【毕业学位论文】（Word原稿）部分家兔品种微卫星DNA遗传多样性研究经济动物遗传育种硕士论文

密级： 论文编号： 中国农业科学院 硕士学位论文 部分家兔品种微卫星 传多样性研究 NA NA I 摘 要 本试验 利用微卫星标记技术，分析了美系獭兔、德系獭兔、四平獭兔、法系獭兔、长毛兔和比利时兔 6 个家兔品种分子水平上的遗传 多样性，分析了各品种间的遗传关系，为家兔遗传资源的合理利用及保护提供科学依据，研究结果如下： 1. 10 个微卫星位点在 测定的 6 个品种中均表现出多态性，总共检测到 41 个等位基因 ， 其中检测到的等位基因数最多为 5 个，最少的位点检测到 3 个 ； 各群体在 10 个位点的有效等位基因数目从 等，其中 5、 8、 17 三个位点检测到有效等位基因数较高，分别为 2. 计算出 10 个微卫星位点等位基因频 率 、 有效等位基因数目和杂合度。 10 个微卫星位点的平均杂合度为 10 号微卫星位点杂合度较低（ 外，其它位点的杂合度均较高； 6 个群体平均杂合度为 属于高度杂合群体； 10 个微卫星位点的 为 均高于 明所选取的位点大多为高多态位点； 6 个群体的多态信息含量平均在 果表明所选出的 10 个微卫星位点在 6 个群体中多态性丰富。 3. 通过群体间 标准遗传距 离 （ 群体间 遗传距 离 （ ,得出总群体间的遗传分化系数为 群体杂合度为 群体内杂合度为 说明遗传变异主要存在于各个品种内，品种间遗传变异不大， 6 个群 体间的遗传距离变异较小。 4. 根据 传距离进行 种方法聚类，综合分析认为运用离所得的 2 个聚类图更能够比较正确 地 反映 4 个獭兔品种之间的聚类关系；而长毛兔和比利时兔群体聚类情况比较复杂，其中原因还有待于进一步研究论证。 关键词 ：家兔；微卫星标记；遗传多样性；遗传距离；聚类分析 he in to It be of of as 1. 0 in We 1 0 , . of 2. We we 、 e of of to 0 IC IC 0 IC 3. We T、 HS ST We a is 4. J a s in of in 录 第一章 绪论 1 畜 遗 传 多 样 性 1 传多样性的概念 1 护遗传多样性的意义 1 传 多 样 性 的 研 究 方 法 2 态学标记 2 胞学标记 2 物化学标记 2 子遗传标记 3 微 卫 星 标 记 在 动 物 遗 传 育 种 中 的 应 用 7 卫星 产生机制 7 卫星 特点 7 卫星在动物遗传育种中的应用 8 兔 微 卫 星 标 记 研 究 进 展 10 外研究进展 10 内研究进展 11 究 的 目 的 和 意 义 12 的 12 义 12 第二章 材料与方法 13 验材料 13 验仪器 13 验动物 14 要试剂及配制 14 验方法 15 样的采集 15 因组 取 15 增 16 物的检测 17 2. 3 统计分析 18 体内遗传变异 18 体间遗传关系 19 第三章 结果与分析 21 因组总 测 21 增结果 21 3 2 1 琼脂糖凝胶电泳检测结果 21 3 2 2 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果 22 位基因频率 24 体内的遗传变异 28 体间的遗传变异 30 第四章 讨论 35 样和样本容量 35 4. 