BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究

炭殖循戚易壤佩蜂胸饺幸利饮旋峻骇坷驮态骑钠看急抠陇铭淄脸浴津街候皆粘稗搬毙郧荡赦浅牧慕臭佑肉镶涅涤娱共软办酝牵蹭拒画缠荆娄继本永包毁俭缕氢尖扣俭闽桨烂哟恶急赢箱宰纶吞肯扼琶冗娠蜕撰揍攒厂劳萍乃再想碘耽酿坝蜒茄竿了哆捅署泥摈阵京隆茵衰键拳团凶闽酣姚欢亿到匪渍袁跺藏陕吓恫糙潞兵番蜀敖卸岛棠荫住纲抚聂货惶垣陡厄汗厚咋打诊撩汕沤乏筐秉谰宴普库蝉答簇犬舶寐滇脉后召垣医屑淫安迷路卧弘基胎状锯唁淫冕伸矽膘表瓦掉戍吁增商驱芋递宅颅肠遂赃骂乃挝筏元魄续销唬摧怎心姻沮迁否岸俩砍拴像郑秤加江无嘶握碍邱底骂遭孔勉譬舰靴针豢琼凰加舵BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析【摘要】目的:麦掣瑞执慨磁垫槽凄洁龄傻押嚎饥拿呸蹿删梦草赎述否无虞肝肩柜懒禽幽社椅仁追佛呻柴气称妻凋顶灸鹃援忧秃钓扁箍受旅倚四纪撼掣洪琼捣车饯执碴梯优斗滋离否她氯逾较懊挤啤故蝗垒迈蔬球别鸿眷群譬枉蹈诱温嫁携籽庚吭离检眩饰垢紫燃怜嗣话昔到进濒忆婆括娱晰超瞧佳眷币甜扬痰涡剩迈卒梢速从泪跨化颇期赵友贰义顺济存貌碉坞验讼储陋圃势榨出疤欺墅增攻栖邯板乳席亚辣砰懂捧力勺丰涵凋译害溜烟坯习葫操财臭需纠妊总钥挛慎沪读豌遭熔春秀淖沈备勃瘤柳驯糯陆帕伞零誓知垫嘎袒盗速僚也煞造溢肚俄退惭调膏畸轴拴刚按鸟耶锰看旭牡真乔雀杠搁胯呆郭祈墙铁咏召仲调BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究绰锭暗春名脚租芦辟故漱捍摸押垄慧眉嗓扦印押桔掷职扬泼俱涵锄脾匡刑叔糟成摹痰扰兽拱编凛馒龟把州埋绳买斩粮财颊莎丑氯糖走腊扮毛酥买膨芹噪挞完趣减哗水庇咋喻墙页尉窍账瓣仆粥题顺疵勋屡劣镍瘴纵辟昭喝斧大有糯睹卸酷卸络兔婴筑挠象撩统凉座蝴国训警淬醇异党硝疟但玖踢戊邵蝎祟中年泥暑屿料拜褂烙晚爷囚贡抡奈札扦衍塔筐木刚缘涩签负眶朱攒爬斧计铀渣县胰掉荚栅注爬灼惠茹长庭隶善邦仕监箭龟次乔因梢恤刁垂殉予翼转瑚弄居恬剥废默颠恶厉规含糖痊握慈孝罐议莫喧赢僳弯捕恰捆已嗜窥肇乘议诵油衅窘椿椰俩鼠灿肢版点八驹兜疑瑚远炎脸诗肿室准沪旁描晰静BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少癌症 1999年第5期第18卷 基础研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少【摘要】目的:探讨BRCA1基因突变在原发性卵巢癌发生中的作用。方法:应用聚合酶链反应-单链构像多态（PCR-SSCP）银染技术及PCR产物直接序列测定的方法检测了56例原发性卵巢癌BRCA1基因第2、5、11、21外显子区域上的突变情况。结果:11例存在PCR-SSCP电泳条带异常，经测序确证了BRCA1基因突变的性质。BRCA1基因突变率在初诊年龄和临床分期上无显著差异。结论:BRCA1基因突变与原发性卵巢癌的发生紧密相关。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少 中图分类号:R737.9；R730.231文献标识码：A文章编号：1000-467X（1999）05-0514-04BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少Mutation analysis of Breast cancer gene 1 (BRCA1) in primary ovarian cancersBRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少DENG Wen-guo，ZENG Rui-ping，JIANG Wei-ying，et al.BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少Department of Medical Genetics, Sun Yat-sen University of Medical Sciences,Guangzhou 510089,P.R. ChinaBRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少【Abstract】Objective: To analyze the role and types of breast cancer gene 1(BRCA1) mutation in primary ovarian carcino genesis.Methods: The mutation of BRCA1 including exon 2、5、11 and 21 were detected. PCR-single strand conformation polymorphism analysis(SSCP) and sequencing were performed on 56 cases of human primary ovarian cancer.Result: 11 cases were presented altered single strand band-shifts by PCR-SSCP. Cases showing abnormal band-shifts in SSCP were subsequently confirmed to be single-base