江苏省启东市高中生物专题5多聚酶链式反应扩增DNA片段第1课时多聚酶链式反应扩增DNA片段实验练习.docx

实验多聚酶链式反应扩增DNA片段1 下列有关PCR技术的说法，错误的是：ADNA复制所需要的引物的作用是使DNA聚合酶能从3端延伸DNA链B引物与DNA母链的关系是碱基互补配对C添加缓冲溶液的作用是维持pH基本不变DDNA聚合酶可以用来合成引物2 在实验室内模拟生物体内的DNA复制，需要哪些条件（）酶游离的脱氧核苷酸ATPDNA分子引物tRNA适宜的温度适宜的酸碱度A BC D3 在PCR的实验操作中，下列说法正确的是（）在微量离心管中添加各种试剂时，只需要一个枪头离心管的盖子一定要盖严用手指轻弹离心管壁离心的目的是使反应液集中在离心管的底部A BC D4 在PCR实验操作中，下列说法不正确的是（）A在微量离心管中添加各种试剂时，只需一个枪头B离心管的盖子一定要盖严，防止液体外溢C用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合D离心的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果5 PCR技术扩增DNA，需要的条件是（）目的基因引物四种脱氧核苷酸DNA聚合酶等mRNA核糖体A BC D6 下列对操作过程的叙述，错误的是（）APCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌BPCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在20 储存CPCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化D在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换7 PCR技术是在遗传实验室中常见的一种DNA片段进行体外扩增的方法，利用它能快速得到大量的目的基因或DNA分子片段。在PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是（）A反复洗涤 B不被外源DNA污染C高压灭菌 D在20保存8 回答下列关于DNA复制与PCR技术的相关问题：(1)PCR与生物体内的DNA复制有何区别？_。(2)PCR每次循环都可分为_、_和_三步。(3)_ _的发现和使用大大提高了PCR的效率，使PCR技术趋向_。(4)PCR通过控制_来控制双链的_与_。(5)PCR反应需要一定的缓冲溶液中提供_、分别与两条模板结合的_、_种脱氧核苷酸、_的DNA聚合酶。(6)从第二轮循环开始，DNA聚合酶只能特异的复制_的DNA序列，使这段_的序列呈指数扩增。9 使用PCR仪具体实验操作顺序应为（）设计好PCR仪的循环程序按配方准备好各组分用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分进行PCR反应离心使反应液集中在离心管底部A BC D10 PCR实验中使用的微量离心管、吸头、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是()A反复洗涤 B外源DNA污染C高压蒸汽灭菌 D在20 储存参考答案：1 答案： D解析： 2 答案： D解析： 在实验室内模拟DNA复制时，需要DNA聚合酶催化合成DNA子链；四种脱氧核苷酸为合成子链的原料；DNA母链为DNA复制的模板；还需要引物、较高的温度、适宜的酸碱度等。3 答案： C解析： 在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换，以确保实验的准确性；盖严离心管口的盖子，防止实验中外源DNA污染；用手指轻轻弹击管的侧壁，使反应液混合均匀；离心目的是使反应液集中在离心管的底部，提高反应效果。4 答案： A解析： 在微量离心管中添加各种试剂时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头必须更换，确保实验的准确性；离心管的盖子一定要盖严，防止实验中脱落或液体外溢；离心10 s的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果。5 答案： C解析： PCR技术需要目的基因作为扩增的模板，DNA聚合酶催化反应的进行，而引物是满足DNA聚合酶起作用的需要，四种脱氧核苷酸是该过程的原料。6 答案： C解析： 为了防止外源DNA等因素的污染，PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌；所用的缓冲液及酶应分装成小份保存，并使用一次性吸液枪头，即A、B、D均正确。在冰箱中放置的缓冲液和酶取出后应放在冰块上缓慢融化，而不能迅速融化，故C错误。7 答案： C解析： 通过对PCR实验中所用仪器和试剂进行高压灭菌，可以避免外源DNA等因素的污染。8 答案： (1)PCR反应不需要解旋酶，而生物体内DNA复制时需要解旋酶；PCR需要耐热的DNA聚合酶，而生物体内DNA聚合酶在高温的时候会变性；PCR一般要经历三十多次循环，而生物体内DNA复制需要生物体自身的控制(2)变性退火延伸(3)Taq聚合酶自动化(4)温度解聚结合(5)DNA模板两种引物四耐热(6)处于两个引物之间固定长度解析： 本题主要考查关于DNA复制与PCR技术的知识，尤其对PCR技术的考查较细致，可参考。9 答案： C解析： PCR反应的操作步骤一般分为准备(包括配置配方及将各配方