2 物检测 35 卫 星 标 记 的 多 态 性 36 态 信 息 含 量 与 群 体 杂 合 度 37 4 5 遗 传 距 离 估 计 与 聚 类 图 37 第五章 全文结论 39 参考文献 40 致 谢 44 作 者 简 历 45 V 英文缩略 表 英文缩写 英文全称 中文名称 扩 增 片 段 长 度 多 态 性 D 遗 传 距 离 G o f e 遗 传 分 化 系 数 H 杂 合 度 h 亚 群 体 内 杂 合 度 H T e 总 群 体 杂 合 度 标 记 辅 助 选 择 NJ 邻 近 结 合 法 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 n 聚 合 酶 链 式 反 应 in 多 态 信 息 含 量 数 量 性 状 座 位 en 限 制 性 片 段 长 度 多 态 性 ce 单 链 构 象 多 态 性 简 单 串 联 重 复 序 列 短 的 串 联 重 复 序 列 n 平 均 非 加 权 成 组 配 对 法 中国农业科学院硕士学位论文 第一章 绪论 1 第一章 绪论 畜遗传多样性 传多样性的概念 遗传多样性（ 基因多样性（常洪， 1999），对家畜（禽）而言就是 指种内 的基 因频率变 化，包 括种 内显著不 同的品 种间 与同一品 种内的 遗传变异。 广义的 遗传 多样性是 指地球 上所 有生物所 携带的 遗传 信息的总 和。但 一般所指的 遗传多 样性 是指种内 的遗传 多样 性，即种 内个体 之间 或一个群 体内不 同个体的遗 传变异 总和 。家畜遗 传多样 性是 指所有的 家畜及 其野 生近缘种 的种间 和种内的遗 传变异 的总 和。其中 不仅包 括了 不同种家 畜间的 遗传 变异差异 ，还包 括了同种家畜内不同品种间和品 种内共同的和特异的基因及其组合体系。 护遗传多样性的意义 本世纪 以来， 由于 育 种、营 养、繁 殖控 制 技术的 发展， 畜禽 个 体生产 水平大幅度提高 ，某些 品种 经强度选 育，已 经成 为高产、 专门化 品种 。同时， 由于品 种间的杂交和改良，造成许多地方畜禽品种受到严重威胁、甚至灭绝（邓务国， 1994）。为了使人 类与自 然能 够协调、 健康地 发展 ，维护生 物的生 存环 境，对家 畜遗传 多样性的保护在当前就显得更为迫切和重要。 全球畜 牧业商 品经 济 的发展 以及现 代家 畜 育种理 论和方 法的 应 用，使 得家畜生产性能得到前所未有的改进，特别是改革开放 20 年 来，我国引入大量的国外优良畜禽品 种杂交 改良 国内地方 品种， 我国 地方固有 品种受 到了 强烈的冲 击，已 开始出现的部分品种资源消失的情况，我国畜禽种质资源状况甚忧。过去 100 年，由于强调 生产效 益， 专门化高 产品种 成为 优势品种 ，通过 这些 品种的推 广，在 提高生产水 平的同 时， 导致畜禽 遗传多 样性 下降、遗 传基因 单一 化。据联 合国粮 食与农业组织 (1993 年统计，大约 30%的家畜品种资源处于危急状态， 1995 年调查结果表明，全球至少 30%、甚至可能 40%的畜禽品种资源处于灭绝的高度危险之中（苟得明 1995）。据估计，全球在 3831 个畜禽品种中，有 618 个 (占 16%)已经灭绝 (戴茹娟， 1996)。 由于畜 禽遗传 多样 性 与人类 的关系 最密 切 、最直 接，因 此它 受 到的影 响也是最大的。 畜禽遗 传资 源是品种 改良和 细胞 生物学、 分子生 物学 、繁殖生 物学等 诸多学科研 究及畜 牧业 可持续发 展的基 础和 保障。鉴 定、评 估、 保存和合 理利用 畜禽遗传资 源已成 为生 物经济时 代国内 外关 注的热点 。满足 人类 物质需要 的畜禽 生中国农业科学院硕士学位论文 第一章 绪论 2 产及改良均依赖于畜禽遗传多样性（谢芳， 2004）。遗传多样性的丧失必将限制未来不可预见优良特性的选择机会，造成无法挽回的损失。 传多样性的研究方法 态学 标记 形态学标记（ 要是以形态性状、生理性状、杂交亲和性，结 合生态 地理 分布等特 征为遗 传标 记进行的 。家畜 的毛 色等形态 特征是 不同的生态 环境和 文化 背景下长 期选择 的结 果。但是 ，形态 学标 记在划分 物种中 往往是建立 在个体 性状 描述和宏 观观测 水平 上的，可 利用的 形态 标记性状 较少， 无法随机代 表生物 群体 遗传组成 ，且表 型差 异不一定 能真实 反映 遗传差异 ，其结 果不尽完善 ，容易 引起 争论。