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Autotune 系列高强度超声波细胞破碎仪使用说明书250瓦特机型 500瓦特机型 750瓦特机型 800瓦特机型目录第1节安装检查电气要求安装超声波细胞破碎仪第2节操作超声波细胞破碎原理按键、控制钮、指示灯和接口的功能使用准备使用超声波细胞破碎仪第3节维修信息过载情况设备返修注意事项操作建议和技术本说明书所述的超声波细胞破碎仪选料精良，做工上乘，出厂前经过充分彻底的检验，按本使用说明书所规定的操作规矩行事可以为用户提供长年的安全可靠的服务。安全注意事项:安装及使用设备前请仔细地阅读安全注意事项本系列超声波细胞破碎仪设计为最大程度上保证操作人员的安全。但是设计不能防止不正确使用造成的人身伤害或者财产损坏。为了保证操作人员的人身安全和设备完好使用，必须时刻遵守以下所述的注意事项，在操作设备之前请仔细地阅读本使用说明，把本使用说明收存好以备随时参阅。如果使用机器时违反本说明的指导，可能会削弱设计的防护性能。-确保超声波细胞破碎仪经过三芯插头座妥善接地。-电源部分存在高电压，除非合格技术人员不得打开机壳。-打开机壳进行维修前拔下电源线以防止触电。-电源部分未连接变换器时不得接通电源开关。-探头上不得安装异物。-不得触摸振动的探头-不得让微端头或者说延长头在空气中振动超过10秒钟以上。-使用微端头时，一定保持幅度在40以下。-不要在螺纹端没有安装端头、延长头或者微端头的情况下开动探头。-超过100C的温度工作时用风冷冷却变换器。-操作超声波细胞破碎仪时建议使用隔音罩或者戴耳朵防护罩。低表面张力液体、有机溶剂所有的探头，包括可以带可更换端头的探头都调谐至特定的共振频率。如果把端头从探头上拆下或者说与探头的其余部分隔开，探头就不再共振于该频率了，电源部分就会失效。低表面张力液体会渗入探头和可更换的端头之间的界面，并且把微粒带进螺纹部中，把振子与探头隔开。当使用13毫米探头处理低表面张力液体时，请一定使用固态探头。第一节 安装在安装超声波细胞破碎仪之前，进行肉眼检查，是否在运输过程中发生了破损。丢弃包装材料之前仔细检查其中是否夹带有小物件。该超声波细胞破碎仪在出厂前经过仔细包装和彻底的检查。装货前承运公司承担了安全发货的责任。运输过程中出现的丢失和损坏应向承运公司理陪。如果出现损坏，当于收货日期48小时内与承运公司联系。不要运行损坏的设备。保留所有的包装材料以备今后装运。电气要求电源要求可参阅机后的铭牌。如果保险丝需要更换，请如下处理：1 确认探头和/或端头固定牢靠。2 用小螺丝刀打开保险丝支架罩。3 从壳中拉出红色的保险丝支架。4 用110、115伏特机器时，更换两个15安培缓熔1/4保险丝，用220、240伏特机器时，更换两个7.5安培缓熔5x20mm保险丝，5 连接电源线。注意为了操作人员的个人安全，电源线设有三端带地线插头。不论什么情况都不要拆卸掉地线插脚破坏电源线的接地特性。超声波细胞破碎仪安装所述的超声波细胞破碎仪应当安装在没有过量灰尘脏物，无易爆气体及腐蚀性气体处，环境温度和湿度不得过高。第二节 操作超声波细胞破碎仪原理超声波细胞破碎仪的电源变换器把50/60赫芝的市电电压变换成高频电能。把这种高频电能输送到变换器内的压电换能器，在压电换能器中转换成机械振动。探头加强变换器发出的机械振动，在液体中产生压力波。这个作用形成成千上万的微泡（空穴），这些微泡在负压程时膨胀，而在正压程时爆聚。这种现象称为空化作用，它在爆聚点释放大量的能量，并且在探头端上产生强大的剪切作用。探头的端头越大，可处理的容积越大，但是强度越小。各种探头的信息请阅下表。