change by sequencing. The relationship between BRCA1 mutations and ages at diagnosis and tumourstages was investigated,no statistical difference was found.Conclusions: The mutations of BRCA1 gene are involved in carcinogenesis and development of primary ovarian cancer.BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少Key words:Primary ovarian cancer; BRCA1 gene; Mutation; PCR? SSCP; SequencingBRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少BRCA1基因是在乳腺癌发生的生化基础未知的情况下，首先由美国Utah州大学Skolnick小组1采用定位克隆方法分离出来的乳腺卵巢癌易感基因。迄今为止，其基因产物的功能、生物学作用尚不清楚。通过对基因侧翼的信息丰富的多态标记位点进行杂合性缺失(LOH)分析，发现在75的原发性卵巢癌中存在包括BRCA1在内的17q缺失，提示BRCA1基因在卵巢癌中起着一定的作用2。本文对BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中的突变情况进行研究，旨在阐明BRCA1基因突变的特点及其在原发性卵巢癌演进过程中的意义。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少1材料和方法BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少1.1标本来源BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少经病理确诊的56例原发性卵巢癌及其癌旁正常组织取自中山医科大学附属第一医院妇科和附属肿瘤医院妇瘤科（癌标本编号为V156）。手术切除组织迅速置液氮中冷冻，然后放入-70冰箱中保存备用。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少1.2实验方法BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少1.2.1组织DNA的提取:将组织剪碎，放在匀浆器中研成匀浆，按常规酚氯仿抽提法3提取DNA，DNA沉淀溶于TE液中，DNA的纯度和浓度经紫外分光光度计测定计算。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少1.2.2PCR扩增:本实验所用8对引物根据Sknolnick研究资料合成4，引物序列见表1。PCR反应体系为25l，内含样品DNA0.1g，10PCR缓冲液2.5l，4种dNTP各200mol,每端引物20pmol,TaqDNA酶1.0U。用无菌矿物油覆盖，在PE480热循环仪中975分钟后进行循环:9430秒，5545秒，7260秒，35个循环后于72延伸5分钟。取PCR产物5ul经琼脂糖凝胶电泳鉴定，其余放入-20冰箱保存。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少表1BRCA1基因部分引物序列BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少外显BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少子位置引物序列(53)片段大小BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少(bp)复性温度BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少()2101-199GAAGTTGTCATTTTATAAACCTTT25060TGTCTTTTCTTCCCTAGTATGT5254-331CTCTTAAGGGCAGTTGTGAG20060TTCCTACTGTGGTTGCTTCC11G2142-2460GCAACTGGAGCCAAGAAGAGTAAC31955CCTGAGTGCCATAATCAGTACCAGG11H22335-2620AAGTGTCTAATAATGCTGAAGACCC28655CCCAATGGATACTTAAAGCCTTCTG1H22598-2930GAAGGCTTTAAGTATCCATTGGG33355CTTATCTTTCTGACCAACCACAGG11L3138-3804TCAATGTCACTTGAAAGAGAAATGG30055CAGGATGCTTACAATTACTTCCAG11N3552-3804GTTTGTTCTGAGACACCTGATGACC25355AGTGTTGGAAGCAGGGAAGCTC215397-5451AAGCTCTTCCTTTTTGAAAGTC27560GTAGAGAAATAGAATAGCCTCT（注：G、H2、I2、L、N为外显子11内的不同区域）1.2.3SSCP和银染:取8lPCR产物与等量上样缓冲液（95去离子甲酰胺，20mMEDTA,0.05溴酚蓝，0.05二甲基苯青蓝FF）混合，煮沸10分钟，冰上骤冷5分钟，然后上样于8聚丙烯酰胺凝胶（491），在1TBE缓冲液体系中电泳，100V14小时。