第一条线无菌落，而其他的划线却有菌落，很可能是因为接环在灼烧后末冷却，第一次划线时将菌种烫死，而后接种环冷却，能正常划线，也可能是第一次划线时划线未从第一区域末端开始，使接种环上无菌种。（4）题中实验为取得菌种培养液过滤后离心上清液，加入蛋白酶处理后，测得其对苯磺隆的降解率。意为假设菌种能产生降解苯磺隆的蛋白质类酶，若用蛋白酶处理后，可使该酶分解，苯磺隆降解率下降，则假设成立。但由于缺乏空白对照，不能比较蛋白酶是处理是否降低苯磺隆降解率，该实验不能得出相应结论。（江苏卷）30.（8分）为了获得-胡萝卜素产品，某小组开展了产-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该。（2）为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是。（3）右图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是。（填序号）安全阀、放气阀、压力表放气阀、安全阀、压力表安全阀、放气阀、温度表放气阀、安全阀、温度表（4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是。（5）为增加-胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是；研磨时（填“需要”或“不需要”）添加CaCO3，理由是 。【答案】（8分）（1）干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） 用牛皮纸（报纸）包扎器皿（2）抑制细菌（放线菌）生长 （3） （4）接种环温度过高，菌被杀死（5）有助于研磨充分 不需要 -胡萝卜素较耐酸【解析】本题考查的是微生物的培养与分离。（1）灭菌常用方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等，培养皿常用高压蒸汽灭菌、干热灭菌。将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎避免灭菌后的再次污染。（2）青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌的繁殖期起杀菌作用，因此添加青霉素可抑制细菌的生长。（3）乙连接软管为排（放）气阀，甲为安全阀，丙是压力表。（4）三块平板有两块平板长有菌落，说明含有菌株并可在培养基上生长；而其中一块未见菌落，说明菌株死亡。因此，应在接种过程中接种环灼烧后未冷却或未足够冷却，使菌株因温度过高被杀死。（5）石英砂有助于研磨充分。CaCO3用于中和酸性物质，-胡萝卜素较耐酸，因此不需添加。（大纲卷）4.某同学在、三种条件下培养大肠杆菌，这三种条件是：以葡萄糖为碳源的培养基，不断补充培养基，及时去除代谢产物 以葡萄糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物 以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物根据培养结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势图如下：假设三种培养基中初始总糖量相等，则、三种条件依次对应的趋势图是A.甲、乙、丙 B.乙、丙、甲C.丙、甲、乙D.丙、乙、甲【答案】C【解析】以葡萄糖为碳源的培养基，不补充培养基，不除去代谢产物，随着营养物质的消耗和次级代谢产物的积累，大肠杆菌的生长环境不断恶化，生存阻力增大，因此种群数量达到稳定期后会出现衰亡期，故甲图对应，反之丙图则对应；若培养基里加入葡萄糖和乳糖，大肠杆菌先利用葡萄糖，葡萄糖消耗完以后，大肠杆菌会经过短期的调整，诱导合成乳糖苷酶，接着继续分解利用乳糖，最后衰亡，因此乙图对应，故选C答案。（上海卷）（六）分析有关微生物的资料，回答问题并完善实验设计方案。（10分） 脂肪酶具有广泛的应用前景。为获得高产脂肪酶的菌株，并将之用于产业化，进行如下的系列实验。53欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应选择下列固体培养基（仅列出了碳氮源）中的 _。 A蛋白胨、柠檬酸铁铵 B橄榄油、硫酸铵 C乳糖、酵母膏 D葡萄糖、蛋白胨【答案】C【解析】分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，有要在培养基中加入该特定的碳氮源，而分泌脂肪酶的细菌能在乳糖、酵母膏生长。54进一步调查适合于产脂肪酶菌株生长的碳氮源。根据表2的实验数据，选择理想的碳 源为_。【答案】蔗糖【解析】据表可知，当碳源为蔗糖时，酶活性最高，产脂肪酶菌株生长的理想碳源为蔗糖。55补全表3中的实验方案，以确定所选碳源的最佳浓度（设浓度梯度的差值为0.2%）。【答案】酶活性0.6%0.8%1.0%1.2%1.4%第1组/第2组/第3组/平均值/【解析】题目给定浓度为0.1%，要求设浓度梯度的差值为0.2%，要根据这一点来设定。56利用相似方法探得理想氮源的最佳浓度，再进一步确定碳氮源浓度的最佳组合。以a 和b分别代表碳源和氮源的浓度，假设酶活a1a2a3；b2b3b4，据此形成下列 四种方案，其中最佳的是_。 方案一：a1和b2组合。 方案二：将每一种a的浓度分别与b2、b3、b4组合，根据酶活取其中的最佳组合。 方案三：a1和b2组合，a2和b3组合，根据酶活取其中的最佳组合。 方案四：a1分别与每种氮源浓度组合，b2分别与每种碳源浓度组合，根据酶活取其中 的最佳组合。【答案】方案二【解析】题目的要求是确定碳氮源浓度的最佳组合，所以在有碳源，又要有氮源。a 和b组合后，就是看出碳源在何种浓度、氮源在何种浓度下生长最合适。57如果脂肪酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活，则应选择图17中的_ 固定化工艺。【答案】C【解析】由于需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，图中只有C组。专题3 植物的组织培养技术专题4 酶的研究与应用专题5 DNA和蛋白质技术专题6 植物有效成分的提取2013年专题2微生物的培养与应用（2013江苏卷）18.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是A.培养基分装到培养皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D.培养过程中每隔一周观察一次【答案】B【解析】在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中一般要隔天观察一次，D错误。（2013新课标卷II）39.