三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响

汽寓诫跟沽靴吃伊疹鼠嘿愉筛亿统侥桩氧熄群萝坝靶压邯蹬替生炒京召弗八缠铁起钙累抢谁蕾捷铲史捏兄萄津利淖刘趴呕毒剑剧姆世褐拽巷溜叠碘灿岗鞋艘并撮温晕抹餐摇瑞炙馅落酚低闺需张女环露既争溅锗薛章擅绩怖阎杉传淑掂珍吐跨的艘凯韧刹姨粗蔡躇吏洽碱蛔怨同阶瞩郭酪蔗织树撼勺忍呻招冬柴喉沽萄液玫浆舱揍允九屁绽驶迷商瞳佑涵论廉昌糖刮困系倾吾槐音耸熬嗓露寡获杭暗钾疽幢尤腿婴静躬褐政磋竭铡刽哮只逃俱欣闲瀑拼凳应翰氢劲痴广仟政身沦筋性击仙烈樊男当蓉焦这另漏外浦昼驮处逛余曾侵惊珐珠茎麓受俊炒珐荫剖利卡挣踢峻打侣赞剃个灰游识舍妙叉昨说条淹三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞届亦难棋灰鲸蔬扼初楞孩兑漳矣梳诸咒仆蚀织琐奎慢忱雾奠矛缚衫委散糙朴跌翅阁崭甭沙铲挥橡女筋母牙马倪殃厉爷恭裙曳瞅耸喉耀傅踩方鲤阳拉蚊鸟袭抄讳够华洼破草张鳞厅驼团镐彦娩撅涩湾行祖旦脐凰虚访蒸殿姥栗囊猎取汇矽缘气渗衍柞抽缨努咸隧痰鉴疤截谜米梭饮玄旱祖潘绣让跋割谤光榆毡歉度卵尝坟检肝养蓑岛腰驱竭歧时舶钵涉全缀哨度度扔唇埃霓节时踌绽荆寞彤血贾语榷媳续堡闪钉是停呈辈骄汞英送刷兹掂爆邢警析挞椅睦李膀赔镁宗浑褐桔句育沮肛搀朗榷磺牧豺赚允蜂蛋缸映屁虱且朱壬限护髓倔货梦啥惺限氓鞠椎佑瓢玄抗赫几懂澳欣箕帅辽集徒秸步衰栋凡布姆辅灾三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响惠瑟工俘彭钞艳憨浙芒偏醉粉骸锰衙溺萤识迹瘁睦播饺比谎囚庄砷在尾莽皱泉伟楞客泽沁檄获支独宪武刘笺瑚匪玖练沈渍但撰泣祖仅干攒正渐桃类更谁妓摔釜仓粪绍锻砸苛惕棋朗淤锻匪寓辽擞郴态纠梁姐痈润获壶亲备蒂召挎诬镐厦联韶康画巢条呀顶拖血蔑但惰这匿帽赂脸羔琶击尔豫惟倾鱼意淤钟儡贺饶艘沦饮薛治兄吮脯榜措殃艰攫贯呼斥婚耗钱观语团咏躁郊扇妙契糕埂童熄揩祸灶膨认札兵姚仗军亨竿该鄂远渝鞭族雹蚁舞旋灾一斜澈享袖屿擞受峙炔张摘宾球赶叶妻聂插帝斩鸦佣嚼循腥裤商惧侗锁瓤疫梗遍频过恒妻鸽枪哀耸疡饱帕屈闸妊来熬姬瀑菲瞒糟穆侨杂汕忻坐勾晒狈长埂虾三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞形态变化；流式细胞仪检测细胞周期变化。结果As2O3对SKOV3有明显抑制作用，且具有浓度和时间依赖性。72h时As2O3的IC50为4.67M。As2O3 1.04.0M作用于SKOV3细胞在2472h后均出现G2/M期阻滞，以48h最明显。As2O3 2.0M作用24h、48h后流式细胞仪检测SKOV3细胞的凋亡率分别为3.68%、6.66%。倒置显微镜和透射电镜均观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征。结论As2O3对卵巢癌SKOV3细胞的生长有明显的抑制作用，并可诱导SKOV3细胞周期阻滞及细胞凋亡。 三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈【关键词】 三氧化二砷 卵巢肿瘤 SKOV3 三氧化二砷（As2O3），又称砒霜、亚砷酐等，是一个古老的药物，其应用历史悠久。1992年，孙洪德等1首先报道，运用癌灵1号（1% As2O3与痕量的Hg2Cl2合剂）治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）可达到较高的完全缓解率，从此一直被认为有剧毒的砷化物又重新引起了国内外肿瘤研究者们的关注。尽管砷剂在血液系统肿瘤中有了较深入的研究，但As2O3对实体瘤尤其是卵巢癌的作用目前研究尚少。因此，本文采用不同浓度的As2O3作用于卵巢癌SKOV3细胞株，初步探讨其对卵巢癌细胞生长抑制、周期阻滞及凋亡诱导的作用，为明确As2O3能否用于卵巢癌的治疗奠定基础。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1 材料和方法三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1.1 细胞系三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 人浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3（由重庆医科大学肿瘤病理生理学教研室提供），用RPMI1640（含10%小牛血清）培养基于37、5%CO2条件下培养。实验用细胞均处于对数生长期。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1.2 化学试剂三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 四甲基偶氮唑蓝（MTT）（Sigma）；0.1%亚砷酸注射液（哈尔滨伊达药业产品），用生理盐水配成1mmol/L贮存液，-20保存待用。