常用培养基配方.doc

1营养肉汤$ b0 S1 V# . g* S: 6 I w4 V5 i9 c|# r9 b+ p! o成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。$ I- s- H) D2 Y! o: s8 W: e! r0 y( P4 m+ P& d! U+ P7 q& t制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121高压灭菌15min。8 n$ v8 ?% - 3 W% 2 s7 . _1 s3 m8 v; u1 O2 N 8 w2营养琼脂培养基4 1 o( S. T2 h( D, a1 i1 _& . E7 |Z+ c7 B1 E成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH7.2。n6 A/ * f8 p9 E- N+ 8 s. w/ s* J# z$ C4 x* W0 d 制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121，15min高压灭菌备用。4 : a. K4 A3 y( e4 : v5 D+ # 8 g0 L# H q0 3MRS培养基2 p4 J2 N, R9 U8 # & V2 I8 F$ d( K+ O成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，（琼脂1520g），蒸馏水1000mL。9 x! b4 xE; W( c; q( S+ V$ c: EL9 M7 x2 b2 a* B, h制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.26.4，分装于三角瓶中，121,灭菌15min。! + j1 g0 8 9 s/ G4 P7 o* s# y0 E* * h9 r7 H5 f8 ZV0 c5 e4脱脂乳培养基+ ( ! d1 f7 o1 c! 3 T5 Z) t4 N& e. J; q! g6 q成分：牛奶，蒸馏水。9 f8 Z9 Y9 I+ X0 d! p: 6 F) A- - M9 ?0 z Y5 _制法：将适量的牛奶加热煮沸2030min，过夜冷却，脂肪即可上浮。除去上层乳脂即得脱脂乳。将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108条件下蒸汽灭菌1015min，即得脱脂乳培养基。9 X0 rd- f7 Q2 7 j# % P7 p6 q7 F w: 3 b T5培养基A! 4 F% X$ T8 Z1 J* c: n3 y3 V* # C+ s成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，琼脂15.0g，水1000mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至7.07.2，分装于三角瓶中，121，灭菌15min。5 / S7 q4 ( c+ Z# |# R- g7 k$ _) W8 _6PTYG培养基3 O5 V/ t: N! s! ! W, J! W1 h& X/ z; 9 W0 + I成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂1520g，L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。2 w g$ B; : F1 O+ a) w& 5 v6 V8 a9 x R7 c制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.87.0，分装于三角瓶中，115灭菌30min。) M: O g1 m( w+ _/ M6 X# 9 W, _3 z7 |盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。7H2O 0.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。% J, I6 L. m% W! & Q( m1 c- Y. K. a3 s X7豆芽汁液体培养基& # A9 G, ) X% * G$ & A8 . m% j) J成分：豆芽汁10mL，磷酸氢二铵1g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，琼脂20g。! B1 Z4 g1 H6 V5 Z8 U+ N1 o) ; n2 Y N! b7 C1 T$ E$ e; r& g4 W制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.26.4，分装于三角瓶中，0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黄色5.26.8紫色）作为指示剂，115灭菌20min。( F0 I( l. N- n5 g : X8 h( _& i. I; a豆芽汁制备：将黄豆芽或绿豆芽200g洗净，在1000mL中煮沸30 min，纱布过滤得豆芽汁、补足水分至1000mL。