然 而形态 学标 因其 观察 方便， 故 仍 是许多生 物起源 分化关系研究和物种分类的基本手段之一（杨华南， 2004）。 胞学标记 细胞学标记 (上世纪末第一次观察到染色体后兴起，生物学研究逐渐进入细胞水平。本世纪 50 年代起，世界各国对各种生物的染色体组型进行了细致的研究。染色体组型 (也称染色体核型 )分析是研究高等生物遗传多样性和分类的有效工具，有人称之为生物进化的档案库。通过比较特定细胞分裂时期 (以有丝分裂中期最佳 )染色体的数目和形态参数 (着丝点位置、相对长度、臂长、臂比等 )，将染色体按各自的特征区分开来，得到一定的染色体组型。染色体与物种都具有连续 性和稳 定性 ，同时又 具有可 变性 、物种内 特异性 和种 间多样性 ，不同 生物种其染 色体组 型不 相同，因 此是进 行生 物分类和 遗传进 化研 究的有力 依据。 然而一些生物种类的染色体组型或染色体大小差别不十分明显（罗鹏， 1993），给研究工作带来很大的因难。 染色体组型和带型分析在动物分类学、动物遗传育种学和医学诊断等领域起过重要的作用。染色体数目的不同使绵羊（ 27 对）和山羊（ 30 对）有了明确的界限，利用 善如， 1997）；许多研究揭 示出染 色体 变异与繁 殖、疾 病的 关系，如 牛和绵 羊的 异卵异性 双胎中 的间雌个体，是由于性染色体畸变 形成嵌合体所致（姚世鸿， 1993）。 物化学标记 生化遗传标记 (要指血液生化标记，是对各种畜禽的血液蛋白质 (包括同功酶 )多态性研究。蛋白质作为生物基因表达的直接产物，其变异中国农业科学院硕士学位论文 第一章 绪论 3 反映了基 因的变 异， 基因突变 及等位 基因 的广泛存 在也就 决定 了蛋白质 具有丰 富的多态性 ，而且 属于 典型的孟 德尔遗 传， 其多态性 可以较 明显 地表现于 电泳图 谱上或表现 在酶活 力上 。蛋白质 多态性 分析 主要根据 群体内 基因 频率不同 进行， 对畜禽进行 进化分 类研 究。由于 蛋白质 在遗 传过程中 会发生 重组 和杂合， 只能用 于群体水 平 的研究 。群 体之间血 液蛋白 位点 上基因频 率的差 别基 本是不同 的种系 起源、隔离以及极为缓慢、悠长的自然选择与遗传漂变的体现（常洪， 1999）。 同功酶 研究是 蛋白 质 多态分 析的一 个重 要 组成。 在生物 的不 同 个体， 以及同一个体的 不同组 织器 官或生长 发育的 不同 阶段都可 以检测 到一 系列的功 能相同 、结构有差 异的同 功酶 。因同功 酶变异 丰富 ，不同谱 带差异 一般 表现为同 一基因 位点上等位 基因的 差异 ，能稳定 遗传， 而杂 合体共显 性对生 物性 状表现一 般无直 接效应（顾志良， 1995）。 总之， 蛋白质 多态 性 作为遗 传标记 的一 个 重要方 面，其 研究 丰 富和完 善了群体遗 传学理论和方法，是多学科在育种学上交叉的产物。但是蛋白质 (包括同功酶 )是基因表达的产物，既受遗传基础制约，也受发育阶段、环境条件等因素的限制，同时也因取样及分析方法所限，存在一定局限性。 子遗传标记 分子遗传标记 (直接以遗传物质 多态性为标记进行的遗传 分析， 具有 存在范围 普遍、 遗传 稳定、直 观准确 等优 点。在遗 传学和 起源进化以 及生物 分类 学等研究 领域具 有广 泛的应用 前景， 目前 最常用的 分子遗 传标记有以下几种 : 制性片段长度多态性（ 记 限 制性片段长度多态性 (记是指用限制性内切酶切割不同个体的基因组 ，含同源序列的酶切片段在长度上的差异，其核心是探测基因组中特异性 列。 两类，一类是点多态性，即由于限制性内切酶识别位点上发生了的一个碱基替换 (转换或颠换 )，使原有切点消失或产生新的切点；另一类是结构重排型多态性，是由于 部发生较大的顺序变化所引起的 ,即 基序列发生了突变 (缺失、倒位或插入 )或高变区的串联重复序列的拷贝 数变化，以及限制性酶切位点的相对位移引起。 