生物化学、分子生物课件word版.doc

第八章重组DNA技术一、选择单选1、下列哪项不属于生物工程？A. PCR技术B. 重组DNA技术C. 蛋白质工程D. 酶工程E. 细胞工程2、重组DNA技术中所用的限制酶是哪类？A. 型限制酶B. 型限制酶C. 型限制酶D. 型限制酶E. 型限制酶3、可以利用蓝白筛选法筛选用pUC转化的重组DNA克隆，是因为pUC包含以下哪种元件？A. 复制起点B. ampRC. lacZD. 多克隆位点MCSE. 调节基因lacI4、关于噬菌体，以下叙述错误的是A. 基因组DNA的部分序列并非溶原性生长所必需B. 基因组DNA感染大肠杆菌后形成闭环结构C. 在溶原性生长时进行滚环复制D. 复制时形成多联体结构E. 其转化的细菌经过培养形成噬菌斑5、pBR322质粒包含两个抗性基因：氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，据此可以利用哪种方法筛选重组DNA克隆？A. 互补B. PCRC. 插入失活D. 核酸分子杂交E. 蓝白筛选6、制备重组DNA首先要制备目的DNA，要保证目的DNA的量和纯度能满足重组要求。常用的制备方法不包括A. PCR扩增B. 从组织细胞分离基因组DNAC. 化学合成D. 逆转录合成cDNAE. 限制酶截取7、第一种应用于临床的重组蛋白是A. 基因工程疫苗B. 基因工程抗体C. 激素D. 生长因子E. 细胞因子8、在重组DNA技术中，目的DNA与载体在体外连接的过程称为DNA的体外重组。体外重组的方法不包括：A. 加人工接头连接B. 加同聚物尾连接C. 互补黏端连接D. 平端连接E. 切口平移连接9、重组DNA的宿主细胞有原核细胞和真核细胞。用于制备基因文库的宿主细胞主要是A. 哺乳动物细胞B. 大肠杆菌C. 酵母D. 枯草杆菌E. 昆虫细胞10、哪种方法要求宿主细胞必须是感受态细胞？A. CaCl2法B. 病毒感染法C. 脂质体载体法D. 显微注射法E. 穿刺法11、蓝白筛选属于筛选重组DNA克隆方法的哪种？A. PCR分析B. 插入失活分析C. 核酸分子杂交分析D. 酶切分析E. 免疫分析12、重组DNA技术领域常用的质粒DNA是 A. T病毒基因组DNA的一部分 B. 细菌染色体外的独立遗传单位 C. 细菌染色体DNA的一部分 D. 真核细胞染色体外的独立遗传单位 E. 真核细胞染色体DNA的一部分 13、某限制性内切核酸酶切割5GGGGGGAATTCC3序列后产生 A. 5突出末端 B. 5或3突出末端 C. 5及3突出末端 D. 3突出末端 E. 平末端 14、“克隆”某一目的DNA的过程不包括 A. 重组DNA分子导人受体细胞 B. 外源基因与载体的拼接 C. 基因载体的选择与构建 D. 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞 E. 表达目的基因编码的蛋白质 15、关于基因文库及其构建，以下叙述错误的是A. 基因文库包括基因组文库和cDNA文库B. 构建基因组文库常用的克隆载体是噬菌体、粘粒和酵母人工染色体系统C. 目前构建的cDNA文库可以包含一种生物基因组所含的全部编码序列D. 真核生物cDNA文库中的目的基因可以在原核细胞内表达活性产物E. 构建cDNA文库要用到逆转录酶多选：1、用目的DNA和质粒制备重组DNA，下列哪些工具酶是必需的？A. DNA聚合酶B. 核酸酶C. 连接酶D. 限制酶E. 修饰酶2、影响限制酶切割效率的因素有那些？A. 底物纯度B. 底物甲基化程度C. 底物结构D. 反应温度E. 反应体系组成3、哪些因素会降低限制酶的特异性?A. 高浓度限制酶B. 高浓度甘油C. 低离子强度D. 用Mn2+取代Mg2+E. 高pH值4、限制酶的应用非常广泛，包括:A. DNA重组B. 质粒改造C. DNA杂交D. 探针制备E. 基因定位5、关于重组DNA技术使用的DNA 连接酶A. 用以将目的DNA与载体共价连接成重组DNAB. 包括大肠杆菌DNA连接酶和T4 DNA连接酶C. 大肠杆菌DNA连接酶需要NAD，而T4 DNA连接酶需要ATPD. 大肠杆菌DNA连接酶用于连接切口或互补黏端E. T4 DNA连接酶用于连接互补黏端或平端6、重组DNA技术常用的DNA聚合酶有A. DNA聚合酶B. Klenow片段C. Taq DNA聚合酶D. 逆转录酶E. T4 DNA聚合酶7、载体分为克隆载体和表达载体两类。