: f, J1 & D1 _/ b0 Y, e9 N- l J/ U( E8 N e lJ, I1 j8麦芽汁琼脂培养基. u7 X# x5 D4 C, z) I) z/ V: - H/ s% X, N6 L1 A# k成分：优质大麦或小麦，蒸馏水，碘液。, n1 D: q0 A7 N7 S7 X1 6 i) M3 a& ?) m4 H; w制法：取优质大麦或小麦若干，浸泡612h，置于深约2cm的木盘上摊平，上盖纱布，每日早、中、晚各淋水一次，麦根伸长至麦粒两倍时，停止发芽晾干或烘干。/ r+ * h* ! L# S( w, ?- q2 rA1 b( I, I/ Z称取300g麦芽磨碎，加1000mL水，38保温2h，再升温至45，30min，再提高到50，30min，再升至60，糖化11.5h。% w6 z; F( f# K z, ; , j5 M. s+ Q/ Q( b2 F5 X% V1 E0 . s取糖化液少许，加碘液12滴，如不为蓝色，说明糖化完毕，用文火煮半小时，四层纱布过滤。如滤液不清，可用一个鸡蛋清加水约20mL调匀，打至起沫，倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤，即可得澄清麦芽汁。用波美计检测糖化液浓度，加水稀释至10倍，调pH56，用于酵母菌培养；稀释至56倍，调pH7.2，可用于培养细菌，121灭菌20min。6 d) F- u7 W1 b7 R$ ( aj4 x2 z) w9查（察）氏培养基3 Z4 B% g9 p$ w- / g1 F; _5 o% U( O; w成分：NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4. 7H2O 0.5g，KCL 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，蔗糖30g，琼脂1520g，蒸馏水1000mL，pH值自然。! k/ ? r, iB0 ! F$ M1 A/ k+ P! w h8 D * F制法：加热溶解，分装后121灭菌20min。0 M0 |9 & n) - B V0 4 y! 2 L; W$ r v. j10马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）5 a9 G 0 l/ G9 a0 Y0 L& m% E. A, aa: f+ f& Q成分：马铃薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂20g，水1000mL。7 d# H3 o! H! k7 f5 b/ F& s1 J3 T+ z* s制法：pH值自然。将马铃薯去皮、洗净、切成小块，称取200g加入1000mL蒸馏水，煮沸20min，用纱布过滤，滤液补足水至1000mL，再加入糖和琼脂，溶化后分装，121灭菌20min。另外，用少量乙醇溶解0.1g氯霉素，加入1000mL培养基中，分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离。; j2 ; F; a0 B6 j$ J0 h2 m z$ G$ c4 v; d& t11PY基础培养基! V- O- P- C) I6 * K! f6 F( r3 : T* s8 j成分：蛋白胨0.5g，酵母提取物1.0g，胰酶解酪胨 (Trypticase) 0.5g，盐溶液 4.0mL，蒸馏水1000mL。0 p+ G* z* D8 t; T 1 X3 h$ t G 3 F+ X+ Y盐溶液成分：CaCL2 0.2g，MgSO4.7H2O 0.48g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，NaHCO3 10.0g，NaCL 2.0g，蒸馏水1000mL。3 B3 Q# Wp; ?8 V9 * : J5 w( 8 T6 Z7 |2 n4 T制法：加热溶解，分装后121灭菌20min。3 n$ x_, 3 X* K q/ t D T12甘露醇琼脂培养基（MSA）1 i! ?- X5 M3 : Z# Z# P q3 q0 5 l8 & 成分：牛肉浸膏1g，月示胨NO.3（Difco）10g，D-甘露醇10g，NaCL 75g，琼脂约13g，酚红0.025g，水1000mL，pH7.27.6! w! y. l4 c8 p4 E X% B% K( D3 Z9 j- R8 F5 C, 制法：按量将各成分（酚红除外）混合，加热使完全溶解，调pH至7.40.2。加1%的酚红溶液2.5mL，混匀。121高压灭菌15min( # Kp$ X4 o& N# d. S- H8 Y( H; m) S q6 n R13高氏一号（淀粉琼脂）培养基（主用于放线菌、霉菌培养）5 5 n5 6 J% q. , j: e+ G5 g& u& S2 _R! l可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCL 0.5g，K2HPO4 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，121灭菌20min。