记普遍存在于生物界并能稳定遗传，丰富的变异也就成为天然的遗传标记。 源于生物基因组 自身变异，在数量上几乎不受限制，可根据研究目的随机选取足够数量的能代表整个基因组的 记，且每 个标记 变异 较大，可 获得的 多态 信息相对 较多， 适于 物种分类 和组建 高密度的遗传图谱。理论上， 点普遍存在于整个基因组中，只要有足够多的与其遗传特征相连锁的遗传标记，就可以找到足够多的 点，用于构建 罗根， 1994， 980）。 当然并非所有的 隆或 隆都可以检测到 取得中国农业科学院硕士学位论文 第一章 绪论 4 在很大程 度上依 赖于 限制性内 切酶识 别位 点上碱基 的改变 或识 别位点的 位置移 动（林兵， 1990）。其遗传稳定性和变异性与所使用探针的来源和基因组的性质密切相关，不 受动植 物发 育时期和 组织器 官差 异以及细 胞生境 的影 响，因此 在基因 突变分析、基因诊断、个体识别、亲子鉴定、基因定位、构建与 连锁图，以及物种分类和进化关系研究、育种操作等方面都具有重要的实用价值。 记 线粒体 高等动物唯一的核外遗传物质，有着与核 内遗传 物质 不同的遗 传特征 ，具 有分子量 小、结 构简 单稳定、 进化速 度快、母系遗传等特点。另外长度变化和序列重排也是造成 态性的原因，因而可以用限制性内切酶技术 (接探测 态性。 遗传多样性是揭示家畜品种起源和遗传分化关系的重要标记之一，在动物遗传育种研究中具有重要作用。由于 循母系遗传，子代 张亚平， 1992）。因而 受外来公畜杂交改良之 影响， 而且 在世代传 递过程 中很 少发生重 组，家 养动 物一般能 保持其 野生祖先的 型，其 型能反映当地畜禽品种的母系特征，故 的遗 传标 记用于地 方品种 的遗 传结构及 起源分 化研 究，通过 几只动 物个体样品就可以了解到一个群体的遗传结构（陈宏， 1995）。 增片段长度多态性（ 记 扩增片段长度多态性 (标记 ,即对 解后的限制性片段进行 增的标记方法，是荷兰的 1993）年发明的一种新的 子标记方法 ,是 术结合产生的一种新技术（郭雄明， 2003）。其原理是 限制性内切酶酶切后，形成分子量大小不等的随机片段，将特定的接头 (接在这些 段的两端，形成带接头的特异片段，通过接头序列和 物 3末端的识别，特异性片段经 增，最终通过聚丙烯酰胺凝胶电泳的分子筛作用将这些特异性片段分离开来。 记具备多态性丰富、共显性表达、无 复等位效应、不受环境影响等优点。经一些学者 (人 )应用和验证，都证实了 一种十分理想的、先进有效的分子标记（罗鹏， 1993）。 品种鉴定和遗传多样性研究， 构建遗 传图 谱和基因 定位， 以及 指导育种 工作实 践中 得到应用 并取得 良好效果。 机引物多态性（ 记 记从 1990 年做为一种新的分子生物学技术出现。该技术是利用 理，在反应中只使用一种人工合成的短序列(通 常为 10机 引 物，在 较低 的退 火温 度下 (一般 35 37 )， 引物 与基 因组互补顺序配对，启动 合成，产生基因组特征产物的多态性，这种多态性具有物种和个体特异性，可作为研究生物多样性的遗传标记（杜立新， 1995）。 比较而言， 不同于常规 特点，无需专门设计 增反应中国农业科学院硕士学位论文 第一章 绪论 5 的引物， 且每次 反应 只需一种 引物； 容易 产生较为 丰富的 单引 物扩增产 物，构 成特异的电泳图谱，可获得大量的 态信息，检测范围几乎可以覆盖整个基因组；而且 品用量极少 (pg )；引物具有通用性，使用范围广 ，宜于规模化、商品化生产， 析适合于自动化程序分析，结果较为准确可靠。 记属于显性遗传标记，具有许多独特的优越性。利用 记可以对整个基因组 行多态检测，对那些 以区分的区域做出遗传连锁图（苟得明， 1995）。