CN102523920A一种灰树花菌丝球的制备方法及其产品

CN102523920A一种灰树花菌丝球的制备方法及其产品 (10)申请公布号102523920A (43)申请公布日xx.07.04102523920A*102523920A* (21)申请号xx10005997.0 (22)申请日xx.01.11A01G1/04(xx.01)C05G1/00(xx.01) (71)申请人福建农林大学地址350002福建省福州市仓山区建新镇金山学区 (72)发明人刘斌陈颖黄一帆 (74)专利代理机构福州元创专利商标代理有限公司35100代理人蔡学俊 (54)发明名称一种灰树花菌丝球的制备方法及其产品 (57)摘要本发明涉及一种灰树花菌丝球的制备方法及其产品。 首先该方法以灰树花为出发菌株，进行液体发酵，培养基的主要成分为果蔬汁，获得灰树花菌丝球。 本发明还提供了所述制备方法得到的灰树花菌丝球制成各种灰树花菌丝球干品、饮料、果冻、口服液或胶囊产品。 本发明用果蔬汁作培养基，制备的灰树花菌丝球及其产品具有色泽天然美观、风味独特、营养丰富和一定的保健作用的特点。 (51)Int.Cl.权利要求书1页说明书7页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书1页说明书7页1/1页21.一种灰树花菌丝球的制备方法，其特征在于以灰树花为出发菌株，进行液体发酵，培养基的主要成分为果蔬汁，获得灰树花菌丝球。 2.根据权利要求1所述的灰树花菌丝球的制备方法，其特征在于所述液体发酵包括摇瓶扩大培养、种子罐扩大培养和发酵罐扩大培养。 3.根据权利要求2所述的灰树花菌丝球的制备方法，其特征在于所述液体发酵包括以下步骤 （1）培养基组成摇瓶培养基果蔬汁50-300ml、白砂糖5-20g、KH2PO41-5g、MgSO47H2O1-5g、ZnSO47H2O0.1-0.5g，加水定容至1000ml，pH自然；发酵培养基果蔬汁50-300ml、白砂糖5-20g、KH2PO41-5g、MgSO47H2O1-5g、ZnSO47H2O0.1-0.5g、CaCO33-7g，加水定容至1000ml，pH自然； （2）培养条件一级摇瓶将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种，培养条件为以100-250mL/500mL装量，接入0.5-2cm2的斜面菌种，70-250rpm振荡培养5-10d，温度20-30；二级摇瓶将生产摇瓶一级种用体积比为5-20%的接种量，按上述一级摇瓶培养基和培养条件，再次扩大培养3-7天，得到生产摇瓶二级种；种子罐培养将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；培养条件为接种量5-15%（v/v），罐温20-30，罐压0.03-0.1MPa，搅拌速度50-200rpm，通气量1:0.2-1.0v/v.min，发酵培养3-7d；发酵罐培养按种子罐培养所述的发酵培养基和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵5-10天放罐，发酵醪经过滤，得到发酵液和新鲜的灰树花菌丝球。 4.根据权利要求1所述的灰树花菌丝球的制备方法，其特征在于所述果蔬汁为葡萄汁、苹果汁、橙汁、桃汁、山楂汁、梨汁、西瓜汁、甘蔗汁、草莓汁、杨梅汁、胡萝卜汁、黄瓜汁、番茄汁、白菜汁、芹菜汁中的一种或几种。 5.一种灰树花菌丝球产品，其特征在于利用权利要求 1、 2、3或4所述制备方法得到的灰树花菌丝球制成各种灰树花菌丝球干品、饮料、果冻、口服液或胶囊产品。 权利要求书102523920A21/7页3一种灰树花菌丝球的制备方法及其产品技术领域0001本发明涉及一种灰树花菌丝球的制备方法及其产品。 技术背景0002食用菌是一种味道鲜美、营养丰富的保健食品，其营养价值和保健价值主要体现在这样几个方面，一是食用菌中蛋白质含量高，且含有多种人体必需氨基酸；二是食用菌中碳水化合物含量低，是一种低热量食物；三是食用菌中不饱和脂肪酸含量高，经常食用可很好地预防高血脂等现代的城市病；四是食用菌中含有磷、铁等多种人体所需的微量元素以及多种维生素；五是食用菌含有大量真菌多糖，能有效的提高人体免疫能力和抗肿瘤能力，因此，联合国粮农组织提出21世纪最合理的膳食结构为“一荤一素一菇”。 