锥形微端头直微端头端头直径1/8(3mm)3/16(5mm)1/4(6.5mm)1/8(3mm)强度超高很高高很高容量（批）1-10ml3-20ml5-50ml0.25ml-10ml标准探头高增益探头端头直径1/2(13mm)3/4(19mm)1(25mm)端头直径3/4(19mm)1(25mm)强度高中低强度高中容量（批）10-250ml25-500ml50-1000ml容量（批）25-500ml50-1000ml按键、控制件、指示件和连接件的功能 前面板液晶显示屏显示各种提示及以下的控制参数：-选择的幅度-发送到探头的功率瓦特数，及总功率的百分数。-选择的处理持续时间-进行了的时间-实际处理时间-脉冲占空期间0-9按键输入数字CLEAR按键清除上次的输入。ENTER REVIEW 按键把数据写入程序，选择各种参数，显示在液晶显示屏上。TIMER按键用数字键设定施加超声波的时间，可以从1秒至9小时，59分，59秒的范围内选择。PULSER按键用数字键设定脉冲参数。可以从o.1至9.9秒独立地设定占（ON）和空（OFF）时间。在每个周期的脉冲器空部红色指示灯发光。START/STOP 键启动编程的周期，或者停止正在运行的周期。在STOP形式时，终止程序，并且红色指示灯熄灭。ON/OFF电源开关（位于控制面板下方）开关供电电源APLITUDE控制（位于控制面板下方）控制探头端头的振动幅度注意: 当使用微端头时，不允许幅度超过40%控制件、指示件和连接件的功能（续）后面板9针D形接口连接外部操纵装置，并且可以遥测功率和频率。脚踏开关插座连接至脚踏开关电缆线同轴接口连接至变换器。电源模件连接电源线并且内装交流电源保险管。9针D形接口各脚连接说明针号说明1外部过载保护2外部过载复位3空脚4可连接至频率计数器5可连接至外部功率表（5毫伏输出=1瓦特）6地线7此脚接地时为超声波振荡提供电能8和9在此两个针脚接10K电位器可以遥控调节超声波振荡强度。 注意可以用0至5V可变直流电源代替10K电位器遥控超声波振荡强度，这时把电源正极接8脚而负极接6脚。使用准备提示如果把超声波细胞破碎仪长时间放在特冷或特热的环境中，要等它达到室温后才能进行操作。1. 确认ON/OFF电源开关置于OFF。2. 把电源线插进电源插座。3. 如果使用选配的脚踏开关，把插头插入后面板上的插座中。确认插头插牢和插到位。4. 如果没有组装好变换器/探头组件，见第9页，并且遵照步骤5、6和7。重要注意事项不得把变换器夹在台钳上装配或者拆卸探头。不得在探头与变换器之间放置垫片不得在变换器、探头、可更换端头或微端头的配合表面或者螺纹上涂油脂。5. 检查变换器和探头或者直微端头配合表面的清洁度，以及螺杆螺孔的清洁度。检查螺杆是否拧紧。6. 用手把探头或者直微端头组件（由连接器和直端头组成）组装到变换器上，用随机附送的搬手拧牢靠。见第9页。7. 向探头上固定可更换端头、延长器或者锥形的微端头使用活搬子或者花搬子，参见第9页。注意事项如果需要拆卸探头，使用随机供应的活搬子。如果探头在变换器上安装了很长时间，有可能不得不使用台钳。这时台钳上一定要安装软钳口或者采取其它措施防止划坏探头。把探头的直径较大的部分夹在钳口中。不得把变换器夹在台钳上。用活搬子把变换器从探头上拧下。可以用小锤轻击活搬子把端。不得试图拧变换器壳把探头从变换器上拆下，不然会损坏壳内的电线连接。8. 把变换器电缆连接到电源单元上。9. 把变换器、探头组件安装在实验室支架上。只把夹具固定到1/2英寸（63毫米）直径的变换器壳上。不要把夹具固定到变换器/探头组件的其它部分上。编号说明定货号12345678910111213141516CV334型变换器四孔转接头直端头1/8(3mm)助力器实心探头1/2(13mm)探头1/2(13mm)带螺纹端和可更换的端头实心探头3/4(19mm)探头3/4(19mm) 带螺纹端和可更换的端头实心探头1(25mm)探头1(25mm) 带螺纹端和可更换的端头可更换的端头1/2(13mm)可更换的端头3/4(19mm)可更换的端头1(25mm)连接器直端头1/8(3mm)探头1/2(13mm)带螺纹端和可更换的端头锥形微探头1/8(3mm)锥形微探头3/16(5mm)锥形微探头1/4(6mm)延长杆1/8(3mm)延长杆3/16(5mm)延长杆1/4(6mm)全波延长杆3/4(19mm)- 