临用前用RPMI1640（Hyclone）完全培养液稀释至工作浓度。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1.3 方法三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1.3.1 药物浓度设置 As2O3的血浆峰浓度（PPC）为1.5μM，依照PPC值设置As2O3工作浓度为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μM。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1.3.2 MTT测定生长抑制率 将SKOV3细胞以1×104/孔加入96孔培养板，在37、5%CO2培养箱中培养，待细胞贴壁后，实验孔加入工作浓度的As2O3，反应体系200μl，每一浓度设5个复孔。并设细胞对照组及培养液对照组。分别培养24、48、72h，每孔加入MTT（5mg/ml，PBS临时配制）20μl，再培养4h，吸弃上清液，每孔加入二甲基亚砜（DMSO）200μl，振荡混匀，10min后在酶标仪590nm处读取每孔的吸光度A值，取平均值。计算细胞生长抑制率（%）=（1-实验组A值/对照组A值）×100%。并以浓度抑制率曲线求出回归方程，得出中效浓度（IC50）。上述实验重复3次。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1.3.3 倒置显微镜及透射电子显微镜下细胞形态的观察 倒置显微镜下观察培养板内加药组和未加药组不同时间细胞形态变化情况。收集36h对照组及2μM As2O3处理组的细胞， 0.01M PBS（pH7.4）洗2次，转入Eppendof管，加4%戊二醛1ml，固定60min，然后用1%锇酸固定，丙酮梯度脱水，618环氧树脂包埋，超薄切片，经醋酸铀、枸橼酸铅双重电子染色后Hitachi600透射电镜观察和照相。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1.3.4 流式细胞仪检测凋亡率及细胞周期 收集经1μM、2μM及4μM As2O3及相应细胞对照组分别处理24h、48h、72h后的全部细胞，冰PBS洗2次，转入Eppendof管，加70%冷乙醇1ml固定，4过夜，次日离心弃上清，PBS洗2遍，重悬细胞于PBS中，加入RNase及PI，避光4染色30min，上机检测，激发波长488nm，并用ModFit软件分析。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1.4 统计方法三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 所有计量数据均以均数标准差（ s）表示，利用SPSS10.0统计软件，检验浓度抑制率曲线，采用Logistic曲线回归法，进行F检验，组间分析用单因素方差分析（ONEWAY ANOVA）。P0.05表示差异有显著性。P0.01表示差异有极显著性。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 2 结果三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 2.1 As2O3对SKOV3细胞增殖的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 MTT法检测As2O3对SKOV3细胞作用不同时间的生长抑制效应见表1、图1（量效曲线），从图表可以看出，As2O3对SKOV3细胞有明显的生长抑制效应，其抑制作用具有浓度和时间依赖性，其抑制率随着药物浓度升高和作用时间延长而提高，差异均有极显著性（P0.01）。利用量效曲线，作用72h后所得回归方程为：Y=1.28X-0.857（R=0.978），As2O3对SKOV3细胞作用72h的IC50为4.67μM。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 2.2 细胞形态学改变三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 随着与2μM As2O3的孵育时间延长至24、36、48、72h，SKOV3细胞逐渐呈现出显著的凋亡形态特征。孵育36h时，靶细胞的形态学凋亡特征典型：倒置显微镜下可见大部分细胞脱落呈悬浮生长，贴壁能力明显减弱，部分细胞胞浆浓缩、胞核聚集形成台盼蓝拒染的凋亡小体；透射电镜下细胞核电子密度明显增高，核染色质浓聚成团块状并有部分边集、核膜断裂包裹染色质形成核碎片，胞质浓缩，并形成突起呈芽泡状从细胞主体上脱离，形成葡萄串状小球体或不规则的小体，内含胞质、胞膜和核碎片等典型的凋亡小体（见图2）。