0003目前，在国内外用食药用菌子实体加工成的各类保健品，如各种食药用菌饮料、口服液、胶囊等，尚无涉及到以果蔬汁为原料，通过液体发酵法制备灰树花菌丝球的方法及其产品。 0004发明内容本发明的目的在于提供一种灰树花菌丝球的制备方法及其产品，以果蔬汁为原料，通过液体发酵法制备灰树花菌丝球及其产品。 0005本发明首先提供了一种灰树花菌丝球的制备方法，以灰树花为出发菌株，进行液体发酵，培养基的主要成分为果蔬汁，获得灰树花菌丝球。 0006所述液体发酵包括摇瓶扩大培养、种子罐扩大培养和发酵罐扩大培养。 0007所述液体发酵包括以下步骤 （1）培养基组成摇瓶培养基果蔬汁50-300ml、白砂糖5-20g、KH2PO41-5g、MgSO47H2O1-5g、ZnSO47H2O0.1-0.5g，加水定容至1000ml，pH自然；发酵培养基果蔬汁50-300ml、白砂糖5-20g、KH2PO41-5g、MgSO47H2O1-5g、ZnSO47H2O0.1-0.5g、CaCO33-7g，加水定容至1000ml，pH pH自然； （2）培养条件一级摇瓶将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种，培养条件为以100-250mL/500mL装量，接入0.5-2cm2的斜面菌种，70-250rpm振荡培养5-10d，温度20-30；二级摇瓶将生产摇瓶一级种用体积比为5-20%的接种量，按上述一级摇瓶培养基和培养条件，再次扩大培养3-7天，得到生产摇瓶二级种；种子罐培养将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；培养条件为接种量5-15%（v/v），罐温20-30，罐压0.03-0.1MPa，搅拌速度50-200rpm，通气量1:0.2-1.0v/v.min，发酵培养3-7d；发酵罐培养按种子罐培养所述的发酵培养基和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵5-10天放罐，发酵醪经过滤，得到发酵液和新鲜的灰树花菌丝球。 说明书102523920A32/7页40008所述果蔬汁为葡萄汁、苹果汁、橙汁、桃汁、山楂汁、梨汁、西瓜汁、甘蔗汁、草莓汁、杨梅汁、胡萝卜汁、黄瓜汁、番茄汁、白菜汁、芹菜汁中的一种或几种。 0009本发明还提供了将上述制备方法得到的灰树花菌丝球制成各种灰树花菌丝球干品、饮料、果冻、口服液或胶囊产品。 0010用果蔬汁作培养基，制备的灰树花菌丝球及其产品具有色泽天然美观、风味独特、营养丰富和一定的保健作用的特点。 0011具体实施例本发明的一种灰树花菌丝球的制备方法，以灰树花为出发菌株，进行液体发酵，培养基的主要成分为果蔬汁，获得灰树花菌丝球。 0012所述液体发酵包括摇瓶扩大培养、种子罐扩大培养和发酵罐扩大培养。 0013所述液体发酵包括以下步骤 （1）培养基组成摇瓶培养基胡萝卜汁50-300ml、白砂糖5-20g、KH2PO41-5g、MgSO47H2O1-5g、ZnSO47H2O0.1-0.5g，加水定容至1000ml，pH自然；发酵培养基果蔬汁50-300ml、白砂糖5-20g、KH2PO41-5g、MgSO47H2O1-5g、ZnSO47H2O0.1-0.5g、CaCO33-7g，加水定容至1000ml，pH pH自然； （2）培养条件一级摇瓶将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种，培养条件为以100-250mL/500mL装量，接入0.5-2cm2的斜面菌种，70-250rpm振荡培养5-10d，温度20-30；二级摇瓶将生产摇瓶一级种用体积比为5-20%的接种量，按上述一级摇瓶培养基和培养条件，再次扩大培养3-7天，得到生产摇瓶二级种；种子罐培养将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；培养条件为接种量5-15%（v/v），罐温20-30，罐压0.03-0.1MPa，搅拌速度50-200rpm，通气量1:0.2-1.0v/v.min，发酵培养3-7d；发酵罐培养按种子罐培养所述的发酵培养基和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵5-10天放罐，发酵醪经过滤，得到发酵液和新鲜的灰树花菌丝球。 