不同灸法对心肌缺血模型家兔的效应及机制观察.doc

探索性实验论文论文题目：不同灸法对心肌缺血模型家兔的效应及机制观察指导老师：魏建子班级：04针英七学生：周杰 李颖慧 郭梦虎 黄涌 徐玲摘要：目的：观察艾条灸和隔附子饼灸对垂体后叶素所致的家兔心动过缓和心肌缺血的效果，比较两种灸法的效果差异，及对艾灸效应机制的探究。方法：用垂体后叶素沿家兔耳缘静脉注射垂体后叶素造成心动过缓和心肌肌缺模型，用两种灸法实验观察心率变化和心肌缺血状况，并检测心肌和内关处骨骼肌Ca2+-ATP酶活性。结果：艾灸组均比模型组心率回升快，前10分钟艾条灸效果好于隔附子饼灸，而后10分钟隔附子饼灸效果更好。Ca2+-ATP酶活性比较无统计学意义。关键词：隔附子饼灸；艾条灸；内关；Ca2+-ATP酶艾灸是我国传统医学的外治法之一，是古人在长期临床实践中总结出来的的确切有效的治疗手段。窦材在扁鹊心书中就提出“灼艾第一、丹药第二、附子第三”。近些年很多临床和科研报导，肯定了艾灸的作用，但不同灸法之间的疗效比较尚未明确。为肯定艾灸的治疗效应并比较不同灸法之间的效果，笔者用临床上最常用的艾条灸和隔附子饼灸，艾灸垂体后叶素所致的心肌缺血模型家兔的内关穴，以观察治疗效应并探究艾灸作用机制。1. 材料与方法1.1 观察对象 成年家兔28只，体重 2.16kg3.44kg，由校动物实验中心提供，随机分成四组，即空白组，模型组，隔附子饼组，艾条灸组，每组各7只。1.2 试剂 考马斯亮兰显色剂，南京建成生物工和研究所 ATP酶测试盒，南京建成生物工程研究所1.3 造模 从家兔耳缘静脉45秒内注射垂体后叶素(2/kg)，使家兔冠状动脉发生痉挛性收缩，出现心率减慢、心肌缺血。1.4 穴位 内关是手厥阴心包经之络穴，又为八脉交会穴之一，通于阴维脉，对心脏有相对特异性。按实验针灸学“常用实验动物针灸穴位”，取一侧内关穴施灸。1.5 实验方法 1.5.1心电图测定 将动物固定于动物实验台上，用1%戊巴比妥钠按3.5 ml / kg体重，耳缘静脉注射麻醉，并注射垂体后叶素造模（空白组除外）。造模后，模型组不做处理，隔附子饼灸组和艾条灸组开始施灸，对四组动物分别于造模后即刻，5min、10min、15min和20min记录心电图。1.5.2 Ca2+-ATP酶活性测定 造模20分钟后立即处死家兔，取心肌2g，内关处骨骼肌1g。分别加入1：9的Tris-Hcl缓冲液稀释并匀浆。3500转/分，离心10分钟，取上清液。用ATP酶测试试剂测定样品中Ca2+- ATP活性。1.6 数据 家兔心率的变化从心电图上直接读取；S-T段抬高视为心肌缺血阳性。组间心率和心肌缺血阳性率可分别用t 检验和Fisher确切检验作统计处理。2. 结果2.1 两种灸法对垂体后叶素所致心动过缓的影响 空白组家兔心率维持在286.19次/min，而模型组家兔在注射垂体后叶素后即刻、5分钟、10分钟、15分钟、20分钟的平均心率为（225.5822.92）次/min、（178.2320.96）次/min、（181.3610.77）次/min、（182.0514.05）次/min、（182.6415.25）次/min，表明垂体后叶素可造成家兔心动过缓,而至注射后5分钟心率最慢。随后三组动物心率均逐渐恢复，而两组艾灸组较模型组恢复得更快（表1）。每个时间段艾灸组均较模型组心率恢复得快，但P0.05，无统计学意义，考虑为样本较少的缘故。隔附子饼灸组与艾条灸组比较，10分钟前艾条灸组心率回升比附子饼灸快，10分钟后，附子饼灸心率回升快于艾条灸组，但由于样品较少，P0.05无统计学意义。表1 垂体后叶素注射后家兔心率变化(次/min，S)n注射后即刻注射后5min注射后10min注射后15min注射后20min心率 差值(%)心率 差值(%)心率 差值(%)模型组6225.5822.92178.2320.96181.3610.77 3.24 (1.82%)182.0514.053.79 (2.13%)182.6415.254.41 (2.47%)隔附子灸饼组6226.818.04186.5215.035198.4523.31 11.93(6.40%)198.4627.3211.94 (6.40%)209.1432.5022.62 (12.13%)艾条灸组7221.643.06179.7435.54195.0330.2915.29 (8.51%)189.4113.389.67 (5.38%)193.4910.9713.75 (7.65%)注：表中差值均为与注射后5min心率之差 图1 垂体后叶素注射前后家兔心率变化 次/min 2.2 隔附子饼灸在造模10分钟后心肌缺血阳性率均低于模型组，通过Fisher确切检验法P=0.5450.05，无统计学意义。隔附子饼灸每个时间段的心肌缺血阳性率均低于艾条灸组，但由于样本不足，无统计学意义。表2 注射垂体后叶素心肌缺血阳性心电改变注射后即刻注射后5min注射后10min注射后15min注射后20min空白组1 (7, 14.29%)0 (7.0)0(7,0)1(7, 14.29%)2(7, 28.57%)模型组5(5,100%)3(5, 60%)4(5, 80%)3(5, 60%)2(5, 40%)艾条灸组7(7,100%)5(7, 71.43%)5(7, 71.43%)6(7, 85.7%)5(7, 71.43%)隔附子饼灸6(6,100%)4(6, 66.67%)3(6, 50%)3(6, 50%)2(6, 33.33%)2.3 不同组之间无统计学差异，0.05P0.2，若样本加大至15个左右，可能出现差异。附子饼灸组心肌和内关处Ca2+-ATP酶活存在统计学差异，而艾条灸无差异，证明附子饼灸比艾条灸效果更明显。表3 Ca2+-ATP酶活性（单位：mol/molPi/mgprot/hour）空白组模型组隔附子饼灸组艾条灸组心肌1.341.120.461.52内关处骨骼肌8.672.443.716.233. 结论艾灸是通过艾的药理作用、温热作用，作用于人体经络和穴位，起到温经通络、祛邪扶正的作用，达到防病治病的目的。本实验进一步证明了艾灸的治疗作用，对心动过缓作用明显，.同时证明了短时间内艾条灸效果明显，而较长时间的隔附子饼灸效果要好于艾条灸。20min隔附子饼灸时的心率恢复是模型组4.9倍，临床艾灸和针刺留针时间可作参考。艾灸对心肌缺血有一定的改善作用，而隔附子饼灸作用较明显。艾灸对心肌及内关处骨骼肌的Ca2+-ATP酶活性影响尚不清楚，有待进一步研究。参考文献：(1) 周愉，沈学勇，魏建子等. 红外灸对垂体后叶素致家兔心动过缓和心肌