关 键 词：

3.2

资源描述：

他达拉非药学研究资料（CTD） 目录 3.2.S原料药 1 3.2.S.4 原料药的质量控制 1 3.2.S.4.1 质量标准 1 3.2.S.4.2 分析方法 10 3.2.S 4.3分析方法的验证 26 3.2.S.4.4批检验报告 121 3.2.S.4.5 质量标准制定依据 130 他达拉非药学研究资料（CTD） 3.2.S.4原料药的质量控制 3.2.S.4.1质量标准 3.2.S原料药 3.2.S.4 原料药的质量控制 3.2.S.4.1 质量标准 表3.2.S.4.1-1 原料药质量标准 检查项目 方法 放行标准限度 货架期标准限度 性状 外观性状 2010版《中国药典》二部凡例十五（1） 白色至类白色粉末 白色至类白色粉末 臭 2010版《中国药典》二部凡例十五（1） 无臭 无臭 味 2010版《中国药典》二部凡例十五（1） 无味 无味 引湿性 2010版《中国药典》二部附录ⅪⅩ J 略有引湿性 略有引湿性 溶解度 2010版《中国药典》二部凡例十五（2） 在N,N-二甲基甲酰胺和二甲亚砜中中易溶，略溶于四氢呋喃和2-甲氧基乙醇，微溶于乙腈和甲醇，极微溶于乙醇和异丙醇，不溶于正己烷、正庚烷和水。 在N,N-二甲基甲酰胺和二甲亚砜中中易溶，略溶于四氢呋喃和2-甲氧基乙醇，微溶于乙腈和甲醇，极微溶于乙醇和异丙醇，不溶于正己烷、正庚烷和水。 比旋度 2010版《中国药典》二部附录Ⅵ E +78~+84 +78~+84 鉴别 紫外-可见分光光度法 2010版《中国药典》二部附录Ⅳ A 在221nm、284nm和291nm波长处有最大紫外吸收。 在221nm、284nm和291nm波长处有最大紫外吸收。 高效液相色谱法（HPLC） 2010版《中国药典》二部附录Ⅴ D 在含量测定项下，供试品溶液中主峰的保留时间应与对照品溶液中主峰的保留时间一致。 在含量测定项下，供试品溶液中主峰的保留时间应与对照品溶液中主峰的保留时间一致。 红外分光光度法 2010版《中国药典》二部附录Ⅳ C 本品的红外吸收图谱应与对照品图谱一致。 本品的红外吸收图谱应与对照品图谱一致。 检查 有关物质 2010版《中国药典》二部附录Ⅴ D D色氨酸甲酯盐酸盐≤0.10% 氧化杂质2≤0.10% 中间体1≤0.10% 中间体2≤0.10% 双取代杂质≤0.10% 其他单个杂质≤0.10% 总杂质≤0.30% D色氨酸甲酯盐酸盐≤0.10% 氧化杂质2≤0.10% 中间体1≤0.10% 中间体2≤0.10% 双取代杂质≤0.10% 其他单个杂质≤0.10% 总杂质≤0.30% 对映异构体和非对映异构体 2010版《中国药典》二部附录Ⅴ D 6R,12aS-非对映体≤0.10% 6S,12aS-对映体≤0.10% 6S,12aR-非对映体≤0.10% 总杂质 ≤ 0.30% 6R,12aS-非对映体≤0.10% 6S,12aS-对映体≤0.10% 6S,12aR-非对映体≤0.10% 总杂质 ≤ 0.30% 残留溶剂 2010版《中国药典》二部附录Ⅷ P 甲醇≤0.3% 乙醇≤0.5% 乙腈≤0.041% 二氯甲烷≤0.06% 2-甲氧基乙醇≤0.005% 正庚烷≤0.5% 正丁醇≤0.5% N,N-二甲基甲酰胺≤0.088% 甲醇≤0.3% 乙醇≤0.5% 乙腈≤0.041% 二氯甲烷≤0.06% 2-甲氧基乙醇≤0.005% 正庚烷≤0.5% 正丁醇≤0.5% N,N-二甲基甲酰胺≤0.088% 干燥失重 2010版《中国药典》二部附录Ⅷ L ≤0.5% ≤0.5% 炽灼残渣 2010版《中国药典》二部附录Ⅷ N ≤0.1% ≤0.1% 重金属检查 2010版《中国药典》二部附录Ⅷ H ≤20ppm ≤20ppm 含量 高效液相色谱法 2010版《中国药典》二部附录Ⅴ D 98.0%~102.0%（按无水物计） 98.0%~102.0%（按无水物计） 第130页 他达拉非药学研究资料（CTD） 3.2.S.4原料药的质量控制 3.2.S.4.1质量标准 临床研究用药品质量标准草案 他达拉非 Tadalafei Tadalafil 本品为(6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-[3,4-(亚甲基二氧)苯基]吡嗪并[1,2:1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮。按干燥品计算，含C22H19N3O4应为98.0%~102.0%。 【性状】本品为白色至类白色粉末；无臭无味。 在N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜中易溶，略溶于四氢呋喃和乙二醇单甲醚，微溶于甲醇和乙腈，极微溶解于乙醇和异丙醇，在正己烷、正庚烷和水中不溶。 比旋度 取本品，精密称定，加二甲亚砜溶解并定容稀释制成每1mL中约含10mg的溶液，依法测定（附录ⅥE），比旋度为+78~+84。 【鉴别】 （1）取本品，加0.1%三氟乙酸水溶液-乙腈（1:1）制成每1 ml中约含10 μg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ A)测定，在221 nm、284 nm和291nm的波长处有最大吸收。 （2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 （3）本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致。 