0014所述果蔬汁为葡萄汁、苹果汁、橙汁、桃汁、山楂汁、梨汁、西瓜汁、甘蔗汁、草莓汁、杨梅汁、胡萝卜汁、黄瓜汁、番茄汁、白菜汁、芹菜汁中的一种或几种。 0015由上述制备方法得到的灰树花菌丝球制成各种灰树花菌丝球干品、饮料、果冻、口服液或胶囊产品，具体产品如下1灰树花菌丝球产品1.1灰树花菌丝球干品新鲜的灰树花菌丝球经热风干燥或冷冻干燥或微波干燥后得到灰树花菌丝球干品。 00161.2灰树花菌丝球悬浮饮料配方灰树花菌丝球干品（1种或几种）2-5%或新鲜的灰树花菌丝球（1种或几种）10-25%，柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等糖味剂，果蔬汁0-15%、发酵液0-10%（1种或几种）,加纯净水至100%。 0017生产工艺灰树花菌丝球干品（1种或几种）2-5%或新鲜的灰树花菌丝球（1种或几说明书102523920A43/7页5种）10-25%加1-3纯净水煮沸10-15分钟；然后加入柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等糖味剂，果蔬汁0-15%、发酵液0-10%（1种或几种）,加纯净水至100%，混合调配，用柠檬酸调pH值至3.2-4.0；将调配好的饮料趁热装瓶、封盖、杀菌，经检验合格后即为产品。 00181.3灰树花菌丝球果冻配方灰树花菌丝球干品（1种或几种）2-5%或新鲜的灰树花菌丝球（1种或几种）10-25%，果冻粉0.3-0.8%,柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等糖味剂，果蔬汁0-10%、发酵液0-10%（1种或几种）,加纯净水至100%。 0019生产工艺灰树花菌丝球干品（1种或几种）2-5%或新鲜的灰树花菌丝球（1种或几种）10-25%加1-3纯净水煮沸10-15分钟；然后加入果冻粉0.3-0.8%，搅拌溶解，继续加热3-5分钟；加入柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等糖味剂，果蔬汁0-15%、发酵液0-10%（1种或几种）,加纯净水至100%，搅拌均匀；将调配好的灰树花菌丝球果冻包装、杀菌，经检验合格后即为产品。 00201.4灰树花口服液、胶囊将灰树花菌丝球干品（1种或几种）或新鲜的灰树花菌丝球（1种或几种）加入2-5倍重量的水，置95-100水浴中提取0.5-1h，经板框压滤得提取液A和滤渣；将该滤渣再重复提取、过滤1-2次，得提取液B，合并发酵液、提取液A和提取液B，40-75，0.05-0.1MPa低温真空浓缩至可溶性固形物为3-10%，得浓缩液。 0021将所述浓缩液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入加入柠檬酸、苹果酸等酸味剂0.08%-0.15%，白砂糖3-9%、蜂蜜0-3%等,将调配好的口服液装瓶、杀菌，经检验合格后即为灰树花口服液产品。 0022将所述浓缩液喷雾干燥，得灰树花提取液干粉，采用现有技术制成灰树花胶囊。 0023为充分公开本发明的一种灰树花菌丝球的制备方法及其产品，下面结合实施例加以说明。 0024实施例11灰树花菌丝球的制备1.1将灰树花保存种用马铃薯培养基（PDA培养基）进行活化、复壮，置26恒温箱静止培养7天，得到生产斜面种，置冰箱中冷藏备用；所述的PDA培养基的配方为(g/L)去皮马铃薯200，葡萄糖15，琼脂20，加水定容至所需体积，pH自然；1.2将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种；所述的摇瓶培养基的配方为(/L)山楂汁50ml、胡萝卜汁50ml、白砂糖5g、KH2PO41g、MgSO47H2O2g、ZnSO47H2O0.1g，加水定容1000ml，pH自然；培养条件为以100mL/500mL装量，接入1cm2的斜面菌种，旋转式摇床250rpm培养5d，温度30；1.3将生产摇瓶一级种用5%的接种量，按步骤1.2所述的摇瓶培养基配方和培养条件，再次扩大培养3天，得生产摇瓶二级种；1.4将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