生物选修1：生物技术实践临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_法或_法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。（2）取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，在37培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明_；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的_。（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_。【答案】：（1）划线 稀释涂布（或涂布） （2）涂布 （3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A弱 耐药菌 （4）A【解析】：本题考查微生物的培养和应用。（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法。（2）取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养。（3）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。（4）实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。(2013四川卷)10.（12分）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽胞杆菌的-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。工程酵母菌固体平板培养接种接种筛选、接种液体培养菌种-淀粉酶基因重组质粒接种到新鲜培养基图甲图乙图甲中，过程需要的酶有 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以 作为唯一碳源。、过程需要重复几次，目的是 。某同学尝试过程的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是 ；推测该同学接种时可能的操作失误是 。以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种 菌的发酵罐需要先排气，其原因是 。用凝胶色谱法分离-淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较 。【答案】10.（1）限制性内切酶和DNA连接酶 淀粉 筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种 （2）稀释涂布法 涂布不均匀 （3）工程酵母 工程酵母菌利用淀粉的速度很快，发酵产生CO2的速度也很快 （4）小【命题思路】本题借“筛选可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种”创设情境，实际考查生物技术实践中的微生物的实验室培养和蛋白质的提取和分离两个实验的原理或方法，属于选修部分的基础立意题。【解题方法】本题三道题都源于教材的相关基础设问，熟记相关知识即可回答。相对灵活的是题，关键是审出“先排气”的准确含义，是指“发酵过程中首先排气”的意思，以此可知是高速利用淀粉的工程酵母菌，该酵母菌发酵时产生CO2的速度也很快。（2013上海卷）（三）回答下列关于微生物的问题。（10分）阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深1015cm处的土样中初筛到 能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程。41为获得单菌落，可采用_法将初筛菌液接种在_培养基上。42SM01的菌落为粉白色，菌落初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1m，初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是_。A菌落初期呈突起絮状 B菌落粉白色C有菌丝，白色致密 D有细胞核，且有分生孢子43SM01还一定具有的结构有_（多选）。A细胞膜 B核糖体 C拟核 D荚膜 E芽孢 F菌盖44表4中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的_培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因： （1）_； （2）_；（3）_。 41.划线法/涂布法 固体 42.D 43.A、B 44.D （1）A培养液缺少氮源，SM01不能很好生长（2）B培养液缺少氮源，SM01不能很好生长；且有阿拉伯胶酶，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果（3）C培养液缺乏阿拉伯胶酶催化底物阿拉伯胶，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定2012年（2012全国卷新课标版）39（15分）为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。回答下列问题：（）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为和两类。上述培养基中，6-BA属于类生长调节剂。（）在该实验中，自变量是 ，因变量是 ，自变量的取值范围是 。（）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是号培养基。（）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入（填“6-BA”或“IAA”）。【解析】本题主要是对植物组培知识的考察，提问涉及必修一和必修三的一些知识，再加上以实验分析的形式考察中学生物实验的基础知识，综合性强，并不局限于选修一，是为“选修可以考察必修”一说的集中体现。第（）问第一空考察必需元素的分类（可分为大量元素微量元素），必修一的基础知识，选修一教材上亦有原句。第（）问第二空考察植物生长调节剂的知识。中学生物必修一提及植物体内5大植物激素，分别为生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类、乙烯类、脱落酸类，要求掌握植物生长调节剂的名称；常见选修一的植物组织培养实验中又重点分析了生长素类、细胞分裂素类，要求识记二者比例对植物脱分化的影响（生长素多有利于生根，细胞