【检查】 有关物质 取本品，精密称定，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）溶解并定容稀释制成每1 ml中约含0.4mg的溶液，作为供试品溶液；取他达拉非对照品，精密称定，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）配制成每1 ml中约含0.4μg的溶液，作为对照溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD），以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为0.1%三氟乙酸水溶液，流动相B为乙腈，按下表进行线性梯度洗脱；柱温为40℃；检测波长为285nm。取6R,12aS-非对映体，精密称定，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）溶解并定容稀释制成每1 ml中约含20μg的溶液，作为6R,12aS-非对映体储备液；取本品约10mg，精密称定，置于25mL量瓶中，精密加入6R,12aS-非对映体储备液1ml，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）溶解稀释定容至刻度，摇匀，即得系统适用性试验溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，6R,12aS-非对映体峰和他达拉非峰的分离度应符合要求，6R,12aS-非对映体与他达拉非的相对保留时间应约为1.03。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的2%；精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按加校正因子主成分对照法计算，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1倍（0.1%），剔除在相对保留时间约为1.03处杂质峰后，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍（0.3%），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.5倍（0.05%）的峰可忽略不计。 时间（分钟） 流动相A（%） 流动相B（%） 0 85 15 3 85 15 30 5 95 33 5 95 35 85 15 45 85 15 有关物质相对保留时间表及校正因子 化合物 相对保留时间 校正因子 D-色氨酸甲酯盐酸盐 0.58 1.58 氧化杂质2 0.81 2.76 中间体1 0.85 1.16 他达拉非 1.00 1.00 中间体2 1.24 1.13 双取代杂质 1.28 1.18 对映体和非对映体 取本品适量，加正己烷-异丙醇-乙腈（40:40:20）溶解并稀释制成每1mL中含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；另取他达拉非对照品适量，加正己烷-异丙醇-乙腈（40:40:20）溶解并稀释制成每1mL中含0.5μg的溶液，作为对照溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD），以直链淀粉-三（3,5-二甲苯基氨基甲酸酯）涂敷硅胶为固定性（CHIRALPAK AD-H色谱柱，4.6250mm，5μm，DAICEL CORPORATION）；以正己烷-异丙醇（50:50）为流动相；流速每分钟0.75mL；检测波长222nm；柱温25℃。取等量的他达拉非对照品和6R,12aS-非对映体各适量，置于同一量瓶中，加正己烷-异丙醇-乙腈（40:40:20）溶解并稀释制成每1mL中各含10μg的溶液，作为系统适用性试验溶液。取系统适用性试验溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，6R,12aS-非对映体峰和他达拉非峰的分离度应符合要求，6R,12aS-非对映体与他达拉非的相对保留时间应约为0.79。取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的2%；精密量取供试品溶液和对照溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有下表中的对映体和非对映体杂质峰，按主成分对照法计算，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1倍（0.1%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍（0.3%），供试品溶液色谱图中其它杂质峰忽略不计。 对映体和非对映体相对保留时间 化合物 相对保留时间 6R,12aS-非对映体 0.79 他达拉非 1.00 6S,12aS-对映体 1.50 6S,12aR-非对映体 2.16 残留溶剂 照残留溶剂测定法(中国药典2010版二部附录Ⅷ P)测定，应符合各溶剂限度要求。 精密称取甲醇、无水乙醇、乙腈、二氯甲烷、2-甲氧基乙醇、正庚烷、正丁醇和N,N-二甲基甲酰胺适量，加二甲亚砜定量稀释制成每1ml中约含甲醇600μg、无水乙醇1000μg、乙腈82μg、二氯甲烷120μg、2-甲氧基乙醇10μg、正庚烷1000μg、正丁醇1000μg、N,N-二甲基甲酰胺176μg的溶液，作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液5.0 ml置10ml量瓶中，用二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；另取本品约0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，照残留溶剂测定法(中国药典2010版二部附录Ⅷ P)测定，以6%氰丙基苯基-94%二甲基硅氧烷共聚物为固定液(或极性相近)，起始柱温为35℃，维持13.5分钟后，以每分钟25℃的升温速率升温至220℃，维持5分钟，检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度为250℃，进样口温度为200℃。