, rW! o0 g$ Q$ C# N4 n, A! m* N0 a+ g2 s7 o. T+ g14淀粉铵盐培养基 （主要用于霉菌、放线菌培养）. Co4 W- V! e3 l6 c* j6 1 c3 L4 z可溶性淀粉10g，（NH4）2SO4 2g，K2HPO4 lg，MgSO4.H2O lg，NaCL 1g，CaCO3 3g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，121灭菌20min。若加入1520g琼脂即成固体培养基。8 H, C_4 P/ e. H6 e4 J4 O# I( |7 Bz/ ?7 h15麦氏培养基（醋酸钠琼脂培养基）9 p3 m l- s; p1 c( G/ w, ; P! |% N+ e葡萄糖1.0g，KCL 1.8g，酵母汁2.5g，醋酸钠8.2g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，pH自然，0.7kg/cm2灭菌30min。/ z# G8 n n9 V4 C# c/ T. u/ Y! v& 16高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用) y C4 B- : 4 B x5 d# f2 d# c( S硝酸钠2g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁（MgSO4 7H2O）0.5g，氯化钾 0.5g，硫酸亚铁0.01g，氯化钠60g，蔗糖30g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，115灭菌30min。4 g% q( D, K$ 2 a3 A: f$ S b5 g注：分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基。分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基。& N1 # l u A2 n& V g H2 X0 H. D4 ; J& c& h# i17糖、醇类发酵基础培养基0 u# b% l; : ?& AI P0 Q C6 N（1）一般细菌常以休和利夫森二氏培养基: b; d! p1 C- ?% 2 5 ( ?( Y/ X4 y |蛋白胨5g，NaCL 5g，K2HPO4 0.2g，糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g，琼脂56g，1溴甲酚紫（溴百里香草酚蓝）3mL，蒸馏水1000mL，pH7.07.2，分装试管，培养基高度约4.5cm，115灭菌20min。( r0 O0 ?) o% K: l5 p+ K- d3 d6 r2 3 H; x! Z0 e（2）芽孢菌培养基9 ( y1 x0 7 5 X; m( ?+ F$ o/ B v7 U) 2 h(NH4)2HPO4 1.0g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，酵母膏0.2g，琼脂56g，糖或醇类10.0g，蒸馏水1000mL，溴甲酚紫（0.04）15mL，pH7.07.2，分装试管，培养基高度约45cm，112灭菌30min。6 Q7 b( B/ X& K ( U9 |% y0 P- I* N- u5 , B! i（3）乳酸菌培养基* i. S+ m0 z! x4 3 - r. 5 v) f% K4 l. L$ b% d7 # m/ ?蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母膏5g，吐温80（Tween 80）0.5mL，糖或醇10g，琼脂56 g，蒸馏水（自来水）1000mL，加入1.6溴甲酚紫溶液约1.4mL。以上调pH6.87.0，分装试管，112灭菌30min。( t U* z3 q! f/ # k* K$ q- |6 _: y, ! 9 Y18硝酸盐培养基（硝酸盐还原试验用）0 B3 Z f7 q/ , s3 ?. T. W E, |0 R, Z/ o* u) W蛋白胨5.0g，KNO3 0.2g, 蒸馏水1000 mL，pH7.4，每管分装45mL，121灭菌1520min。+ F2 N1 X4 c* P8 W$ I M c. m* k: C v r, J吲哚实验培养基：1胰蛋白胨，调pH7.27.6，分装1/31/4试管，115灭菌30min。; Q( NA* w7 y4 b5 eA7 h; 5 U, / 7 o8 y2 Y19硫化氢试验（纸条法）培养基, c: R- a- d9 v R- y2 Q( D1 s9 S2 C: Z5 A蛋白胨10g，NaCL 5g，牛肉膏10g，半胱氨酸0.5g，蒸馏水1000mL，pH7.07.4，分装试管，每管液层高度45cm，112灭菌2030min。另外将普通滤纸剪成0.51cm宽的纸条，长度根据试管与培养基高度而定。用510的醋酸铅将纸条浸透，然后用烘箱烘干，放于培养皿中灭菌备用。. Y) r: S* & n5 j) h$ p/ l! F+ l$ : N& s( S1 k, - 20尿素培养基(尿酶试验)8 h+ I: u1 S- 8 o2 e% S, W8 C/ R7 k- r; e( e0 h4 o& + G成分：蛋白胨1.0g，葡萄糖1.0g，NaCL 5.0g，KH2PO4 2.0 g，0.4酚红3.0mL，琼脂20.0g，20尿素100.0mL，pH7.17.4。