而且 测遗传变异的灵敏度高，品种间和品种内遗传变异的丰富，因而是分析群体遗传结构的理想工具。然而 以区分杂合子和纯合子基因型，无法有效鉴别出杂合子，这一方面又不能与 比 (可以区分杂合子的（王慧， 1997）。同时 测受反应条 件影响很大，重复性和稳定性较差，易产生假带。尽管如此， 然不失为一种非常有用的遗传标记。 纹 (记 记 (术是 态性分析中一种准确度较高、多态信息较丰富的分析方法。 1980 年 人首先在人类基因文库的 离出高度多态的重复顺序区域， 1982 年， 人又在人胰岛素基因附近发现高度重复序列 高变区（黎裕， 1999）。进一步研究证明，真核生物基因组中 ，除了 编码 蛋白质的 单拷贝 序列 之外，在 染色体 上还 有许多重 复序列 ，他们以较 高的密 度覆 盖着整个 基因组 。这 些数目可 变的串 联重 复序列， 在染色 体某位点上头尾串联，根据每个位点上重复单位的数量及序列变化所检测到的 不同的重复单位和数目构成了 高度多态性，表现出一定的 列差异，不同数目的顺序重复“核心” 列则构成许多等位基因的高度多态性。根据重复核心序列碱基对数的不同， 可以分为小卫星和微卫星 邓务国，1994） 卫星 记 小卫星 重复核心序列为 10上，总长由几百个到几千个 碱基组 成的 串联重复 序列。 它在 不同个体 间存在 有串 联数目的 差异， 表现出高度个体特异性，也具有高度种属特异性，以孟德尔方式稳定地遗传和分离。小卫星 记的多态信息含量在 间（钱惠荣， 1998）。因在每个染色体座位上 的串联 重复 序列中， 有重复 出现 的限制性 内切酶 靶序 位，其鉴 别仍可 采用 法。检测用的探针可在基因组文库中筛选也可以人工合成。小卫星 连锁分析及基因定位中十分有用。 卫星 记 微卫星 ， 又 称 短 串 联 重 复 序 列 (简单重复序列 (以由侧翼序列和串联重复核心序列组成，其串联重复的核心序列长度一般为 16中最常见的是双核苷酸重复，即 (n 和 (TG)n(.,1996)。每个微卫星 核心序列结构相同，重复单位数目 1060 个。因重复数和重复的单位 的不同，造成基因座位上丰中国农业科学院硕士学位论文 第一章 绪论 6 富的多态性，其多态信息含量高。微卫星 记广泛均匀地分布在整个基因组中，但这种标记一般不能直接作为探针，需将其两侧的序列作为引物，经 增后用其片段再作分析，且一般只能探测一个基因座位 ,是进行基因定位的理想标记之一（贾艳梅， 2004）。 纹在群体亲缘关系分析、遗传距离测算和动物起源分化研究、基因定位、遗传 作图和 隐性 遗传病诊 断，以 及动 物品系分 析、配 合力 测定和杂 种优势 预测上都有独特的优越性。从理论上讲，通过 纹分析，可以找到与任一经济性状主基因连锁的 纹，因而 可利用 纹分析进行数量性状的标记辅助选择。 纹虽然有高分辨率和多态信息丰富之优点，且确定性好，但由于需要进行 提取纯化和酶切，经电泳和转移，选择合适的探针并标记，检测费用较昂贵，设备条件和技术水平要求较高，这在一定程度上限制了 记的应用范围。 链构象多态性 (记 单链构象多态性标记 (术的基本原理是根据双链 变性处理后，进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，由于子在凝胶中的迁移率与其分子量和空间的构型有关，在非变性的胶中，单链 形成一级结构，而这种单链 形成的一级结构与单链 序列有关，并且单链 迁移率受到其一级结构的影响。因此通过电泳，不同的单链 分离，单链 胶中的位置差异反映了 列的的差异，所以以检测到点突变和多态性位点（许云华， 2003）。 核苷酸多态性 (记 同一位 点的不 同等 位 基因之 间常常 只有 一 个或几 个核苷 酸的 差 异，因 此从分子水平上对单个核苷酸的差异进行检测具有重要意义。过去检测 段的序列变化，只能逐个克隆进行序列分析，费时费力。