；所述的发酵培养基配方为(/L)山楂汁50ml、胡萝卜汁50ml、白砂糖5g、KH2PO41g、MgSO47H2O2g、ZnSO47H2O0.1g、CaCO33g，加水定容至1000ml，pH自然；培养条件为接种量5%，罐温30，罐压0.1MPa，搅拌转速200rpm，通气量1:1v/v.min，发酵培养5d；说明书102523920A54/7页61.5按步骤1.4所述的发酵培养基配方和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵5天放罐，发酵醪经过滤，得到灰树花发酵液和新鲜的灰树花菌丝球。 00252灰树花菌丝球产品2.1灰树花菌丝球干品新鲜的灰树花菌丝球经热风干燥或冷冻干燥或微波干燥后得到灰树花菌丝球干品。 00262.2灰树花菌丝球悬浮饮料配方新鲜的灰树花菌丝球20%，柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖8%、胡萝卜汁5%、灰树花发酵液5%,加纯净水至100%。 0027生产工艺新鲜的灰树花菌丝球20%，加2倍纯净水煮沸10-15分钟；然后加入柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，砂糖8%、胡萝卜汁5%、灰树花发酵液5%,加纯净水至100%，混合调配，用柠檬酸调pH值至3.2-4.0；将调配好的灰树花菌丝球悬浮饮料趁热装瓶、封盖、杀菌，经检验合格后即为灰树花菌丝球悬浮饮料成品。 00282.3灰树花菌丝球果冻配方灰树花菌丝球干品3%，果冻粉0.5%,柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖6%、蜂蜜0.5%，胡萝卜汁5%、灰树花发酵液5%,加纯净水至100%。 0029生产工艺灰树花菌丝球干品3%加3倍纯净水煮沸15分钟；然后加入果冻粉0.5%，搅拌溶解，继续加热5分钟；加入柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖6%、蜂蜜0.5%，胡萝卜汁5%、灰树花发酵液5%,加纯净水至100%，搅拌均匀；将调配好的灰树花菌丝球果冻包装、杀菌，经检验合格后即为产品。 00302.4灰树花口服液、胶囊将新鲜的灰树花菌丝球加入2倍重量的水，置100水浴中提取0.5h，经板框压滤得提取液A和滤渣；将该滤渣再重复提取、过滤1次，得提取液B，合并发酵液、提取液A和提取液B，55，0.05-0.1MPa低温真空浓缩至可溶性固形物为10%，得浓缩液。 0031将所述浓缩液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖6%、蜂蜜0.5%等,将调配好的口服液装瓶、杀菌，经检验合格后即为灰树花口服液产品。 0032将所述浓缩液喷雾干燥，得灰树花提取液干粉，采用现有技术制成灰树花胶囊。 0033实施例21灰树花菌丝球的制备1.1将灰树花保存种用马铃薯培养基（PDA培养基）进行活化、复壮，置28恒温箱静止培养7天，得到生产斜面种，置冰箱中冷藏备用；所述的PDA培养基的配方为(g/L)去皮马铃薯250，葡萄糖15，琼脂15，加水定容至所需体积，pH自然；1.2将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种；所述的摇瓶培养基的配方为(/L)胡萝卜汁100ml、葡萄汁50ml、白砂糖5g、KH2PO42g、MgSO47H2O2g、ZnSO47H2O0.25g，加水定容1000ml，pH自然；培养条件为以250mL/500mL装量，接入1cm2的斜面菌种，旋转式摇床120rpm培养7d，温度28；1.3将生产摇瓶一级种用10%的接种量，按步骤1.2所述的摇瓶培养基配方和培养条件，再次扩大培养5天，得生产摇瓶二级种；说明书102523920A65/7页71.4将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；所述的发酵培养基配方为(/L)胡萝卜汁100ml、葡萄汁50ml、白砂糖5g、KH2PO42g、MgSO47H2O2g、ZnSO47H2O0.25g、CaCO33g，加水定容至所需体积，pH6.5；培养条件为接种量10%，罐温28，罐压0.05MPa，搅拌转速120rpm，通气量1:0.5v/v.min，发酵培养5d；1.5按步骤1.4所述的发酵培养基配方和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵7天放罐，发酵醪经过滤，得到灰树花发酵液和新鲜的灰树花菌丝球。 