/ u: a+ c; I3 s1 n?: u! S i* F _6 U% O% P( y制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH值，加入琼脂，加热熔化并分装于三角瓶，121灭菌15min，冷却至5055，加入过滤除菌的尿素溶液，分装于灭菌试管内，摆成琼脂斜面备用。: r$ e& _1 Z7 t6 P1 t, U% Y/ R6 A4 S) c2 . # B# + x6 f. g21氮源利用基础培养基3 j0 Q3 d2 A9 Z- R& B. 2 a, _0 L1 O/ V ?# A% KH2PO4 1.36g，NaH2PO4 2.13g，MgSO4 7H2O 0.2g，FeSO4.7H2O 0.2g，CaCL2 0.5g，葡萄糖10.0g，蒸馏水1000mL。% R. f1 H+ / h( J) / G* g- U9 g3 O+ F( _5 x9 J; i将需要测定的氨基酸、氨态氮（如磷酸氢二氨）、硝态氮（如硝酸钾）加入到上述基础培养基中，使其终浓度为0.050.1，如测定菌不能利用葡萄糖为碳源，可用其它碳源代替（终浓度为0.20.5），另做一份不加氮源的空白对照，调pH7.07.2，分装于试管，每管45mL，112灭菌2030min，制备出的培养基要求无沉淀。 P% R2 A: M& s: I4 M O3 M( M& e4 m( s9 ?5 h( c22甲基红培养基（M.R及V-P试验用）Y$ K Q, C$ a, 3 Y K- ( b+ aG/ r- V& a6 / Q: ?% E9 J蛋白胨7.0g，葡萄糖5.0g，K2HPO4（或NaCL）5g，水1000mL，pH7.07.2，每管分装45mL，115灭菌30min。4 I, q9 s2 s8 Z, hp7 f$ L3 A4 V% l6 E! p23动力、靛基质、尿素（MIU）综合培养基 （用于检验细菌运动性、吲哚、尿素酶用）X/ t* O- O G1 G5 D1 po, v/ g7 xW0 j8 g, 1 H蛋白胨（含色氨酸）30 g，KH2PO4 2g、NaCL 5g、琼脂3 g、0.2%酚红酒精溶液2mL、尿素20g、蒸馏水1000mL。分装于小试管，112灭菌15min，灭菌后液体应呈淡黄色。 ! z% Y6 t) 4 4 b+ F; V$ i4 M6 1 E& D4 a24半固体培养基（用于细菌的动力试验）p- J% C- J0 ( . P p$ ( i; Z S! Y& I; P( N2 L牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，琼脂35g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，熔化后分装试管（8mL）121灭菌15min，取出直立试管待凝固。6 s; r0 H5 e9 _! U) a1 u0 h4 Q) i# x; N7 o; H25M17琼脂培养基（分离、培养乳球菌等的选择培养基）& g+ L/ T% e- g6 G z- c/ D) l. u! 8 n植物蛋白胨5g，酵母粉5g，聚蛋白胨5g，抗坏血酸0.5g，牛肉膏2.5g，MgSO4 7H2O 0.01g，ß-甘油磷酸二钠19g，蒸馏水1000mL，121灭菌15min。3 d2 & a0 - . n1 B/ b( D$ a! t! m; 26蛋白胨水溶液（靛基质试验用）9 ?, 1 x- C9 ) ! u6 x) ; D3 z+ G& N$ : |/ A! R蛋白胨20.0g，NaCL 5.0g，蒸馏水1000mL，pH7.4，121灭菌15min。9 z0 _+ D e# u8 k! 6 d% 9 1 B7 b1 Q0 : u7 U27精氨酸双水解酶实验培养基9 z9 n6 j5 S5 W, n8 + f1 Y+ / N 9 X7 n成分：蛋白胨1g，氯化钠5g，K2HPO4 0.3g，L-精氨酸10g，琼脂10g，酚红0.01g，蒸馏水1000mL。6 k. r1 R0 R5 _3 N% ) d2 J; r1 O7 j0 f7 P o制法：除酚红外，将以上各成分溶解，调节pH7.07.2，加入指示剂，分装试管，培养基高约45cm，121灭菌20min备用。 p: M$ i% q7 t/ q% Vi2 R+ h( r1 g28葡萄糖氧化发酵培养基. U0 * F7 x. I; V B+ k& t4 a% j5 V: f0 h+ ) G0 _成分：蛋白胨2g，氯化钠5g，1溴百里酚蓝水溶液3mL，琼脂56g，K2HPO4 0.2g，葡萄糖1，蒸馏水1000mL。( W2 X! c3 . z2 M9 & j C3 Q2 E9 n1 $ N; t制法：除溴百里酚蓝外，溶解以上各成分，调节pH值为6.87.0，分装试管，用115灭菌20min备用。4 U9 Y4 i1 ! S& Q- q8 U: s, L g2 f) c3 & F2 L29假单胞菌选择培养基（PSA）: y O% _) a x# O; f! R6 _; $ I% f, L7 C4 c/ m O) I基础成分：多价胨16g，水解酪蛋白10g，硫酸钾10g，氯化镁1.4g，琼脂11g，甘油10mL，蒸馏水1000mL，pH7.10.2。