10(254mm)长全波延长杆1(25mm)- 10(254mm)长高增益实心探头3/4(19mm)高增益探头3/4(19mm) 带螺纹端和可更换的端头高增益实心探头1(25mm)高增益探头1(25mm) 带螺纹端和可更换的端头实心全波探头1/2(13mm)- 10(254mm)长全波探头1/2(13mm)- 10(254mm)长带螺纹端和可更换的端头二孔装接头水套式样品处理室11/2(38mm)水套式样品处理室21/2(64mm)水套式样品处理室3(76mm)CV00334630-0558630-0422BHNVC15630-0219630-0220630-0208630-0207630-0209630-0210630-0406630-0407630-0408630-0421630-0422630-0222630-0418630-0419630-0420630-0518630-0519630-0306630-0305630-0310630-0311630-0217630-0218630-0662630-0503630-0421630-0496注意：不得把锥形微端头用在连接器上。没有连接器不要用直端头。在处理低表面张力液体时不得使用带螺纹端和可更换的端头的探头。使用超声波细胞破碎仪某种程度上汽车的速度控制与超声波细胞破碎仪相似。汽车的速度控制装置的作用是保持汽车行驶速度稳定的。路面不同，马力要求也会不同。速度控制装置检测出马力需求，自动地调节引擎发出的功率，从而补偿不断改变的路面条件。坡越陡，对车辆运动的阻力就越大，为了克服这种阻力，引擎发出的功率也越大。超声波细胞破碎仪设计得发出恒定的振幅。随着对探头运动的阻力加大，所需要的功率也增加。电源装置检测出这种需要，自动地增加发出的功率量，以保持探头端头的振幅恒定。在相同的负载条件下，由两个不同的额定功率的电源装置发出的瓦特数会是相同的（假定两者都有足够的功率容量）。用AMPLITUDE（振幅）控制器件可以把探头端头的超声波振荡设定到所需要的任何值。尽管可以通过眼睛观察方便地确定处理样品所需要的空化程度，但是所需要的功率量无法预测。一种检测网络连续地检测输出要求并且自动地调节功率，把振幅保持在预选的水准。粘度越高、探头浸入样品越深、探头直径越大、或者压力越大对探头运动的阻力就越大，向探头发送的功率也越高。完全顺时针地拧AMPLITUDE（振幅）控制钮并不向样品以送最大的功率。只有在对探头运动的阻力高得足以抽取最大的瓦特量时才会发出该超声波细胞破碎仪所以发出的最大功率。这个现象可以演示如下：对一片木头按下探头，下按的压力越大对于探头运动的阻力就越大，电源发出的功率就越大。电源部分未连接变换器时不得接通电源开关。-没有装好端头前不得开动可更换端头的探头。-不得让微端头在空气中振动10秒钟以上。用微端头进行处理时，不得让AMPLITUDE（振幅）控制钮超过40%。忽略这个原则会使微端头和延长杆断裂。-除样品之外不得让任何物品接触振动的探头。注意一般操作建议和超声波细胞破碎技术参见后面的第 页。1. 用通/断开关接通电源。开关会发光并且液晶显示屏显示超声波细胞破碎仪的功率，注意事项及以下控制参数。TIME_：_：_PULSE_._ _._ AMPL_ _%注意如果在液晶显示屏上出现“OVERLOAD”字样，参见第 页。2. 把探头浸入到样品中约2英寸（5厘米）。如果使用微端头，则把探头浸入到样品中约1/2英寸（1厘米）。注意应当把探头浸入得足够深以防止空气注入样品中，并且防止气溶现象和泡沫现象。AMPL.幅度是操作该超声波细胞破碎仪时必须设定的唯一参照。对于连续工作，其它两个控制参数TIME和PULSE不需要设定。 AMPL.显示由AMPLITUDE控制钮设定的，最大幅度的百分比，例如75%，按需要设定幅度。但是在使用微端头时须注意，不得超过40%。 这时液晶显示屏显示TIME_：_：_PULSE_._ _._ AMPL75%施加超声波能量请按START按键或者踩脚踏开关。