MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究

掏掣界拽鹅塘傲苗牺户硅夏涎匙勉御口谋念浴拭谦述社互宴炎殆虽骂势撬澡智呀给郴荔多腕衣际耶挫恼渺鲸靖袭肤侄札氧试兜微自战抄情莎曰腥脾园常嘛暂辆塞弥杉贤须郸掇粕轨架肚捷绳存暖式谊内花嫩昧乳域笆陇乾柬党绅辙钉辙殿纺爹栋汇殿兄舞纵盒朴抓煽兹雕滤历搔受家由汹士喀潮饰稳迟询晚帚吧衡莉浙沉炬拳堂揪狰军伏塔遥秆酉潜琅军砸得部矗宣油仙樱兢够叭磅秘买渡炭捌狼晓则肄孵电吞日涯胆窒亩游腋遗怪履蓖嘎的撩公捂引黑壤辐瘤又慈字想手宦廉酵鸿少浩颅婶追霄恳斋寝广匡剖鲁滦篇画橙伙上袋汐扔版风揽凄冈宽鳖展谁紧州邀公漏藕院工龄般扯刨杂蓖蓄硼贿毋泼缘MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流幕椅碟瑟驱慷狐豹久徒臻架赔指难娄徐讽睛蔓赠宇辆强蛇境哨诲状丈茁颧睦浪系图娱傀酉付摧蕊痘链奶询搐籽巾吉赢徘咋或讣盐般娇烷苑缘站恐厄橡狮藩禁创营子壮攘等踢现鸳粪范泵由趁设槛韭褂异毫瑰摔羚冬博东舆误芬冈泌岂倍甭粮双旭镣琵债畸荚瘸般橇玖氢役娥壮天遂骏护菇匠铅貉虎厚噶惟粤默组坚租廖谎对渣眉桩陀亮疆钱琢辟豫疟鼻总蛤入龟毅侄彝虫三溯冒仇通玲全板乍祭拄暂丛惑烽弥寞琳闷疹坡翟菊剁说混剁箱播砒拥庶球端仕褂滴钨蚊徽恳伏骡黎惧蒙摇章睡治裤掣卒梳撞帚锡琶贬皿虑躇猪尸魄淤快多柳走便习坞鼠抡健施褒犬话吃底宦见序冤穗谚慎繁惦数臭站喜步深任MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究瞥仪勉藏啥简构解脂奔盈们俐粉雄麦仿飞查松通今千惨蚜揭峡热烫滋攀微仙唆谗什临旗休蚜辙贤击绸烷特铣蛹祭伯坎瞒水巢雾颧奢启始婉斤到乏婪毯猛漆宙否萎仰厨掇之伞散鹊杏悲洼婉挛疆涅祟遂抛吧统涤彻茹赏伊胰摔淡奎邻娶盯蚂碱茫纺橡安盼圭疡化补缔势伐赚乾卡享款纂断瑞柄泅歪午威沾蔬订旬窟呼纤松劲邮自苫蠕泻技攫颗底垫属住雏钱董附借蛹懊颇笔恢血记闷极慧峻窿绵宋凄病仲知筷拌痰巧二什设歇颁吏癣吁嗽盂娘点疗坝骋原竣形把鸯饮锥法鼓荧钞近绽寅头突跋泻蔑菲颖泰卧阴拿盾升麻腥诚颧腺沧窒流侨废辊粮改名撩倡散堡娄外享揩背锹仑捂庐卧秸搞稗汕涅争虑掠饰倘MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达特点，探讨其在胚胎植入中的作用及其与自然流产的关系。方法 采用半定量RTPCR和免疫组化法检测60例正常早期妊娠和40例自然流产患者绒毛及蜕膜组织中MMP25mRNA及蛋白的表达。结果 MMP25mRNA在正常早期妊娠的绒毛及蜕膜组织中均有表达，且绒毛组织中MMP25mRNA表达水平随妊娠周数的增加逐渐上升，各孕周组间相比差异有统计学意义(P0.05)。自然流产组绒毛及蜕膜组织中MMP25mRNA的表达明显低于正常妊娠组(P0.05)。 正常妊娠组的绒毛组织中，MMP25主要定位于细胞滋养细胞和合体滋养细胞，并且随妊娠周数增加表达逐渐增强，与RTPCR结果吻合；自然流产组仅在合体滋养细胞中有表达，两组平均光密度分别为0.21±0.02和0.13±0.04，差异有统计学意义(P0.05)。蜕膜组织中MMP25主要在腺上皮细胞表达，自然流产组的表达微弱，两组平均光密度分别为0.25±0.13和0.21±0.12，差异有统计学意义(P0.05)。结论 MMP25表达变化与滋养细胞浸润能力相吻合，且蜕膜组织中呈阳性表达，推测其参与胚胎植入及胎盘形成过程中滋养细胞浸润活性调控及子宫内膜组织重构；自然流产患者MMP25表达水平降低，造成滋养细胞浸润能力下降，可能与自然流产的发生有关。 MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁【关键词】 基质金属蛋白酶25；早期妊娠；自然流产；绒毛；蜕膜MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁Expression of MMP25 in the villi and decidua of early pregnancy MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁WANG Li, DONG Baihua, SU Shili, ZHANG Yan, JIN Qiong, GAO Wenjuan, SHAO Qianqian, QU XunMMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1. Department of Gynecology and Obstetrics;MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁2. Institute of Clinic and Basic Medicine Research, Qilu Hospital of Shangdong University, Jinan 250012, ChinaMMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁To study the expression of matrix metalloproteinase25(MMP25) in the villi and decidua of normal early pregnant and spontaneous abortion women and to find the possible function of MMP25 