取对照品溶液1 μl，注入气相色谱仪，记录色谱图，各色谱峰之间的分离度均应不小于1.5。精密量取供试品溶液和对照品溶液各1 μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液如显示甲醇、无水乙醇、乙腈、二氯甲烷、2-甲氧基乙醇、正庚烷、正丁醇和N,N-二甲基甲酰胺峰，按外标法以峰面积计算，含甲醇不得过0.3%，含无水乙醇不得过0.5%，含乙腈不得过0.041%，含二氯甲烷不得过0.06%，含2-甲氧基乙醇不得过0.005%，含正庚烷不得过0.5%，含正丁醇不得过0.5%，含N,N-二甲基甲酰胺不得过0.088%。 干燥失重 取本品，照2010年版《中国药典》二部附录ⅧL，105℃真空干燥3小时，干燥失重不超过0.5%。 炽灼残渣 取本品，依法检查(中国药典2010版二部附录Ⅷ N)，残渣不得过0.1%。 重金属 取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查(中国药典2010版二部附录Ⅷ H 第二法)，含重金属不得超过百万分之二十。 【含量测定】 照高效液相色谱法(中国药典2010版二部附录Ⅴ D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液（45:55）为流动相；流速为每分钟1.5ml；检测波长为285nm；柱温为40℃。取有关物质项下的系统适用性试验溶液20 μl注入液相色谱仪，记录色谱图，他达拉非峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。 测定法 取本品，精密称定，用0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=1:1（v:v）溶解并定容稀释制成每1 ml中约含0.1 mg的溶液，精密量取20 μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取他达拉非对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。 【类别】环磷酸鸟苷特异性磷酸二酯酶选择性可逆抑制剂 【贮藏】避光，密封，阴凉 干燥处保存 【制剂】 【有效期】24个月 【杂质说明】 D-色氨酸甲酯盐酸盐 氧化杂质2：(6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-羟基-6-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡嗪并[1,2:1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮 中间体1：(1R,3R)-2,3,4,9-四氢-1H-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸甲酯盐酸盐 中间体2：(1R,3R)-2-氯乙酰基-2,3,4,9-四氢-9H-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡啶并[3,4-b]吲哚-3-羧酸甲酯盐酸盐 6R,12aS-非对映体：(6R,12aS)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡嗪并[1,2:1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮 6S,12aS-对映体： (6S,12aS)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡嗪并[1,2:1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮 6S,12aR-非对映体：(6S,12aR)-2,3,6,7,12,12a-六氢-2-甲基-6-[3,4-(二氧亚甲基)苯基]吡嗪并[1,2:1,6]吡啶并[3,4-b]吲哚-1,4-二酮 双取代杂质： N,N-二(2-((1R,3R)-1-(3,4-亚甲二氧苯基)-3-甲氧羰基-2,3,4,9-四氢-1H-吡啶并[3,4-b]吲哚-2-基)-2-氧代乙基)甲胺 3.2.S.4.2 分析方法 本产品他达拉非在美国药典（USP）、欧洲药典中均已收载，USP标准品可购买获得。对常规通用检测项目，分析方法采用中国药典（ChP）附录收载的通用方法，对产品特有的具有专属性的检测项目如有关物质、含量测定和残留溶剂检测等，采用USP收载的相应方法。以下是对本产品分析方法开发和验证的详细描述。 