停止施加超声波能量时请按STOP按键或者松开脚踏开关。如果必须使用TIME或PULSE功能，请参见第 页和第 页。注意如果按START按键时没有设定时间限期，处理将持续到按STOP按键。如果按START按键时设定了时间限期，处理将持续到设定的时间限到期，或者按STOP按键，不论这两者中哪个首先发生都会使之停止。如果使用脚踏开关，而没有设定时间限期，处理将持续到松开脚踏开关。如果使用脚踏开关，而设定了时间限期，处理将持续到设定的时间限到期，或者松开脚踏开关，不论这两者中哪个首先发生都会使之停止。START按键与脚踏开关互相排斥。如果用START按键启动处理，脚踏开关就不起作用。如果用脚踏开关启动处理，STOP按键则不起作用。注意清除错误的输入请按CLEAR按键。TIME：使用脉冲模式时，处理时间不同于经历时间，因为处理时间功能只监视和控制占空周期中的占部分。例如，如果占和空的时间都设定为1秒，1小时的处理时间，经历时间就是2小时。设定处理时间请按TIME按键。液晶显示屏将显示：TimeSettingHes: _ Min: _ _ Sec:_ _使用数字键按需要设定处理时间：例如：Hes.5 Min: 30 Sec:25按ENTERREVIE_按键。液晶显示屏将显示：TIME5：30：25PULSE_._ _._ AMPL75%TimeSettingHes: _ Min: _ _ Sec:_ _PULSE:脉冲功能可以抑制样品中温度积累，从而能够以较高的强度对温度敏感的样品进行安全的处理。另外，由于脉冲方式在每簇超声波后使材料返回探头之下而提高处理效果。脉冲占（ON）和空（OFF）时间可以独立地设定，范围是0.1秒至9.9秒。在空的时间部分PULSE按键上的红色指示灯发光。如果一个周期的空的时间部分超过两秒，液晶显示屏上显示出-CAUTION-PROBE ON STANDBY字样提醒操作者不要触摸超声波探头。按PULSE按键设定脉定时器。液晶显示屏将显示：Pulse on _._secPulse off _._ sec使用数字键按需要设定周期的占部分：例如：Pulse on 2.5secPulse off _._ sec使用数字键按需要设定周期的空部分：例如：Pulse on 2.5secPulse off 1.0 sec按ENTERREVIE_按键。液晶显示屏将显示：TIME 5：30：25PULSE 2.5 1.0 AMPL75%重要事项妥善保管探头对于可靠地运行是必须的。长时间使用后空化作用会引起端头侵蚀，输出功率降低而功率表上显示不出来。探头端越平滑光亮，传送至样品中的功率也就越高。在探头上出现的任何侵蚀都会加快进一步的侵蚀速度。因此，我们建议，每使用5或6个小时后检查一次探头端，需要时用抛光布或者砂轮进行抛光。因为探头调谐至特定的频率，最重要的是抛光时只去掉污染的表面。这种操作可以反复地进行，直到把AMPLITUDE控制钮设定到100时，探头在样品外测量功率表的读数在20瓦特以下。这时就必须更换探头或者端头了。第三节 维修保养信息过载情况保险丝在不正确使用时对该超声波细胞破碎仪提供保护。如果保险丝断了，请如下处理：1.确认探头和/或端头固定牢靠。2.检查及更换保险丝。3.把AMPLITUDE控制钮设定到50。把探头放在空气中（在样品外），功率表读数应当是低于20瓦特。如果超过了20瓦特，把电源通/断开关拔至OFF，从变换器上拆卸下探头。4. 把电源通/断开关拔回至ON。如果功率表读数低于20瓦特要么是探头坏了，要么由于过度空蚀而失谐，应当更换。设备返修注意事项我们提议把需要修理的超声波细胞破碎仪送回原厂。为了得到及时的服务，请在送回仪器前与工厂联系。信中请注明购买日期、型号和系列号。保修之外的机器，应当提交定单以免不必要的延误。仔细包装以免运输途中损坏。应当把要修理的机器寄往维修部，并预付所有往返运输费用，请注明发还装运的方法。超声波细胞破碎仪应当连同其变换器和探头一起返厂。