4 yq$ h/ I# P, B- Pl/ y. N: w! ) aCFC选择添加物：溴化十六烷基三甲胺10mg/L，梭链孢酸钠10mg/L，头孢菌素50mg/L。, c, 3 * X# o9 g7 k V: q ?. P: U Y制法：先将基础成分加热煮沸使之完全溶解，121，15min条件下灭菌。冷却到50备用。当基础培养基冷却到50后加入溶解后过滤除菌的CFC补充物，完全混合后倒平板备用。& |) E/ g& C0 V: - a. Y, z & Sj! ? B30乳糖胆盐发酵培养基7 r8 y8 o% + D- Y; p% U y3 W% M. WE成分：蛋白胨20g，猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。& pv9 d9 H/ G! T! ( Q% Y$ G8 b7 D/ s; r; H o3 I0 Q制法：将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10mL，并放入一个小倒管，115，15min高压灭菌.- G& K$ u6 Xh& L* z# o. t% u: t6 A d0 k; B! a注：双料乳糖胆盐培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。* G u, _* R- y$ A8 F2 K Q- H1 H9 z; H X, Z31伊红美兰琼脂培养基% N- p2 w: V+ m. Ko: O# & _5 h. RU成分：蛋白胨20g，乳糖10g，磷酸氢二钾2g，琼脂17g，2%伊红Y溶液20mL，0.65%美兰溶液10mL，蒸馏水1000mL，pH7.1。1 _5 w v# v- e L* C# * e4 c4 U; Z- B制法：将蛋白胨、磷酸氢二钾和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH，分装于烧瓶内，高压灭菌121，15min备用。- O2 h0 n1 / 7 M3 |$ N( 0 M8 s- H临用时，加入乳糖，并加热溶化琼脂，冷至5055，加入伊红和美兰溶液，摇匀，倾注平板。% 8 P3 L, S) M! m% h7 O1 o$ y. g! ( s3 32乳糖发酵培养基9 A$ _ v+ m+ x3 6 H& j6 T. u8 J; B9 4 0 P A% H成分：蛋白胨20g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。( r/ Q) n. i% q6 _: K& h. 0 b% o1 X6 * h7 g6 a% N制法：将蛋白胨、乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，按检验要求分装30mL、10mL或3mL，并放入一个小倒管，115，15min高压灭菌。3 D5 0 S. f4 i3 m. R8 kD- P4 c+ hX / 4 K+ q33胰酪胨大豆肉汤- E( R- J w* H: I& L9 S; e5 s h- m+ i r! g$ h: Js; R3 A成分：胰酪胨（或胰蛋白胨）17g，植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g，氯化钠100g，磷酸氢二钾2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000mL。% o+ y0 E, C# _( U, E0 S# y% O t- 6 e3 S/ Z- 制法：将上述成分混合，加热并轻轻搅拌溶液，分装后12115min高压灭菌。最终pH7.30.2。1 l! l; Y% l/ T% - M F! w: o; i3 T/ G* n347.5%氯化钠肉汤7 N# O0 y2 E2 A! S+ H3 M4 Z U# W9 U: Y+ G3 ?; Y0 : 6 R成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠75g，蒸馏水1000mL，pH7.4。8 o1 n i9 m7 x; Z5 v. R# W% k制法：将上述成分加热溶解，校正pH，分装试管，12115min高压灭菌。+ G& W. M. p1 C8 Z+ ?: 7 GV+ P- m! O7 g+ ID0 35豆粉琼脂# J/ J( Z# O% r$ d6 $ c& k3 G$ CV0 b5 n0 L2 M/ U成分：牛心消化汤1000mL，琼脂20g，黄豆粉浸液50mL，pH 7.47.6。! S! q+ w+ e+ |5 H o/ p* D1 b: ) E) h% f/ C2 M制法：将琼脂加在牛心消化汤中，加热溶解，过滤。加入黄豆粉浸液，分装每瓶100mL，12115min高压灭菌。5 a8 b2 i2 J9 - V: b& t1 i; B( p8 s( m8 u, x/ L3 k 3 q, 36血琼脂平板4 O I; 3 B) q/ L F! T7 v5 v5 v5 d y l7 r0 Y. v成分：豆粉琼脂100mL，脱纤维羊血（或兔血）510mL。