表3.2.S.4.1-2 分析方法概述表 检查项目 方法原理 方法 方法验证索引 性状 外观性状 2010版《中国药典》二部凡例十五（1） 目测 不适用 臭 2010版《中国药典》二部凡例十五（1） 鼻闻 不适用 味 2010版《中国药典》二部凡例十五（1） 舌舔 不适用 引湿性 2010版《中国药典》二部附录ⅪⅩ J 样品存放时吸潮程度 一般不需要额外方法验证报告 溶解度 2010版《中国药典》二部凡例十五（2） 溶解能力 一般不需要额外方法验证报告 比旋度 2010版《中国药典》二部附录Ⅵ E 光学活性引起的平面偏振光的旋光现象 一般不需要额外方法验证报告 鉴别 紫外-可见分光光度法 2010版《中国药典》二部附录Ⅳ A 主成分在特定波长下有最大紫外吸收 一般不需要额外方法验证报告 高效液相色谱法（HPLC） 2010版《中国药典》二部附录Ⅴ D 主成分在HPLC测定条件下特定的色谱行为（保留时间） 含量测定方法验证报告 红外分光光度法 2010版《中国药典》二部附录Ⅳ C 溴化钾压片样品的红外吸收 一般不需要额外方法验证报告 检查 有关物质 2010版《中国药典》二部附录Ⅴ D 采用反相HPLC法分离主成分与各杂质，并于各杂质相近的波长处285nm测定杂质，UV检测器。通过方法学研究，采用加校正因子的主成分自身对照法计算杂质含量。 有关物质分析方法验证报告 对映体和非对映体 2010版《中国药典》二部附录Ⅴ D 采用手性HPLC法分离主成分与各异构体，222nm测定，UV检测器。通过方法学研究，采用主成分自身对照法计算杂质含量。 对映体和非对映体分析方法验证报告 残留溶剂 2010版《中国药典》二部附录Ⅷ P 检测甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、2-甲氧基乙醇、正庚烷、正丁醇和N,N-二甲基甲酰胺，外标法定量。 残留溶剂方法验证报告 干燥失重 2010版《中国药典》二部附录Ⅷ L 105℃真空加热3小时 一般不需要额外方法验证报告 炽灼残渣 2010版《中国药典》二部附录Ⅷ N 重量分析 一般不需要额外方法验证报告 重金属检查 2010版《中国药典》二部附录Ⅷ H 目视比色 一般不需要额外方法验证报告 含量 高效液相色谱法 2010版《中国药典》二部附录Ⅴ D 采用反相HPLC方法分离出主成分并于主峰最大吸收285nm波长处测定，UV检测器，通过外标法计算主成分含量。 含量方法验证报告 他达拉非药学研究资料（CTD） 3.2.S.4原料药的质量控制 3.2.S.4.2分析方法 3.2.S.4.2.1 性状 3.2.S.4.2.1.1 外观 方法 经目测，且取少量样品用舌尖轻舔并近距离鼻嗅，结果见表3.2.S.4.2.1.1-1。 表3.2.S.4.2.1.1-1 他达拉非外观性状结果 批号 外表感观 色泽 臭 味 成品-201405011 粉末 白色 无 无 成品-201405021 粉末 白色 无 无 成品-201405031 粉末 白色 无 无 USP对照品 粉末 白色 无 无 标准规定 本品为白色至类白色粉末，无臭无味。 3.2.S.4.2.1.2 溶解度 依据2010年版《中国药典》二部凡例十五（2）溶解度测定方法进行检查。 方法 取供试品粉末，于25℃2℃一定量的溶剂中（考察的溶剂包括：N,N-二甲基甲酰胺，二甲亚砜，四氢呋喃，2-甲氧基乙醇，乙腈，甲醇，乙醇，异丙醇，正己烷、正庚烷和水）每隔5分钟强力振摇30秒，观察30分钟内的溶解情况。三批供试品（批号：成品-201405011、成品-201405021、成品-201405031）试验结果见表3.2.S.4.2.1.2-1。 表3.2.S.4.2.1.2-1 他达拉非溶解度试验结果 溶剂 供试品g 溶剂体积1(ml) 现象 溶剂体积2(ml) 现象 结论 中试样品（批号：成品-201405011） N,N-二甲基甲酰胺 0.10070 0.09 未完全溶解 0.99 完全溶解 易溶 二甲亚砜 0.10155 0.09 未完全溶解 0.99 完全溶解 易溶 四氢呋喃 0.10675 0.09 未完全溶解 9.99 完全溶解 略溶 2-甲氧基乙醇 0.09960 0.99 未完全溶解 9.99 完全溶解 略溶 乙腈 0.10196 2.99 未完全溶解 99.9 完全溶解 微溶 甲醇 0.10033 2.99 未完全溶解 99.9 完全溶解 微溶 乙醇 0.10132 9.99 未完全溶解 999.9 完全溶解 极微溶 异丙醇 0.10074 9.99 未完全溶解 999.9 完全溶解 极微溶 正己烷 0.09970 100 未溶解 >1000 未溶解 几乎不溶 正庚烷 0.10052 100 未溶解 >1000 未溶解 几乎不溶 水 0.10061 100 未溶解 >1000 未溶解 几乎不溶 溶剂 供试品g 溶剂体积1(ml) 现象 溶剂体积2(ml) 现象 结论 中试样品（批号：成品-201405021） N,N-二甲基甲酰胺 0.10038 0.09 未完全溶解 0.99 完全溶解 易溶 二甲亚砜 0.10103 0.09 未完全溶解 0.99 完全溶解 易溶 四氢呋喃 0.10053 0.09 未完全溶解 9.99 完全溶解 略溶 2-甲氧基乙醇 0.10114 0.99 未完全溶解 9.99 完全溶解 略溶 乙腈 0.10122 2.99 未完全溶解 99.9 完全溶解 微溶 甲醇 0.10089 2.99 未完全溶解 99.9 完全溶解 微溶 乙醇 0.10074 9.99 未完全溶解 999.9 完全溶解 极微溶 异丙醇 0.10132 9.99 未完全溶解 999.9 完全溶解 极微溶 正己烷 0.10051 100 未溶解 >1000 未溶解 几乎不溶 正庚烷 0.10111 100 未溶解 >1000 未溶解 几乎不溶 水 0.10066 100 未溶解 >1000 未溶解 几乎不溶 溶剂 供试品g 溶剂体积1(ml) 现象 溶剂体积2(ml) 现象 结论 中试样品（批号：成品-201405031） N,N-二甲基甲酰胺 0.10055 0.09 未完全溶解 0.99 完全溶解 易溶 二甲亚砜 0.10111 0.09 未完全溶解 0.99 完全溶解 易溶 四氢呋喃 0.10028 0.09 未完全溶解 9.99 完全溶解 略溶 2-甲氧基乙醇 0.10088 0.99 未完全溶解 9.99 完全溶解 略溶 乙腈 0.10045 2.99 未完全溶解 99.9 完全溶解 微溶 甲醇 0.10126 2.99 未完全溶解 99.9 完全溶解 微溶 乙醇 0.10117 9.99 未完全溶解 999.9 完全溶解 极微溶 异丙醇 0.10085 9.99 未完全溶解 999.9 完全溶解 极微溶 正己烷 0.10075 100 未溶解 >1000 未溶解 几乎不溶 正庚烷 0.10182 100 未溶解 >1000 未溶解 几乎不溶 水 0.10118 100 未溶解 >1000 未溶解 几乎不溶 标准规定 本品在N,N-二甲基甲酰胺和二甲亚砜中中易溶，略溶于四氢呋喃和2-甲氧基乙醇，微溶于乙腈和甲醇，极微溶于乙醇和异丙醇，不溶于正己烷、正庚烷和水。 