克隆载体含有以下基本元件A. 复制起点B. 克隆位点C. 选择标记D. 启动子E. 核糖体结合位点8、表达载体的哪些元件是克隆载体不需要的？A. 复制起点B. 克隆位点C. 选择标记D. 启动子E. 核糖体结合位点9、原核细胞表达载体的表达元件有A. 核糖体结合位点B. 加尾信号C. 启动子D. 增强子E. 转录终止信号10、真核细胞表达载体的哪些表达元件是原核表达载体没有的A. 核糖体结合位点B. 加尾信号C. 启动子D. 增强子E. 转录终止信号11、以下哪些是真核载体？A. 质粒B. 噬菌体C. 酵母人工染色体D. 逆转录病毒E. 腺病毒12、以下哪些DNA分子可以通过化学合成法制备？A. cDNAB. PCR引物C. 寡核苷酸探针D. 较小的基因E. 人工接头13、将外源DNA导入原核细胞，常用A. CaCl2法B. 电穿孔法C. 病毒感染法D. 脂质体载体法E. 显微注射法14、以下哪些是真核生物基因在原核细胞内表达存在的问题？A. 真核生物基因的启动子不能被原核生物的RNA聚合酶识别B. 真核生物基因含有内含子，原核细胞没有相应的剪接系统C. 真核生物mRNA翻译起始位点不能被原核生物核糖体识别D. 真核生物基因的表达产物往往需要后加工，原核细胞没有相应的加工系统E. 真核生物基因表达的蛋白质容易被原核细胞的蛋白酶降解。15、基因工程药物包括A. 激素B. 细胞因子C. 生长因子D. 基因工程疫苗E. 基因工程抗体二、填空1. DNA克隆是从染色体中分离特定DNA片段，与一个DNA载体连接成 ，将其导入宿主细胞进行复制，并随细胞分裂而扩增，最终得到该特定DNA片段的 。2. 重组DNA技术的核心内容之一是DNA重组，即将 与 连接成重组DNA。3. 限制酶是一种内切核酸酶，由细菌产生，能识别双链DNA的 位点，并水解该位点内部或附近的 键。4. DNA重组需要连接酶，常用的DNA连接酶包括 DNA连接酶和 DNA连接酶。5. 载体的化学本质是DNA。载体不但能与 重组，能导入 ，还能利用自身的调控系统，使目的DNA在宿主细胞内复制或表达。6. 载体分为 载体和 载体两类。7. 克隆载体含有以下基本元件：复制起点、 和 。8. 常用的载体有以原核细胞为宿主的 载体和噬菌体载体，以真核细胞为宿主的 载体。9. 质粒是游离于 之外、能 的闭环双链DNA，根据与宿主的相互关系分为寄生型质粒和共生型质粒。10. pBR322质粒包含两个抗性基因： 抗性基因和 抗性基因。11. 噬菌体感染细菌后可以进行 生长和 生长。12. 噬菌体的DNA为线性双链分子，在分子两端各有12nt的 ，是天然黏端，称为 位点。13. 制备目的DNA就是要保证目的DNA的量和纯度能满足重组要求。常用的制备方法有分离纯化、 、 和化学合成。14. 化学合成法主要用于合成 、 、人工接头和较小的基因。15. 在重组DNA技术中， 与载体在体外连接的过程称为DNA的体外重组。体外重组的产物称为 。16. 体外连接的方法有平端连接、 端连接、加同聚物尾连接、 连接。17. 外源DNA导入宿主细胞，使其获得新的遗传表型，称为 ；其中通过噬菌体或病毒完成的转化称为转导或 ，外源DNA转化培养的真核细胞称为转染。18. 将外源DNA导入原核细胞，常用 法、 法和病毒感染法。19. 将大肠杆菌悬浮在CaCl2溶液中，并置于低温（05）环境下一段时间，Ca2+使 的结构发生变化， 增加，外源DNA可以进入，这种细胞称为感受态细胞。20. 许多载体的选择标记内都有 ，插入目的DNA将导致该选择标记失活，称为 。21. 与克隆载体相比，表达载体应具备表达元件，主要包括 、 和转录终止信号等。22. 基因文库是已经阐明的各物种基因的总称，包括 文库和 文库。23. 基因组文库是应用重组DNA技术构建的一个 ，它包含了一种生物 的全部DNA序列。答案1A 2B 3C 4C 5C 6E 7C 8E 9B10A 11B 12B 13E 14E 15C 多选：1CDE 2ABCDE 3ABCDE 4ABCDE 5ABCDE 6ABCDE 7ABC 8DE9ACE 10BD 11C 12BCDE 13ABC 14ABCDE 15ABCDE填空 1 重组DNA 2 目的DNA 载体 3 特定序列 磷酸二酯键 4 T4 大肠杆菌 5 目的DNA 宿主细胞 6 表达载体 克隆载体 7 克隆位点 选择标记 8 质粒 病毒 9 细菌染色体 自主