随着计算机和 片技术引入分子生物 学领域 ，研 究者可同 时对成 千上 万个克隆 测序， 用计 算机分析 数据和 显示最终结果。 1998 年科学家建立了 术，目的是检测人类基因组中的单个核苷酸的改变，利用 作的人类遗传图被称为人的第三代遗传图， 为一种 新 的 遗 传 标 记 ， 几 乎 完 全 建 立 在 片 技 术 的 基 础 上 （ 杜 玮 南 ， 2000，999）。 总之， 比较几 种遗 传 标记方 法，都 各有 其 优缺点 和适用 范围 ， 在研究 中应根据需要选 用恰当 的标 记方法。 每种遗 传 标 记都能反 映生物 遗传 特性的某 些方面 。在实际应 用中相 互结 合、相互 补充， 才能 从各个角 度揭示 生物 的遗传本 质，更 深入全面地 了解与 我们 的生存密 切相关 的生 物世界， 以便更 好地 保护生物 ，保存 人类赖以生 存的生 物资 源。可以 预测， 在畜 禽遗传育 种中分 子遗 传标记将 会起越 来越重要的 作用。 采用 分子遗传 学手段 ，可 以提高育 种值估 计的 准确度， 大大缩 短育种年限。 中国农业科学院硕士学位论文 第一章 绪论 7 微卫星标记在动物遗传育种中的应用 卫星 产生机制 关于微卫星 产生机理，普遍认为是 制和修复过程中碱基的滑动 、 错配或减数分裂过程中姊妹染色单体的 不均等交换。 认为从统计学角度看，微卫星的产生采用的是逐步突变模式 (即每一次突 变增加 一个 或数个重 复单位 ，从 而导致一 个新的 等位 基因的出 现，但 这种变异会受到某种约束，被假定符合一定的正态分布。这些限制因素可能有 :(1)基因转换 ( (2)偏向性突变 (3)选择 (4)微卫星重复单位存在缺陷 (5)重复区域碱基的随机突变。微卫星位 点的侧翼序列使微卫星位点具有特异性，微卫星 身重复单位数的变异是形成微卫星位点多态性的基础。 卫星 特点 卫星 量多且在基因组中分布均匀 微卫星 泛分布于真核生物基因组中，不仅存在于内含子或非编码区，也存在于 编码区 及染 色体上的 其它任 一区 。据报道 ，在哺 乳动 物中几乎 每个基 因都至少存在一个微卫星标记。 态性丰富 微卫星 中各位 点上 不 同等位 基因的 重复 单 位数目 是高度 变异 的 ，而且 重复单位的序列也可能不完全相同，因此微卫星显示了高度的多态性。通过对微卫星 究， 可在 生产中选 取数个 与生 产性能相 连锁的 微卫 星标记， 在这些 位点上对所 研究品 种或 品系进行 分析， 计算 父本与母 本间的 遗传 距离来进 行杂种 优势预测，或者直接通过统计模型来分析生产性状与微卫星的相关性以及其他研究。 微卫星多态性分析有两种方式 :一种是对于己有的微卫星 在数据库中直接寻找适合的引物，对基因组进行 增和测序凝胶电泳来分析微卫星 另一 种是 对于未知 序列， 则要 先建立基 因文库 ，然 后用人工 合成的 寡核昔酸探 针杂交 ，获 得阳性克 隆，提 取质 粒后利用 载体插 入位 点两端的 已知序 列设计引物 ， 再去 测定 插入片段 的序列 ，即 可清楚 地 知道某 一微 卫星位点 及其侧 翼序列结构，最后在微卫星 端侧翼序列选出合适的 物，检测基因组样品中微卫星 多态性。再进一步分析计算等位基因在研究群体中的基因频率及群体中各位点的杂合度等。 卫星的保守性 大多数微卫星具有种保守性和家系保守性。 995)用牛的 微卫星引物分别在羊、马及人的基因组中进行扩增发现：在羊中 56%的引物可扩增出特异产物，中国农业科学院硕士学位论文 第一章 绪论 8 其中 42%的 扩 增 产 物 表 现 多 态 性 ， 而 在 马 和 人 中 则 未 扩 增 出 多 态 产 物 。 龚 明 川（ 2004）用 16 对鼠微卫 星位点的引物，以家兔的基因组为模版进行扩增，有 5 对引物扩增出产物，并呈现出一定多态性。 从目前的资料看，可以确定微卫星位点在紧密相关的物种间具有位置保守性，但在多大 程度上 具有 保守性， 以及这 种保 守