3.2.S.4.2.1.3 引湿性 方法 取本品，照药物引湿性试验指导原则（中国药典2010年版二部附录ⅪⅩ J）试验，取干燥的具塞玻璃称量瓶于试验前一天置于适宜的恒温干燥器内（25℃1℃，下部放置氯化铵饱和溶液），精密称定重量（m1）。取三批供试品（批号：成品-201405011、成品-201405021、成品-201405031）适量，每批2份，平铺于称量瓶中，供试品厚度约为1mm左右，精密称定重量（m2）。将称量瓶敞口放置于恒温干燥器24小时。24小时后盖好称量瓶盖，取出，精密称定重量（m3），按下面公式计算增重百分率（%）。 增重百分率（%）=（m3-m2）/(m2-m1) 100% 根据引湿性特征描述与引湿性增重的界定，结果见表3.2.S.4.2.1.3-1。 表3.2.S.4.2.1.3-1 他达拉非引湿性试验结果 批号 m1(g) m2(g) m3(g) m2-m1(g) m3-m2(g) 增重百分率（%） 结果描述 成品-201405011 27.27133 27.57531 27.57590 0.00059 0.194% 0.197% 几乎无引湿性 30.03991 30.30581 30.30634 0.00053 0.199% 成品-201405021 25.47628 25.77440 25.77506 0.00066 0.221% 0.244% 略有引湿性 29.71927 30.00377 30.00453 0.00076 0.267% 成品-201405031 26.68292 26.98380 26.98485 0.00105 0.349% 0.258% 略有引湿性 25.99658 26.30104 26.30155 0.00051 0.168% 标准规定 本品略有引湿性。 3.2.S.4.2.1.4 熔点 方法 取三批供试品（批号：成品-201405011、成品-201405021、成品-201405031）适量，照中国药典2010年版二部附录Ⅵ C第一法操作，进行熔点试验。 表3.2.S.4.2.1.4-1 他达拉非熔点测定结果 批号 初熔（℃） 终熔（℃） 成品-201405011 284.5 288.0 284.0 290.0 284.0 289.5 成品-201405021 284.0 289.5 284.0 288.5 285.0 287.5 成品-201405031 284.0 289.5 283.5 289.0 283.5 290.0 USP对照品（F0L003） 285.0 288.5 283.0 287.5 283.0 287.5 结果判定 上述数据范围为283.0~290.0℃，考虑到不同操作者和不同实验室的实验误差，暂定本品的熔点为278.0~291.0℃。当初熔、全熔时的温度均在规定的范围以内时，判为“符合规定”。但如有下列情况之一者，即判为“不符合规定”：①初熔温度低于规定范围的低限，②全熔温度超过规定范围的高限。 3.2.S.4.2.2 鉴别 3.2.S.4.2.2.1 紫外-可见分光光度法（UV） 他达拉非在221nm、 284nm和291nm波长处有最大紫外特征吸收，根据这个特征可以对他达拉非进行鉴别。 方法 依据2010版《中国药典》二部附录ⅣA，取本品，用0.1%三氟乙酸水溶液-乙腈（50：50）溶解配制成浓度约为10μg/mL的供试品溶液，在200~400nm波长范围内扫描。 结果判定 本品在221nm、284nm和291nm波长处应有最大紫外特征吸收。 3.2.S.4.2.2.2 高效液相色谱法（HPLC） 依据2010年版《中国药典》二部附录Ⅴ D高效液相色谱法规定进行操作。 在含量测定项下，根据供试品溶液主峰的保留时间与对照品溶液主峰的保留时间是否一致进行鉴别。 方法 取含量测定项下的供试品溶液和对照品溶液，照含量测定项下的色谱条件检测。 结果判定 供试品溶液主峰的保留时间与对照品溶液主峰的保留时间差不大于0.2分钟，可判为一致。 3.2.S.4.2.2.3 红外光谱法（IR） 依据2010版《中国药典》二部附录Ⅳ C红外分光光度法规定进行操作。 方法 采用溴化钾压片法，取本品约1.5mg，置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾细粉约300mg，充分研磨混匀，置直径为13mm的压片磨具中，加压至0.8106kPa，保持压力2分钟，撤去压力，取出供试片（目视检测，片子应呈透明状，其中样品分布应均匀，并无明显的颗粒状样品），置红外光谱仪中，在4000~400cm-1范围内扫描。 结果判定 将供试品红外光谱与对照品红外光谱的全谱谱形进行比较，考察相应的谱带有无差别和各谱带的相对强弱是否一致。 他达拉非药学研究资料（CTD） 3.2.S.4原料药的质量控制 3.2.S.4.2分析方法 3.2.S.4.2.3 检查 3.2.S.4.2.3.1 有关物质（HPLC法） 依据USP 36 Tadalafil检查项下有关物质检测方法进行检查，具体依据2010年版《中国药典》二部附录Ⅴ D高效液相色谱法进行操作。 