重要事项应当提交的担保书：我保证返回维修的超声波细胞破碎仪和/或附件没有任何有害或者有放射性的物质，所述可以安全地操作。无此担保书不得发回任何设备。操作建议和技术破碎细胞单细胞有机体（微生物）含有半透性坚韧的细胞外壁，包围原浆（细胞）膜和细胞质。细胞质由核酸、蛋白、碳水化合物、脂质、酶、有机离子、维生素、色素、包涵体，以及80的水组成。要从细胞内分离和提取任何这些成分，必须破碎细胞壁和原浆膜。有时细胞可以泌出所需要的物质，但是，在多数情况下，必须用超声波破碎细胞壁才可以放出这些物质。微生物对超声波分解的灵敏度大不相同。例如，最容易分解的是杆状的（杆菌），而球形微生物（球菌）要难于分解得多的。分枝杆菌属特别难于破碎，结核菌就是其中之一种。一般地说，动物细胞比植物细胞易于分解，红血球比肌细胞要易于分解得多，因为红细胞没有保护性的细胞壁。典型地，在超声波处理时，样品中的分子运动一般地会引起温度上升，特别是在容积较小的情况下是这样的。因为高温降低空化作用，应当尽可能地保持样品低温，最好是刚好在冰点之上。这可以通过把样品浸入在冰盐水浴中达到。还可以通过使用脉动超声波，也就是说主样品承受几个短的超声波簇，使温升最小化。可以通过增加液压（典型地15-60psi）和增加粘度的方法促进细胞破碎。处理微生物时，加入0.05至0.5毫米直径的玻璃珠，由于集中空化释放的能量，也因为物理碾压作用，可以促进细胞破碎。在破碎孢子和酵母菌时，玻璃珠几乎是前提条件。较好的比例是一体积玻璃珠，两个体积液体。玻璃珠可以从Catatphote, Inc. P.O. Box 2369, Jackson, Mississippi 39225-2369 USA 购买，电话是（800）221-2574，或者（601）939-4612，电传为（601）932-5339，或从Jayco Inc., 675 Rahway Ave., Union, NJ 07083USA购买，电话是（908）688-3600，电传是（908）688-6060，也可以从Sigmund Lindner Gmbh. P.O. Box 29. D-95483 Warmensteinach, Germany购买，电话是（49）0927799410，电传（49）0927799499。革兰氏阴性细菌一般需要10至15分钟处理，而球菌需要20至30分钟。在处理难破碎的细胞时用溶菌酶之类的酶进行预处理比较好。有人把蜗牛酶成功地用于酵母、溶葡球菌酶成功地用于葡萄球菌、胶原蛋白酶成功地用于皮肤和软骨，还把透明酯酸胰蛋白酶成功地用于肝和肾。如果不能够使用酶，可以考虑以下的处理过程：在-70C把样品冷冻过夜，在刚要进行超声波破碎前溶成冰水。只要有可能，应当把组织切得非常细小使之能够在水中移动。皮肤及肌肉之类的坚韧组织应当先用搅切机之类的均浆10秒钟，并且在超声波处理时封闭装在小容器中。如果对实验没有损害也可以采用冷冻后再磨碎的方法。如果希望不破坏亚细胞颗粒，应当把幅度设置得较低，而把处理时间相应地延长。把样品插入至样品表面以下足够地深，以抑制气溶现象或者发泡现象。发泡可能会严重地降低空化作用并且可造成蛋白质变性。在没有起泡现象的低功率设定下进行的处理比有起泡现象的高功率设定下进行的处理有效得多。降低功率，延长时间，使用较小的容器，以及降低液体的温度一般可以防止气溶现象和发泡现象。不要使用抗泡沫剂或者表面活性剂。在空化时会形成自由基，如果任其积累，会与蛋白质、多糖及核酸反应严重地影响样品。尽管在短的处理时间一般不把自由基的形成看成问题，但是长时间的处理时添加自由基清除物，诸如N2O、半胱氨酸、还原谷胱甘肽、二硫苏糖醇或者其它SH化合物之类的，可能是有益的。用氦气及氢气之类的保防护性环境饱和样品或者在样品中投入小块干冰一般地会抑制自由基的形成。尤其在研究sulpdhydril（原文拼错，此化学名词词根全不对）酶时，氧化问题是很重要的。这可以部分地用自由基捕捉剂诸如半胱氨酸、还原谷胱甘肽或者类似物质