5 w) C+ J) cA8 : I. X& q9 f1 I P& 0 制法：加热融化琼脂，冷至50，以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血，摇匀，倾注平板。或分装灭菌试管，摆成斜面。6 _% a0 B9 v! 0 c3 ) t* f0 S$ U, v$ 37aird-Parker氏琼脂平板8 L9 D) S; M! 9 D0 W/ u3 3 + _7 - R+ h成分：胰蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏1g，丙酮酸钠10g，甘氨酸12g，氯化锂（LiCL6H2O）5g，琼脂20g，蒸馏水950mL，pH7.5。! s2 l! S* R2 i/ ?, f# c# U- Y0 a& ?7 H% Z7 T) c$ w- V4 增菌剂的配法：3050%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合，保存在冰箱内。, Q# w+ y3 X3 |8 K7 f6 w0 p u$ b# i, p, V! L9 x制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解。冷至25，矫正pH。分装每瓶95mL，121高压灭菌15min。临用时，加热融化琼脂，冷至50，每95mL加入预热至50的卵黄-亚碲酸钾增菌剂5mL，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。4 ! U9 o4 z3 - 1 n6 b$ s1 Q2 I, u+ ?/ P! v38肉浸液 v# f E% P8 6 z+ v o8 n: w x成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000mL，pH 7.47.6。2 W. v3 d* d/ U) _) N. x: v0 Z# 7 & 4 z2 _制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后矫正pH7.47.6煮沸并过滤，分装烧瓶，121，30min高压灭菌。0 m; B9 c0 S* r W& r# l5 Z3 z5 Gv! n; M6 u39兔血浆+ I! L|, a/ S! C; 5 g A7 R7 S1 ?. S2 v) t l成分：柠檬酸钠0.106 mol/L（31.3g Na3C6H5O72H2O溶于1L蒸馏水中） M* C4 b- y$ r1 r, 0 h% X! U6 R) p3 u4 % 制法：一份加兔血9份混合后离心2000rpm，10min吸取上清液即为兔血浆。; 3 L) y6 m N/ C! 9 C6 J2 a& J2 D* E, v* _/ X/ : d) - B 40肠毒素产毒培养基& w) / u/ r7 d4 L6 H- * Q& 成分：蛋白胨20g，胰消化酪蛋白200mg，氯化钠5g，磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，硫酸镁0.2g，菸酸0.01g，蒸馏水1000mL，琼脂1012g（固体透析培养用），pH7.27.4。1 j |, J0 Y. Q( L* cm6 * 0 + O6 g, P& Q8 q2 D2 B4 T% S- F41葡萄糖肉浸液肉汤. 6 G6 , |, ) j- a5 n0 y5 e1 U7 |! o成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，葡萄糖10g，蒸馏水1000mL，pH7.47.6。7 . D& x4 E3 U9 a, y: t3 n: A) K& E: K- |制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、葡萄，氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH，煮沸并过滤、分装，12130min高压灭菌。7 / f. O/ C6 K( A9 B) e7 y9 wj9 i# U! U: C8 |42牛心浸液# H0 P4 S8 N; z Mv1 $ U5 D/ q& r& b( ! a8 A+ x成分：绞碎牛心500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000mL，pH7.47.6。/ F- $ K& o$ k! I?4 ND2 S9 V( g, 制法：将绞碎牛心500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH，煮沸并过滤、分装，121，30min高压灭菌。) g, V# Z: o% 3 P( 5 F% O- h7 V) B43匹克氏肉汤 t0 G, V3 , L, S. D0 a/ A9 J: k9 f1 H成分：含1%胰蛋白胨的牛心浸液200mL，1：25000结晶紫盐水溶液10mL，1：800三氮化钠溶液10mL，脱纤维兔血（羊血）10mL。. K$ K* 0 A 9 $ r- P ! 5 u/ ?; m/ Yx制法：将上述已灭菌的各种成分，无菌依次混合，分装于无菌试管内，每管2mL，保存冰箱内备用。