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实验2 分离以尿素为氮源的微生物 一 分离以尿素为氮源的微生物1 脲或称尿素 是蛋白质降解的产物 2 有一些细菌含有脲酶 它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源 二 实验内容本实验的内容是从土壤中分离出能利用尿素的细菌 观察菌落数 并了解它在生态平衡中的作用 以lb全营养培养基为对照 观察全营养生长细菌的菌落数 考点1分离以尿素为氮源的微生物 1 分离微生物的方法 平板划线分离法稀释平板分离法选择培养基培养法2 实验原理 用选择培养基可分离出以尿素为氮源的微生物 这些微生物可产生脲酶 脲酶可将尿素分解为能被植物吸收的氨 因此这类微生物具有一定的 生态学价值 可用稀释涂布平板法统计土壤样品中含有的这种微生物的数目 3 操作步骤 制备无菌的lb固体培养基和尿素固体培养基 倒平板 倒2个lb培养基 2个尿素固体培养基 制备一定浓度梯度的细菌悬液 涂布法分离细菌 培养观察 例1 下面是某同学做自生固氮菌分离实验的方案和观察结果 实验目的 略实验材料和用具 略实验方法和步骤 1 接种 接种前 准备好盛有上述配方的培养基 放入培养皿中并灭菌 供实验用 取10g土壤 放在无菌研钵中 注入5ml蒸馏水 并用无菌玻璃棒搅拌均匀 备用 将接种环放在酒精灯的火焰上灭菌 将培养皿盖轻轻放在桌面上 手拿培养皿 将接种环放在培养基边缘处冷却 然后 用接种环沾取少许泥浆 轻轻地点接在培养基表面上 共点接15 20处 接种后 轻轻地盖上培养皿盖 将培养皿放在实验桌上 2 培养将接种的培养皿放入恒温箱内 在28 30 的温度下培养3 4d 3 观察 3 4d后 取出培养皿 仔细观察培养基上稀泥浆周围出现的黏液 黏液初为无色透明 以后乳白色 最后变为褐色 表明含有自生固氮菌 4 镜检 略该实验方案中有几处明显错误 请指出错误并改正 至少三处 a 错误 应改为 b 错误 应改为 c 错误 应改为 答案 a 培养基中含有nano3不含n的钠盐b 中使用蒸馏水无菌水c 中将培养皿盖放在桌面上略微打开培养皿盖d 中未填写实验内容 接种人姓名和接种日期在顶盖上写明实验内容 接种人姓名和接种日期 变式训练1 从土壤中分离能分解尿素的细菌 可以利用选择培养基 其成分中一定有 尿素 有机氮化合物 无机盐 有机碳化合物 水 无机碳化合物a b c d a 考点2利用指示剂颜色的变化检验酶 脲酶 所催化的反应 通过指示剂 酚红 颜色的变化检验培养基ph的变化 脲酶催化的化学反应 例2 不同种类的细菌菌落表现为不同的特征 下列属于菌落特征的是 菌落大小 菌落形状 菌落的隆起程度 菌落的颜色 菌落的透明度a b c d d 变式训练2
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