00342灰树花菌丝球产品2.1灰树花菌菌丝球干品新鲜的灰树花菌丝球经热风干燥或冷冻干燥或微波干燥后得到灰树花菌丝球干品。 00352.2灰树花菌丝球悬浮饮料配方新鲜的灰树花菌丝球20%，柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，白砂糖5%、蜂蜜1%，葡萄汁3%、灰树花发酵液6%,加纯净水至100%。 0036生产工艺新鲜的灰树花菌丝球20%，加2倍纯净水煮沸10-15分钟；然后加入柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，砂糖5%、蜂蜜1%，葡萄汁3%、灰树花发酵液6%,加纯净水至100%，混合调配，用柠檬酸调pH值至3.2-4.0；将调配好的灰树花菌丝球悬浮饮料趁热装瓶、封盖、杀菌，经检验合格后即为灰树花菌丝球悬浮饮料成品。 00372.3灰树花菌丝球果冻配方灰树花菌丝球干品3%，果冻粉0.5%,柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，白砂糖5%、蜂蜜1%，葡萄汁3%、灰树花发酵液6%,加纯净水至100%。 0038生产工艺灰树花菌丝球干品3%加3倍纯净水煮沸15分钟；然后加入果冻粉0.5%，搅拌溶解，继续加热5分钟；加入柠檬酸0.05%、苹果酸0.03%，白砂糖5%、蜂蜜1%，葡萄汁3%、灰树花发酵液6%,加纯净水至100%，搅拌均匀；将调配好的灰树花菌丝球果冻包装、杀菌，经检验合格后即为产品。 00392.4灰树花口服液、胶囊将新鲜的灰树花菌丝球加入2倍重量的水，置100水浴中提取0.5h，经板框压滤得提取液A和滤渣；将该滤渣再重复提取、过滤1次，得提取液B，合并发酵液、提取液A和提取液B，55，0.1MPa低温真空浓缩至可溶性固形物为10%，得浓缩液。 0040将所述浓缩液煮沸，离心去除其中的不溶物质后，按重量比加入柠檬酸0.06%、苹果酸0.02%，白砂糖5%、蜂蜜1%等,将调配好的口服液装瓶、杀菌，经检验合格后即为灰树花口服液产品。 0041将所述浓缩液喷雾干燥，得灰树花提取液干粉，采用现有技术制成灰树花胶囊。 0042实施例31灰树花菌丝球的制备1.1将灰树花保存种用马铃薯培养基（PDA培养基）进行活化、复壮，置30恒温箱静止培养7天，得到生产斜面种，置冰箱中冷藏备用；所述的PDA培养基的配方为(g/L)去皮马铃薯150，葡萄糖20，琼脂15，加水定容至所需体积，pH自然；1.2将生产斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养，得到生产摇瓶一级种；所述的摇瓶培说明书102523920A76/7页8养基的配方为(/L)苹果汁50ml、白砂糖10g、KH2PO45g、MgSO47H2O5g、ZnSO47H2O0.5g，加水定容1000ml，pH自然；培养条件为以250mL/500mL装量，接入1cm2的斜面菌种，旋转式摇床70rpm培养10d，温度20；1.3将生产摇瓶一级种用10%的接种量，按步骤1.2所述的摇瓶培养基配方和培养条件，再次扩大培养7天，得生产摇瓶二级种；1.4将生产摇瓶二级种转接入装有发酵培养基的种子罐进行扩大培养得到发酵一级种；所述的发酵培养基配方为(/L)苹果汁50ml、KH2PO45g、MgSO47H2O5g、ZnSO47H2O0.5g、CaCO35g，加水定容至所需体积，pH自然；培养条件为接种量15%，罐温20，罐压0.03MPa，搅拌转速50rpm，通气量1:0.2v/v.min，发酵培养7d；1.5按步骤1.4所述的发酵培养基配方和培养条件，将发酵一级种转接入装有发酵培养基的发酵罐培养，发酵10天放罐，发酵醪经过滤，得到灰树花发酵液和新鲜的灰树花菌丝球。 00432灰树花菌丝球产品2.1灰树花菌丝球干品新鲜的灰树花菌丝球经热风干燥或冷冻干燥或微波干燥后得到灰树花菌丝球干品。 00442.2灰树花菌丝球悬