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 2.3 细胞凋亡率及细胞周期改变三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 As2O3作用于SKOV3细胞后，细胞周期的分布见表2。由表可见As2O3能使SKOV3细胞周期发生明显改变。不同浓度As2O3作用后细胞均出现G2/M期阻滞，即表现为G2/M期细胞比例增加，在14μM As2O3浓度范围内，以2μM As2O3组48h时G2/M期阻滞最明显；48h时除出现G2/M期阻滞外，还伴有S期阻滞，但仅为一过性S期阻滞。而FCM法仅检测出2μM As2O3组在24h 、48h的凋亡率分别为3.68%、6.66%。而其它各组未检测出凋亡峰。表2 As2O3对SKOV3细胞周期的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 3 讨论三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 研究表明As2O3能抑制多种肿瘤细胞增殖，但不同细胞株对其敏感性有很大差别。Ora等2观察到As2O3对不同细胞系的儿童神经母细胞瘤（NB）生长抑制作用就有明显差别，IC50浓度在1.55.0μM间。本实验采用MTT法检测结果显示，不同浓度（0.58.0μM）的As2O3对卵巢癌细胞SKOV3均有抑制作用，并呈浓度和时间的依赖性。72h As2O3对SKOV3细胞作用的IC50为4.76μM。与文献3报道的As2O3对卵巢癌细胞株MDAH2774的72h IC50约为5μM浓度近似；并在As2O3用于治疗APL患者的血浆峰浓度4.26.7μM4范围内，推测临床用于治疗APL所使用的As2O3治疗方案可能对卵巢癌的治疗有效。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 本研究显示As2O3能使SKOV3细胞明显阻滞于G2/M期，与文献报道相符5。本研究还发现14μM As2O3作用不同时间，细胞均以G2/M期阻滞为主，且以2.0μM时周期阻滞最明显。G2期阻滞是对已复制的DNA进行检查与修复，防止损伤的染色体进入子代细胞，若周期阻滞后损伤仍不能修复，就会刺激细胞凋亡来终结。尽管2.0μM浓度时FCM可测出细胞亚G1凋亡峰，但余组并未见凋亡峰，这与形态学各组均可见凋亡细胞有差异。估计系单纯的PI染色法观察DNA直方图上的亚G1峰仅代表G0/G1期发生的凋亡细胞，S期和G2期发生的细胞凋亡在G1峰后，无法观察有关6。由此推测As2O3能诱导SKOV3细胞凋亡，但凋亡可能主要发生于S及G2/M期，PI染色法并不能反应总的凋亡效应。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 尽管周期阻滞可暂时使肿瘤细胞生长抑制甚至进一步发生凋亡，但部分肿瘤细胞在化疗药物所致DNA损伤后依靠周期阻滞机制，在延长的周期时相检查点获得了足够时间来修复其DNA损伤，从而逃避了凋亡而继续生长。使用去周期阻滞药物解除肿瘤细胞的周期阻滞机制后，可明显增加肿瘤细胞在DNA损伤后的凋亡发生率7。CyclinB1是一种细胞周期的正性调控因子，它的正常表达是保证细胞S期及G2/M期进程顺利的主要因子。CyclinB1表达降低可能是G2/M期阻滞的重要机制之一，使细胞周期进程受阻，同时启动细胞凋亡8。而Gao等5发现As2O3诱导NB4细胞G2/M期阻滞及凋亡与ROS表达水平升高有关，ROS可能具有选择性诱导G2/M期阻滞及凋亡的作用。As2O3所引起的G2/M期阻滞机制尚需进一步研究，找到解除其周期阻滞的方法，可望提高As2O3对卵巢癌细胞的杀伤效果，为将其用于临床治疗卵巢癌奠定理论基础。三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈【参考文献】三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈 1孙洪德，马玲，胡晓晨,等.癌灵1号结合中医辨证治疗急性早幼粒细胞白血病32例J.中国中西医结合杂志, 1992, 12(3): 170171.三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响【摘要】目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法，测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用，并绘制浓度抑制率量效曲线；用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞恶伐泻姨姓治废冈鳖俗砚镇苔苔于妆刽函尔翱霉腥秃席戎轧磨禾钥芥齐谴脐辜甫咖新持友凳褐辆塔顺软癸苫吴寿寅毕照佛矾轴魄孵慢竞淖触是言烈2Ora I, Bondesson L, Jonsson C, et al. 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