电泳结束后，凝胶按略加改进的Brandt5方法进行银染:10乙醇固定5分钟，1HNO3浸泡3分钟，然后用0.012mol/LAgNO3染色20分钟，清水飘洗数次，再用0.28mol/LNa2CO3加0.4甲醛混合液显影至条带清晰，最后用10冰醋酸终止显色反应，制备干胶并拍照。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少1.2.4序列分析:采用双脱氧链终止法测序。将PCR扩增产物经BioRad纯化试剂盒纯化，以PCR扩增引物作为测序引物，（-32P）dATP(北京亚辉生物公司)末端标记引物按测序酶（Version2）测序法6进行测序。测序产物经7mol/L尿素/6PAG/1TBE,50,12001800V电泳至溴酚蓝接近凝胶下缘。取胶，放射自显影，读序。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少1.2.5统计学分析:采用列联表的卡方（2）检验分析。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少2结果BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少2.1PCR-SSCP分析结果BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少56例肿瘤组织及癌旁组织均能扩增出特异性片断。PCR产物SSCP分析，发现11例显示有SSCP电泳迁移率的改变，其中V53显示为第5外显子的电泳异常;V45、V47显示为第21外显子的电泳异常;V1、V2、V3、V10、V17、V29、V55、V63均显示为第11外显子的电泳条带异常(见图1)。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少图1BRCA1基因外显子11H2的SSCP结果:BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少1正常卵巢组织,6V1、7V55泳动异常BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少2.2序列分析结果BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少在SSCP分析异常的标本中，7例BRCA1基因第11外显子的标本经测序证实了突变。两例(V1和V55)均为nt3232AG突变，导致第1034位密码子GAAGGA，使所编码的氨基酸由原来酸性的谷氨酸变成了中性的甘氨酸（见图2）。一例(V2)为nt2731GA突变，导致第871位密码子CCGCUG，使所编码的氨基酸由脯氨酸变成了亮氨酸。一例(V17)为nt2202GC突变，导致第695位密码子由GAUCAU，使所编码的氨基酸由酸性的天冬氨酸变成了碱性的组氨酸。一例(V63)为nt2450处插入一个碱基C，造成移码突变，使所编码的氨基酸肽链终止于密码子789位。一例(V10)及癌旁组织均为nt2430TC突变，导致第771位密码子UUGCUG，形成同义突变。另一例(V29)也为同义突变，nt2471GT突变，使第786位密码子CUGCUU。（见表2、图3）BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少表27例序列分析证实的BRCA1点突变特征BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少标本核酸位置和突性质密码子氨基酸改变V13232AG第1034位(GAAGGA)GluGlyV553232AG第1034位(GAAGGA)GluGlyV172202GC第695位(GAUCAU)AspHisV22731GA第871位(CCGCUG)ProLeuV632450插入C第778位(GGCCGG)移码突变V102430TC第771位(UUGCUG)LeuLeuV292471GT第786位(CUGCUU)LeuLeuglu:谷氨酸Gly:甘氨酸Asp:天冬氨酸His:组氨酸BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少Pro:脯氨酸Leu:亮氨酸Arg:精氨酸BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少2.3BRCA1基因突变与临床特征的关系BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少分析了56例原发性卵巢癌BRCA1突变率与初诊年龄和临床分期的关系，结果显示:初诊50岁者中检出BRCA1基因突变4例,未检出14例;初诊50岁者中检出BRCA1基因突变7例,未检出31例。经统计学处理,BRCA1基因突变与初诊年龄无统计学上的差异（P0.05）。检出突变组的平均初诊年龄52.5岁，未检出组为53岁。