试验条件如下： 仪器： Agilent 1100 HPLC System，配备DAD检测器 色谱柱： Agilent Zorbax SB-C8，2504.6mm，5μm 流动相A： 0.1%三氟乙酸（TFA）水溶液 流动相B： 乙腈 洗脱方式： 梯度洗脱 检测波长： 285nm 柱温： 40℃ 流速： 1.0mL/min 进样量 20μl 梯度洗脱表： T (min) Solution A (%) Solution B (%) 0 85 15 3 85 15 30 5 95 33 5 95 35 85 15 45 85 15 稀释液： 0.1% TFA-乙腈（50：50） 空白溶液： 稀释液 对照品溶液： 取他达拉非USP对照品适量，精密称定，用稀释液溶解稀释至0.4mg/mL。 0.1%对照溶液： 精密量取0.1mL对照品溶液至100mL量瓶中，用稀释液稀释定容至刻度，混匀。（他达拉非浓度：0.4μg/mL） 供试品溶液： 取他达拉非供试品适量，精密称定，用稀释液溶解并稀释至0.4mg/mL。 线性溶液： 取他达拉非、D-色氨酸甲酯盐酸盐、中间体1、中间体2、氧化杂质2和他达拉非双取代杂质制成浓度为0.50μg/mL、0.48μg/mL、0.44μg/mL、0.40μg/mL、0.36μg/mL和0.32μg/mL的他达拉非及各有关物质线性溶液。 有关物质储备液： 取D-色氨酸甲酯盐酸盐、中间体1、中间体2、氧化杂质2、他达拉非双取代杂质和他达拉非6R,12aS-非对映体各约10mg，分别置于10mL量瓶中，精密称定，用稀释液溶解定容至刻度，摇匀。 0.1%杂质供试品溶液：取他达拉非对照品10mg，精密称定，置于25mL量瓶中，先加少量稀释液溶解，再精密加入D-色氨酸甲酯盐酸盐、中间体1、中间体2、氧化杂质2和他达拉非双取代杂质储备液各100μl，用稀释液稀释定容至刻度，混匀。（他达拉非浓度：0.4mg/mL；各有关物质浓度：0.4μg/mL） 系统适用性溶液： 取他达拉非对照品10mg，精密称定，置于25mL量瓶中，先加少量稀释液溶解，再精密加入他达拉非6R,12aS-非对映体储备液1mL，用稀释液稀释定容至刻度，混匀。（他达拉非浓度：0.4mg/mL；他达拉非6R,12aS-非对映体浓度：0.4μg/mL） 系统适用性： 按照色谱条件分别进样空白溶液、系统适用性溶液、0.1%对照溶液、供试品溶液，记录色谱图。 系统适用性要求： 空白溶液无干扰峰；重复进样6针0.1%对照溶液，在6针0.1%对照溶液溶液所得色谱图中，主峰峰面积的RSD≤2.0%；系统适用性溶液中，他达拉非和他达拉非6R,12aS-非对映体的分离度不得小于2.0，相对保留时间应约为1.03。 含量计算方法： 用0.1%对照溶液以加校正因子的主成分自身对照法计算有关物质含量。 具体试验操作如下： 取本品，精密称定，用稀释液溶解并定容稀释制成每1 ml中约含0.4 mg的溶液，作为供试品溶液；取他达拉非USP对照品，精密称定，用稀释液溶解并定容稀释制成每1 ml中约含0.4 μg的溶液，作为对照溶液。照上述色谱条件，检测波长为285 nm；精密量取供试品溶液和对照溶液各20 μl，分别注入液相色谱仪。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，按加校正因子主成分自身对照法计算，单个最大杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1倍（0.1%），剔除在相对保留时间约为1.03处杂质峰后，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍（0.3%），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.5倍（0.05%）的峰可忽略不计。 计算公式： 其中，为供试品溶液中杂质峰面积；为对照溶液主峰峰面积 3.2.S.4.2.3.2 对映异构体和非对映异构体（HPLC法） 依据USP 36 Tadalafil检查项下对映异构体和非对映异构体检测方法进行检查，具体依据2010年版《中国药典》二部附录Ⅴ D高效液相色谱法进行操作。 试验条件如下： 仪器： Agilent 1100 HPLC System，配备DAD检测器 色谱柱： Daicel CHIRALPAK AD-H柱，2504.6mm，5μm 流动相A： 正己烷-异丙醇=50:50，等度洗脱 检测波长： 222nm 柱温： 25℃ 流速： 0.75mL/min 进样量 10μl 稀释液： 正己烷-异丙醇-乙腈（40:40:20） 空白溶液： 稀释液 对照品溶液： 取他达拉非USP对照品适量，精密称定，用稀释液溶解稀释至0.5mg/mL。 0.1%对照溶液： 精密量取0.1mL对照品溶液至100mL量瓶中，用稀释液稀释定容至刻度，混匀。（他达拉非浓度：0.5μg/mL） 供试品溶液： 取他达拉非供试品适量，精密称定，用稀释液溶解并稀释至0.5mg/mL。 线性溶液： 取他达拉非、6S,12aS-对映异构体、6S,12aR-非对映异构体和6R,12aS-非对映异构体制成浓度为0.25μg/mL、0.40μg/mL、0.50μg/mL、0.80μg/mL和1.00μg/mL的他达拉非及各异构体线性溶液。 异构体储备液： 取6S,12aS-对映异构体、6S,12aR-非对映异构体和6R,12aS-非对映异构体各约10mg，分别置于10mL量瓶中，精密称定，用稀释液溶解定容至刻度，摇匀。 0.1%异构体供试品溶液：取他达拉非对照品12.5mg，精密称定，置于25mL量瓶中，先加少量稀释液溶解，再精密加入6S,12aS-对映异构体、6S,12aR-非对映异构体和6R,12aS-非对映异构体储备液各100μl，用稀释液稀释定容至刻度，混匀。