* Y$ e, R# C% T0 f$ X Z x: d# t1 5 I44胰蛋白胨大豆胨琼脂（TSA）2 0 y6 d |3 9 X* o2 P G) e7 c/ j0 O4 N8 $ p3 ?成分：胰蛋白胨15g，大豆胨5g，氯化钠5g，琼脂约13g，蒸馏水1000mL，pH7.17.5。3 % 6 F& L t1 g+ s: n. W5 R1 t4 Z制法：按量将各成分溶解，加热使完全溶解，调pH值，121，15min灭菌。4 j) x+ 0 2 c# t0 7 r7 r: 8 45缓冲蛋白胨水(BP)培养基/ t* t* j# b4 L- x( C. U: Y$ D9 ?* ( h- O1 L1 M6 s5 成分：蛋白胨l0g，NaCL5g，Na2HPO4.12H20 9g，H2PO4 1.5g，蒸馏水1000mL，pH7.2。) U V! # O- |c! , S1 Q9 T2 b1 A0 u1 G/ qP4 g/ d$ V制法：121灭菌15min，沙门氏菌前增菌使用。+ t7 6 Y* K% / m& B9 a3 Z: I4 G j/ B: o5 8 l& X46氯化镁孔雀绿(MM)增菌液 & w3 G7 S5 m) N2 Z0 V* ! l. i% v2 J( b. O* G& T成分：6 ?3 ; B% U) E7 T1 e, q# g. g- - t9 r0 Y甲液：胰蛋白胨5g，NaCL 8g，KH2P04 1.6g，蒸馏水1000m12 o6 T: D7 T1 d- m9 O# q: R# s* a5 C8 E- | |乙液：MgCL2 40g，蒸馏水100mL! W& 5 Q# J. T! o& V3 g1 N9 P2 R7 |* T z/ R, Y$ k # G丙液：0.4孔雀绿水溶液9 S) Y1 H. ?$ d: n4 d% i6 o7 y& R1 q5 w3 O& t. + 制法：分别按上述成分配好后，121灭菌15min备用。临用时取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL以无菌操作混合即成。4 . 4 u/ q# r. N/ Y6 L, P/ U0 h4 I1 O. X5 o$ t3 i- m( E47四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液7 I+ L7 % , v, 4 o& c# ?9 R4 U. a- p V3 成分：多胨或胨1g，CaCO3 10g，Na2S203 30g，蒸馏水1000m1。$ H# P1 e3 b! X4 X3 M% V+ l; 6 J# p( s: S/ |; s; G制法：将各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100m1。分装时应随时振荡，使其中的CaCO3混匀。121灭菌15min备用。临用时每100m1培养基中加入碘溶液2m1、0.1煌绿1m1。7 8 W* _ l8 o _1 S* N; z: y7 ! X) |) O- s+ V2 c48亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液 X# ) S4 A$ W1 Y& p# i$ o $ B/ ( M! e: b- W成分：蛋白胨5g，乳糖4g，亚硒酸氢钠4g，Na2HPO4 5.5g，KH2PO4 4.5g，L胱氨酸0.01g，蒸馏水1000m1，pH7.0。/ H& W9 d# P( u( O3 E3 t H* b( % K# D7 制法：将除亚硒酸氢钠和胱氨酸以外的各种成分溶解于900mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却，以无菌操作与上液混合。再加入1L-胱氨酸氢氧化钠溶液1m1。分装于灭菌瓶中，每瓶l00mL。: g1 c7 3 r7 ! X9 B1 S- U8 C: H2 P, K5 c/ B49亚硫酸铋琼脂(BS)培养基) X/ z, U- Y# g* s5 K# ! N. 0 L. 6 h成分：蛋白胨10g，牛肉膏5g，葡萄糖5g，FeSO4 0.3g，Na2HPO4 4g，煌绿0.025g，柠檬酸铋铵2g，Na2SO4 6g，琼脂20g， 蒸馏水1000mL，pH7.5。2 x7 v0 T$ z+ 4 ( u- V- W$ J% G# i9 7 Q制法：将前5种成分溶解于300mL蒸馏水中，再将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50m1蒸馏水溶解。将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，冷至80左右。将以上三液合并，补充蒸馏水至1000m1，校正pH，加0.5煌绿水溶液5mL ；摇匀。冷却至5055，倾注平板。; z: U) l8 J# 2 O; F& M7 M3 f9 9 X/ b注：此培养基不需高压灭菌。制备过程中不宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前一天制备，贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。