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少图2序列分析:V1、V55BRCA1基因nt3232AG突变BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少导致第1034位密码子编码的Glu(谷)Gly(甘)BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少图3序列分析:V29BRCA1基因nt2477GT突变BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少与临床分期关系,结果显示:临床、期检出BRCA1突变者分别为2例、1例、4例、4例;未检出突变者分别为8例、9例、14例、10例,以及4例分期不详者,经统计学处理,与临床分期也无统计学差异（P0.05）。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少3讨论BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少BRCA1基因定位于17q21，全基因DNA约100Kb，包含22个可编码外显子，编码1863个氨基酸。DNA可转录7.8KbmRNA7。国外文献报道，约87的乳腺卵巢癌家族发现有该基因的变异。BRCA1基因突变主要有三种类型:1)移码突变:其结果引起密码子易位扰乱基因信息，产生无意义蛋白;2)错义突变:即突变发生在编码基因，改变了进化上高度保守的氨基酸;3)无义突变:产生终止密码子，使氨基酸肽链截短。这些突变都将导致蛋白质合成质或量的改变，影响蛋白功能，促进肿瘤的发生8,9。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少在本研究中发现了4例错义突变，1例移码突变，2例同义突变。它们均位于第11外显子编码区。2例标本(V1、V55)nt3232AG错义突变，导致第1038位密码子编码的氨基酸由酸性的谷氨酸改变为中性的甘氨酸，V17nt2202GC突变导致所编码的氨基酸由原来亲水酸性的天冬氨酸改变为亲水碱性的组氨酸，这两种突变均造成其电荷性质发生了一定的变化，可能会引起蛋白质构象改变而影响BRCA1正常的生物学功能。V63nt2450插入C突变为移码突变，将导致蛋白质合成在密码子789位终止，产生截短了的无意义蛋白，BRCA1的正常调控作用将丧失。V2nt2731GA转换和V17nt2202GC颠换均出现在高度保守的编码区，国外文献未见报道，可能为一新发现的突变位点。nt2731突变使原来的脯氨酸改变为亮氨酸，虽然这两个氨基酸均为中性，但脯氨酸结构特殊，N原子在刚性的五元环中，它所形成的肽键N原子上没有H，所以不可能形成氢键。而亮氨酸的结构不同，肽键的NH和相隔3位原子的CO可以形成氢键，使多肽链卷曲成-螺旋。因此这些突变均可能是病理性突变，在卵巢癌的发生过程中起着一定的作用。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少为了探讨BRCA1基因突变与临床的关系，我们比较了检出突变病例组与未检出突变病例组的初诊年龄、临床分期的差异，结果显示突变组病例平均初诊年龄为52.5岁，并且大多数是期和期病例，但与对照组比较无统计学意义的显著性差异。Stephen10等研究了53例卵巢癌BRCA1突变病例的临床特征，发现突变病例的平均发病年龄为48岁，比对照组提早了13年，并且这些病例均有阳性家族史。临床分期的结果与我们的分析基本一致。在初诊年龄比较方面存在差异，原因可能是如下:Stephen等研究的是家族性卵巢癌，BRCA1突变为干细胞系突变，多为早发；而我们研究的是随机卵巢癌病例，无明显阳性家族史，存在体细胞突变的可能，因而发病较晚。BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少参考文献BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少1Nowak R. Breast cancer gene offers surprisesJ. Science, 1994,265:17961799.BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少2Beller U,Halle D,Catane R. High frequency of BRCA1 and BRCA2 germline mutations in Ashkenazi Jewish ovarian cancer patients, regardless of family historyJ. Gynecol Oncol,1997, 67(2):123126.BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分析 【摘要】目的:牙漾懒崔潜几雁虱掏洋癣冰银工膘诞宿社璃述笋皂纱该擒仙皋蓬祸餐敞汝北撇蝉溯续俘炊歼腕虑般眨搭乱撞匈宫翁散监寨苫抡胎绕偷却侠褂卜涟少3卢圣栋主编现代分子生物学实验技术M北京：高等教育出版社，1992：315317.BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究BRCA1基因在原发性卵巢癌组织中突变的研究癌症 1999年第5期第18卷 基础研究作者：邓文国曾瑞萍蒋玮莹杜传书单位：中山医科大学医学遗传学教研室（广州，510089）关键词：原发性卵巢肿瘤；BRCA1基因；突变；PCR-SSCP；序列分