（他达拉非浓度：0.5mg/mL；各有关物质浓度：0.5μg/mL） 系统适用性溶液： 取等量的他达拉非对照品和6R,12aS-非对映体各适量，精密称定，置于同一量瓶中，用稀释液溶解并稀释定容制成每1mL中各含10μg的溶液，混匀。 系统适用性： 按照色谱条件分别进样空白溶液、系统适用性溶液、0.1%对照溶液、供试品溶液，记录色谱图。 系统适用性要求： 空白溶液无干扰峰；重复进样6针0.1%对照溶液，在6针0.1%对照溶液溶液所得色谱图中，主峰峰面积的RSD≤2.0%；系统适用性溶液中，他达拉非和他达拉非6R,12aS-非对映体的分离度不得小于2.0，相对保留时间应约为0.79。 异构体含量计算方法：用主成分自身对照法计算异构体含量。 具体试验操作如下： 取本品，精密称定，用稀释液溶解并定容稀释制成每1 ml中约含0.5 mg的溶液，作为供试品溶液；取他达拉非USP对照品，精密称定，用稀释液溶解并定容稀释制成每1 ml中约含0.5 μg的溶液，作为对照溶液。照上述色谱条件，检测波长为222nm；精密量取供试品溶液和对照溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪。供试品溶液的色谱图中如有异构体峰，按主成分自身对照法计算，单个最大异构体峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1倍（0.1%），各异构体峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3倍（0.3%），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.5倍（0.05%）的峰可忽略不计。 计算公式： 其中，为供试品溶液中异构体峰面积；为对照溶液主峰峰面积 3.2.S.4.2.3.3 残留溶剂（GC法） 依据2010年版《中国药典》二部附录Ⅷ P气相色谱法，依法进行检查。 试验条件如下： 仪器： SHIMADZU GCMS-QP2010SE，FID检测器 色谱柱： Agilent DB-624 30mm0.53mm3.0μm 柱温： 起始温度35℃,恒温13.5分钟后，以每分钟25℃的升温速度升至220℃，维持5分钟。 进样口温度： 200℃ 检测器温度： 250℃ 载气： 氮气 载气流速： 6mL/min 分流比： 1：10 进样量： 1μl 空白溶液： 二甲亚砜 对照品储备液： 精密称取甲醇、无水乙醇、乙腈、二氯甲烷、2-甲氧基乙醇、正庚烷、正丁醇和N,N-二甲基甲酰胺适量，加二甲亚砜定量稀释制成每1ml中约含甲醇600μg、无水乙醇1000μg、乙腈82μg、二氯甲烷120μg、2-甲氧基乙醇10μg、正庚烷1000μg、正丁醇1000μg、N,N-二甲基甲酰胺176μg的溶液。 对照溶液： 精密量取对照品贮备液5.0 ml置10ml量瓶中，用二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液 供试品溶液： 取他达拉非约0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液 系统适用性： 分别进样空白溶液；对照溶液；供试品溶液，记录色谱图。 系统适用性要求：各溶剂色谱峰之间的分离度不得小于1.5，理论塔板数不得低于5000。 残留溶剂计算： 用对照溶液以外标法计算各溶剂含量。 具体试验操作如下： 精密称取甲醇、无水乙醇、乙腈、二氯甲烷、2-甲氧基乙醇、正庚烷、正丁醇和N,N-二甲基甲酰胺适量，加二甲亚砜定量稀释制成每1ml中约含甲醇600μg、无水乙醇1000μg、乙腈82μg、二氯甲烷120μg、2-甲氧基乙醇10μg、正庚烷1000μg、正丁醇1000μg、N,N-二甲基甲酰胺176μg的溶液，作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液5.0 ml置10ml量瓶中，用二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；另取本品约0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。照残留溶剂测定法(中国药典2010版二部附录Ⅷ P)试验，以6%氰丙基苯基-94%二甲基硅氧烷共聚物为固定液（或极性相近），起始柱温35℃，维持13.5分钟后，以每分钟25℃的速率升温至220℃，维持5分钟，检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度为250℃，进样口温度为200℃。取对照品溶液1 μl，注入气相色谱仪，记录色谱图，各色谱峰之间的分离度均应不小于1.5。精密量取供试品溶液和对照品溶液各1 μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，含甲醇不得过0.3%，含乙醇不得过0.5%，含乙腈不得过0.041%，含二氯甲烷不得过0.06%，含2-甲氧基乙醇不得过0.005%，含正庚烷不得过0.5%，含正丁醇不得过0.5%，含N,N-二甲基甲酰胺不得过0.088%。 计算公式如下： 其中，为样品中杂质峰面积；对照溶液中杂质峰面积； 对照溶液浓度；供试品溶液浓度 3.2.S.4.2.3.4干燥失重 根据2010年版《中国药典》二部附录ⅧL，依法检查。 具体操作方法如下： （1）称取供试品：称取供试品约1.0g，置105℃下条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定。 （2）干燥：将称量瓶置105℃下进行干燥；干燥时需将瓶盖取下置称量瓶旁或将瓶盖半开，干燥取出时需将称量瓶盖好。 （3）称重：将称量瓶取出后置干燥器中放冷至室温（一般需30~60分钟），再称定重量。 （4）恒重：称定后的供试品按（2）和（3）操作，直至恒重。（备注：干燥至恒重，除另有规定外，系指在规定条件下连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下的重量；干燥过程中的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1小时后进行）。 结果判定：本品减失重量不得过0.05%，计算公式如下： 其中 W1：供试品的重量（g） W2：称量瓶恒重的重量（g） W3：（称量瓶+供试品）恒重的重量（g） 3.2.S.4.2.3.5 炽灼残渣 根据《中国药典》2010年版二部附录Ⅷ N炽灼残渣检查方法，依法检查。 方法 取干净坩埚，标记后放置于600℃马弗炉中炽灼至恒重，放入干燥器中冷却至室温，精密称重（m1）。取三批供试品各约1g，，按标记的顺序置于炽灼至恒重的铂坩埚中，精密称重（m2），用酒精灯在室温条件下缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5~1ml使湿润，低温加热至硫酸蒸汽除尽后，在600℃炽灼至完全灰化，移至干燥器内，放冷，精密称定，再在600℃炽灼至恒重。 结果判定 本品炽灼残渣不得过0.1%。 3.2.S.4.2.3.6 重金属 根据中国药典2010年版二部附录Ⅷ H第二法重金属检查方法，依法检查。 方法 取25ml纳氏比色管三支，分别标记为甲、乙、丙。取炽灼残渣，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸汽除尽，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显微粉红色，再加醋酸盐缓冲液（pH 3.5）2ml，微热溶解后，移至纳氏比色管中，加水稀释成25ml，作为甲管；另加水置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH 3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移至纳氏比色管中，加标准铅溶液1ml，再用水稀释成25ml，作为乙管；再在甲、乙管中分别接入硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上而下透视，比较甲、乙、丙三管的颜色差异。 结果判定 当乙管所呈颜色浅于甲管（20μg，即<20ppm），判为符合规定。 他达拉非药学研究资料（CTD） 3.2.S.4原料药的质量控制 3.2.S.4.2分析方法 3.2.S.4.2.4 含量测定（HPLC法） 依据USP 36 Tadalafil含量测定项下方法进行测定，具体依据2010年版《中国药典》二部附录Ⅴ D高效液相色谱法进行操作。 试验条件如下： 仪器： Agilent 1100 HPLC System，配备DAD检测器 色谱柱： Agilent Zorbax SB-C8，2504.6mm，5μm 流动相： 0.1%三氟乙酸（TFA）水溶液-乙腈=55:45 检测波长： 285nm 柱温： 40℃ 流速： 1.5mL/min 进样量： 20μl 稀释液： 0.1% TFA-乙腈（50：50） 空白溶液： 稀释液 对照溶液： 取他达拉非对照品适量，精密称定，用稀释液溶解稀释至0.1mg/mL。 供试品溶液： 取他达拉非供试品适量，精密称定，用稀释液溶解稀释至0.1mg/mL，同法配制两份测试溶液。 线性溶液： 取他达拉非对照品适量，精密称定，用稀释液溶解并逐步稀释配制成浓度为80μg/mL、90μg/mL、100μg/mL、110μg/mL和120μg/mL系列线性浓度溶液。 系统适用性： 按照色谱条件分别进样空白溶液、对照溶液记录色谱图。 系统适用性要求：空白溶液无干扰峰；重复进样6针对照溶液，在6针对照溶液所得色谱图中，主峰峰面积的RSD≤2.0%。 含量计算方法： 用对照溶液以外标法计算产品含量。 计算公式如下： 其中，为对照品称样量；为对照品含量；为供试品溶液主峰面积；为供试品溶液稀释倍数；为对照品溶液主峰面积；为供试品称样量；为供试品干燥失重（%）；为对照品稀释倍数。 罗氟司特药学研究资料（CTD） 3.2.S.4原料药的质量控制 3.2.S.4.3分析方法的验证 3.2.S 4.3分析方法的验证 按照《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》、《化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则》、《化学药物杂质研究技术指导原则》、《化学药物残留溶剂研究技术指导原则》等以及2010年版《中华人民共和国药典》附录中有关的指导原则对鉴别、检查、含量测定方法进行了方法学验证。质量标准中的其他项目为中国药典2010年版二部附录中收载的常规检查项目，未进行方法学验证。 3.2.S.4.3.1 鉴别 3.2.S.4.3.1.1 紫外-可见分光光度法（UV） 方法 依据2010版《中国药典》二部附录ⅣA，取本品，用0.1% TFA-乙腈（50：50）溶解配制成浓度约为10μg/mL的供试品溶液，在200~400nm波长范围内全扫，结果见表3.2.S.4.3.1.1-1和附图3.2.S.4.3.1.1-1~附图3.2.S.4.3.1.1-4。 表3.2.S.4.3.1.1-1 他达拉非紫外特征吸收数据 批号 波长（Wavelength，nm） 吸光度值（Abs.） 成品-201405011 290.90 0.28 284.20 0.29 220.60 0.89 成品-201405021

内容简介：

-