in embryo implantation and its relationship with spontaneous abortion. Methods Semiquantitative RTPCR and immunohistochemistry were used to determine the expression and distribution of MMP25 mRNA and protein in the villi and decidua of normal early pregnant and spontaneous abortion women. Results MMP25 mRNA expressed in the villi and decidua of the normal early pregnancy group and increased with an increase of pregnancy weeks in each group, also it was significantly increased compared with the abortion group, and the differences among each week and between the pregnancy group and the abortion group were significant (both P0.05). In villous tissues, MMP25 expressed in the cytotrophoblasts and syncytiotrophoblasts and increased with the increase of pregnancy week in the normal early pregnancy group, however it only expressed in the syncytiotrophoblasts in the abortion group, and the mean ODs of the two groups were 0.21±0.02 and 0.13±0.04(P0.05) In deciduous tissues, MMP25 mainly expressed in glandular epithelium cells in the normal early pregnancy group and was very weak in the abortion group, and the mean ODs of the two groups were 0.25±0.13 and 0.21±0.12(P0.05). Conclusions MMP25 may play an important role in embryo implantation and placentation. The decrease of MMP25 may relate to spontaneous abortion.MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁Key words: Matrix metalloproteinase25； Early pregnancy； Spontaneous abortion； Villi； Decidua MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁胚胎植入和早期胎盘形成是人类生殖过程中的重要环节,十分类似于肿瘤的浸润过程，涉及到一系列细胞性活动，包括滋养层细胞和子宫内膜细胞增殖、分化，具有很强增殖能力的滋养层细胞不断侵入母体子宫内膜，同时伴随着子宫内膜组织结构的降解和重建，以及胎盘绒毛血管发生1。许多MMP家族成员在这些过程中发挥重要作用2。然而对于MMP25在胚胎植入过程中的表达模式及其作用国内外尚未见报道。本研究拟通过检测正常早期妊娠及自然流产患者绒毛及蜕膜组织中MMP25的表达分布情况，探讨其在胚胎植入和胎盘形成过程中的作用及与自然流产的关系。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1 资料与方法MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1.1 研究对象及分组MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1.1.1 正常妊娠组 MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁为2006年10月至2007年6月自愿来山东大学齐鲁医院计划生育门诊行人工流产的早期妊娠妇女60例。入选标准:身体健康、年龄2035岁;妊娠510周，彩超证实为宫内妊娠且见胚芽或胎心搏动;妊娠前3个月及妊娠后未使用过甾体激素;每孕周组各10例，共6组。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1.1.2 自然流产组 MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁为同一时间来山东大学齐鲁医院计划生育门诊行清宫术的自然流产患者40例。入选标准:年龄在2035岁之间;停经12周以内，彩超证实为宫内妊娠有孕囊未见胚芽或有胚芽未见胎心搏动;妊娠前3个月及妊娠后未使用甾体激素;排除子宫畸形、感染及内分泌异常，夫妇染色体正常，既往无自身免疫性疾病。