- h- d) P0 o$ L1 L9 k$ |& r& s/ |& J0 F$ V& K5 f6 2 D# P9 b; o9 s50DHL琼脂培养基: _, 7 v. V; R- d( * - R- M6 x5 U7 h$ 成份：蛋白胨20g，牛肉膏3g，乳糖10g，蔗糖10g，去氧胆酸钠1g，Na2S203 2.3g，柠檬酸钠1g，柠檬酸铁铵1g，中性红0.03g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7.3。; q . $ a) T! q3 ?& d1 f8 H# r Z. U, A6 Z( |6 d制法：除中性红和琼脂外，将其他成分溶解于400m1蒸馏水中，校正pH值。再将琼脂溶于600mL蒸馏水中，两液合并，加0.5中性红水溶液6mL，待冷至5055，倾注平板。* G* Z& r% k# T% - ! C! H! H/ V/ e$ L& m( C* r! I$ 0 L51HE琼脂培养基3 ?# _6 j$ F9 S |8 9 ?9 j$ B, N. g$ X7 l% 4 J: H8 ( 成份：月示 胨12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖g，水杨素2g，胆盐20g，NaCL 5g，琼脂20g，蒸馏水1000m1，0.4溴麝香草酚蓝溶液16mL，Andrade指示剂20mL，甲液20mL，乙液20m1。6 l0 ?* O! 9 z; O/ X b# D m. i( f4 W制法：将前七种成分溶解于400mL蒸馏水中。作为基础液，加入甲液和乙液，校正pH值为7.5，再加入指示剂；将琼脂溶于600m1蒸馏水中。二者合并，待冷至5055，倾注平板。$ rt/ s( v& L4 D b- x& b7 x4 fV注：此培养基不可高压灭菌；Andrade指示剂：酸性复红0.5g，1M NaOH溶液16m1，蒸馏水100mL。制法为：将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如果复红退色不全，再加氢氧化钠溶液12mL。甲液：Na2S203 34g，柠檬酸铁铵4g，蒸馏水100m1。乙液：去氧胆酸钠10g，蒸馏水100mL。 O6 x0 0 _/ M6 F9 H4 y) H2 ?$ S4 U) h2 p52S.S.琼脂. t, f: b7 A/ z; k- J7 E( ?8 8 F5 f0 j, K（1）基础培养基5 o; ( ?5 f& g uX1 i# E6 d* V& q$ y* 7 k7 j) I/ N成分：牛肉膏5g，月示 胨5g，三号胆盐3.5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL。4 f1 K3 2 v: X* ew& l& T, # _4 制法：将牛肉膏、月示 胨和胆盐溶解于400mL蒸馏水中，将琼脂溶于500m1蒸馏水中，二液混合，121灭菌15min备用。( p( d6 BX* O2 S; 1 ?. r- z$ i4 x: C（2）完全培养+ 0 K_4 Z H9 c/ X8 P$ w1 f8 ; # e成分：基础培养基1000mL，乳糖10g，柠檬酸钠8.5g，Na2S203 8.5g，10柠檬酸铁溶液10m1，1中性红溶液2.5m1，0.1煌绿溶液0.33m1。3 c8 P% G! d% u% A/ n5 |1 |9 ?( l0 e/ E U制法：加热熔化基础培养基，按比例加入上述染料以外的各成分，充分混合均匀，校正pH值为7.0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。& v5 v, f& p4 V7 ! u4 T/ a7 _; V( x7 s/ X注：制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48h内使用；煌绿溶液配好后应在10d以内使用。3 x O2 o1 R+ e0 V1 0 c* q: z & y9 u; k8 U0 X0 X2 53靛基质试验培养基* w$ X4 U9 f# m$ u+ x2 Q6 |2 d/ q( r& d( b5 Z1 Z9 E+ a! ) C成分：蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.37.5。9 b; |7 R- g$ W. 7 E0 e( N+ u* t* d8 J/ g7 G0 制法：称取各成分，加入水中加热溶化。用1mol/L NaOH调至pH 7.47.5。分装小试管，每管约3mL，116，15min高压灭菌后410保存备用。% G7 o4 F+ o N d8 + T) a2 l b& p, a6 B54三糖铁琼脂（TSI）1 ?3 F0 L: R. e) H7 i& p7 R% j$ X, H9 5 q3 9 m5 k; R+ m# H成分：蛋白胨20g，硫代硫酸钠0.2g，乳糖10g，蒸馏水1000mL，硫酸亚铁铵0.2g，蔗糖10g，酚红0.025g，氯化钠5g，牛肉膏5g，琼脂12g，葡萄糖1g，pH7.4。& e- G7 y8 V& v4 D# w% f4 i! R9 ?: y2 X7 K! u3 A制法：将除琼脂和酚红以外的各种成分溶解于蒸馏水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层