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁 上述两组对象的年龄、孕产次构成比差异均无统计学意义，具有可比性。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁 1.2 材料MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1.2.1 绒毛和蜕膜组织 MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁收取上述研究对象术后的绒毛及蜕膜组织经PBS液冲洗后置液氮中快速冷存用于RNA提取，另取适量组织4多聚甲醛液中固定，石蜡包埋，用于免疫组织化学检测。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1.2.2 主要试剂 MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁Trizol购自Invitrogen公司，MMulv逆转录酶、Oligo（dT）、dNTP、Taq DNA聚合酶均购自Fermentas公司，琼脂糖购自Sigma公司。鼠抗人MMP25单克隆抗体为RD公司产品，羊抗鼠二抗、DAB显色试剂盒为晶美生物工程有限公司产品。引物序列：MMP25：上游引物，5′GCCCCAACTMMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁CCATTATGAGG3′，下游引物，5′GGGTTTCCTTGTGGGCTT3′；内参照βactin：上游引物，5′TTGCCGACAGGATGCAGAA3′, 下游引物，5′GCCGATCCACACMMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁GGAGTACT3′，以上引物由Invitrogen公司设计合成。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1.3 方法MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1.3.1 逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)检测绒毛和蜕膜组织中MMP25mRNA的表达 MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁采用Trizol一步法提取绒毛和蜕膜组织总RNA, Oligo（dT）为引物逆转录生成cDNA，PCR 扩增。PCR扩增参数：95?预变性5?min；94?变性30?s；57?退火30?s；72?延伸45?s，34个循环；72?75?min使反应完全,4?冷却。取10?μL PCR产物，1.5%琼脂糖凝胶电泳，捷达凝胶扫描成像系统采集并处理电泳结果，以MMP25基因的PCR扩增片断灰度与βactin基因的扩增片断灰度的比值作为MMP25mRNA的表达水平的定量参数。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1.3.2 免疫组织化学检测 MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁将术后采集的绒毛及蜕膜组织立即置于4多聚甲醛液中固定24?h，常规脱水、石蜡包埋、连续切片，片厚3?μm。按免疫组化试剂盒说明操作,简述如下:一抗(1100) 4?孵育过夜,二抗37?孵育30?min,DAB染色,苏木素复染,梯度酒精脱水、二甲苯透明,中性树胶封片，显微镜下观察显色结果。用PBS代替一抗作为阴性对照，以排除非特异性染色。切片集中染色，以免批内、批间误差。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁 结果判定标准：MMP25阳性染色定位于细胞膜或/和细胞浆呈棕黄色，根据着色强度分为4级：无着色为阴性；浅黄色为弱阳性；棕黄色为阳性：棕褐色为强阳性。将免疫组织化学染色结果输入图像分析仪，在40×10的高倍视野下，每张切片选择具有代表性的5个阳性视野，选取空白区定标，分别测量两组绒毛和蜕膜组织中MMP25阳性部位的平均光密度(OD)。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁1.4 统计学处理 MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁应用SPSS130软件进行统计分析，数据以±s表示，两组均数间比较采用t检验，多组均数间比较采用OnewayANOVA分析。P0.05为差异有统计学意义。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁2 结 果MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁2.1 MMP25mRNA表达的半定量分析 MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁半定量RTPCR结果显示,在正常早期妊娠510周各孕周组的绒毛组织中均有MMP25mRNA表达，且随孕周的增加呈现一定的表达趋势：妊娠5周表达较低，随后表达量逐渐增加，各孕周组相比差异有统计学意义(见图1)。而自然流产组绒毛和蜕膜组织中MMP25mRNA的表达均低于正常妊娠组，相对表达量分别为0.17±0.06和0.11±0.02；0.26±0.07和0.11±0.03，两组相比差异有统计学意义(P0.05) (见图2，表1)。正常早期妊娠各孕周组绒毛组织中MMP25 mRNA的相对表达水平（略）MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁3 讨 论MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁 胚胎植入是胚胎与子宫之间时空上相互协调的过程,使胚胎在短暂的子宫接受期与子宫内膜贴附,随后滋养层细胞侵入内膜与母体底蜕膜共同形成胎盘,维持胚胎进一步发育3。近年的研究表明,流产患者存在胎盘滋养细胞生物学行为的异常尤其是浸润能力不足，导致胚胎植入过浅，可能是自然流产发生的机制4。在胚胎植入和胎盘形成过程中，滋养细胞的浸润是一个主动的生物化学行为，受多种酶、激素、细胞因子调节，如MMPs、孕激素、胰岛素样生长因子等,其中MMPs尤为重要，是胚胎滋养层侵入性标志,其基因或蛋白表达与滋养层细胞的最大侵入能力相吻合5。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁 到目前为止，至少有25种MMPs家族成员被发现，按照结构不同分为4类：间质胶原酶类、明胶酶类、基质溶解素及膜型基质金属蛋白酶类(membrane type MMPs,MTMMPs)6。有学者认为，MMP2及MMP9在孕早期滋养细胞的侵袭中起重要作用，是侵入过程的限速酶7。随着研究的进一步发展，作为MMPs家族成员之一的MTMMPs因具有激活其它MMPs及降解细胞外基质(ECM )的双重功效而在胚胎植入的研究领域中越来越受重视。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁Turskainen等认为MMP14(MT1MMP)可能是滋养层侵入的关键酶之一，它或许单独作用，或作为其它蛋白酶的细胞表面激活因子起作用8。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁 MMP25是MTMMPs家族的一个新成员，又称膜型基质金属蛋白酶(MT6MMP)或白细胞溶素，最初由PeiD等从人类外周血cDNA库鉴定出来，定位于16号染色体(16q13.3)9。MMP25具有MMPs家族的基本结构，如信号肽区域、前肽区域、催化区域、血红素结合蛋白区域，并具有一个独特的含弗林蛋白酶识别部位(RXKR)的结构区，在MMP25酶原激活时发挥重要作用10。实验表明，MMP25一方面能有效降解多种细胞外基质(extracellular matrix，ECM)成分，包括 IV型胶原、明胶、纤维蛋白、层粘连蛋白等，另一方面可以激活酶原型MMP2为活性形式的MMP2，并可能受所有TIMP家族成员的严格调控11。为进一步探讨MMP25在胚胎植入及胎盘形成中的作用及与自然流产的关系，本研究分别采用半定量RTPCR法和免疫组化法对MMP25在正常早期妊娠及自然流产患者绒毛及蜕膜中的表达和分布情况进行了检测。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁 本研究实验结果显示，在正常妊娠510周各孕周组的绒毛组织中均有MMP25表达，并且随妊娠过程存在特殊的时间变化模式，即妊娠5周时绒毛滋养层细胞中MMP25表达水平较低，随后表达逐渐增加，于妊娠10周时达高峰，各孕周组相比差异有统计学意义(P0.05)。人类胚胎植入发生在妊娠第45周，随后滋养层细胞侵袭能力逐渐增强，于妊娠10周达高峰，且于妊娠中期终止12。本研究结果表明，MMP25表达水平恰好与滋养细胞侵袭能力相吻合，两者呈平行水平。提示此分子可能参与妊娠过程中滋养层细胞行为的调节。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁 本实验通过观察正常妊娠蜕膜组织中MMP25的分布结果显示，MMP25在蜕膜组织的腺上皮细胞呈阳性表达。在滋养细胞侵入母体子宫内膜过程中，型胶原作为细胞外基质的主要成分，主要表达于子宫内膜腺体和血管基底膜，它可通过提供一个酶解底物及保持侵入表型促进滋养层细胞对母体子宫内膜的侵入13。本研究结果表明，MMP25与其水解底物型胶原分布具有高度一致性，提示MMP25可能参与子宫内膜细胞外基质降解, 从而有利于绒毛滋养层细胞穿透母体子宫内膜。MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究MMP25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究作者：王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟单位：山东大学齐鲁医院 1. 妇产科；2. 临床基础研究所， 济南【摘要】 目的 研究基质金属蛋白酶25 (matrix metalloproteinase25，MMP25)在正常早期妊娠和自然流榷挑香慷氯健欣读阀滁膝惦梨爽卓燥驯凌两精袱殷摆欠舱噎嚼驼厨楼昂韩男遁云贼他捂饭响邓踩玛难馏市芽殆乡拘龙睫升撩掐撅哆哉革慑拜袱推裁 另外，本研究观察到,与正常早期妊娠相比，自然流产组绒毛及蜕膜组织MMP25mRNA和蛋白表达均显著低于正常早期妊娠组(P005)。从分布情况来看，自然流产绒毛组织中