大学分子生物学试题及参考答案

填空题1、分子生物学研究内容主要包括以下四个方面DNA重组技术、基因表达调控研究基因组、功能基因组与生物信息学和生物大分子的结构功能研究2、原核生物中一般只有一条染色体且大都带有单拷贝基因，只有很少数基因是以多拷贝形式存在，整个染色体DNA几乎全部由功能基因与调控序列所组成。3、核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体和由大约200BPDNA组成的。八聚体在中间，DNA分子盘绕在外，而H1则在核小体的外面。4、错配修复系统根据“保存母链，修正子链”的原则，找出错误碱基所在的DNA链，进行修复。5、基因表达包括转录和翻译两个阶段，转录阶段是基因表达的核心步骤，翻译是基因表达的最终目的。6、10位的TATA区和35位的TTGACA区是RNA聚合酶与启动子的结合位点，能与因子相互识别而具有很高的亲和力。7、核糖体小亚基负责对模板MRNA进行序列特异性识别，大亚基负责携带氨基酸及TRNA的功能8、DNA后随链合成的起始要一段短的_RNA引物_，它是由_DNA引发酶_以核糖核苷酸为底物合成的。9、帮助DNA解旋的_单链DNA结合蛋白_与单链DNA结合，使碱基仍可参与模板反应。10、真核生物的MRNA加工过程中,5端加上_帽子结构_，在3端加上_多腺苷化尾_，后者由_POLYA聚合酶_催化。如果被转录基因是不连续的，那么，_内含子_一定要被切除，并通过_剪接_过程将_外显子_连接在一起。这个过程涉及很多RNA分子，如U1和U2等，它们被统称为_SNRNA_。它们分别与一组蛋白质结合形成_SNRNP_，并进一步地组成40S或60S的结构，叫_剪接体_。二、选择题1、C2、A3、D4、B5、B6、ACE7、C8、BC9、AC10、CD1、证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎链球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（C）A从被感染的生物体内重新分离得到DNA，作为疾病的致病剂BDNA突变导致毒性丧失C生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能DDNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子2、1953年WATSON和CRICK提出（A）（A）多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋（B）DNA的复制是半保留的，常常形成亲本子代双螺旋杂合链（C）三个连续的核苷酸代表一个遗传密码（D）遗传物质通常是DNA而非RNA3、原核细胞信使RNA含有几个功能所必需的特征区段，它们是（D）（A）启动子，SD序列，起始密码子，终止密码子，茎环结构（B）启动子，转录起始位点，前导序列，由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF，尾部序列，茎环结构（C）转录起始位点，尾部序列，由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF，茎环结构（D）转录起始位点，前导序列，由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF，尾部序列4、下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述（B）（A）因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物（B）全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物（C）三个全酶在转录起始点形成的复合物（D）因子、核心酶和促旋酶形成的复合物5、色氨酸操纵子的调控作用是受两个相互独立的系统控制的，其中一个需要前导肽的翻译，下面哪一个调控这个系统（B）（A）色氨酸（B）色氨酰TRNATRP（C）色氨酰TRNA（D）CAMP二）多选题6、DNA的变性（ACE）（A）包括双螺旋的解链B）可以由低温产生（C）是可逆的（D）是磷酸二酯键的断裂（E）包括氢键的断裂7、DNA在30NM纤丝中压缩多少倍（C）（A）6倍（B）10倍（C）40倍（D）240倍8、TRNA参与的反应有（BC）（A）转录（B）反转录（C）翻译（D）前体MRNA的剪接9、对于一个特定的起点，引发体的组成包括（AC）（A）在起始位点与DNAG引发酶相互作用的一个寡聚酶（B）一个防止DNA降解的单链结合蛋白（C）DNAB解旋酶和附近的DNAC,DNAT,PRIA等蛋白（D）DNAB，单链结合蛋白，DNAC,DNAT,PRIA蛋白和DNAG引发酶（E）DNAB解旋酶，DNAG引发酶和DNA聚合酶LLL10、下面哪些真正是乳糖操纵子的诱导物（CD）（A）乳糖（B）ONPG（C）异丙基半乳糖苷（D）异乳糖三、判断题1、错2、错3、正确4、正确5、正确6、错7。对8、对9、对10对1、高盐和低盐条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程可看作是一个复性（退火）反应。（）2、B型双螺旋是DNA的普遍构型，而Z型则被确定为仅存在于某些低等真核细胞中。（）3、所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板，这样产生的新的双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成。（）4、“模板”或“反义”DNA链可定义为模板链是被RNA聚合酶识别并合成一个互补的MRNA,这一MRNA是蛋白质合成的模板。（）5、DNA的53合成意味着当在裸露3OH的基团中添加DNTP时，除去无机焦磷酸DNA链就会伸长。（）6、在先导链上DNA沿53方向合成，在后随链上则沿35方向合成。（）7、多顺反子MRNA是协同调节的原因。（）8、LAC阻遏物是一种由4个相同的亚基组成的四聚体。（）9、CAP和CRP蛋白是相同的。（）10、ARAC蛋白既可以作为激活蛋白，又可以作为阻遏蛋白起作用。（）三、判断题四、名词解释2、碱基切除修复研究发现，所有细胞中都带有不同类型、能识别受损核酸位点的糖苷水解酶，它能特异性切除受损核苷酸上的N糖苷键，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。DNA分子中一旦产生了AP位点，AP核酸内切酶就会把受损核苷酸的糖苷磷酸键切开，并移去包括AP位点核苷酸在内的小片段DNA，由DNA聚合酶I合成新的片段，最终由DNA连接酶把两者连成新的被修复的DNA链。3、有意义连（SENSESTRAND）与MRNA序列相同的那条DNA链称为编码链（CODINGSTRAND）或称有意义连（SENSESTRAND）。4、锌指结构锌指结构家族蛋白大体可分为锌指、锌钮TWIST和锌簇CLUSTER结构，其特有的半胱氨酸和组氨酸残基之间氨基酸残基数基本恒定，有锌参与时才具备转录调控活性。重复的锌指样结构都是以锌将一个螺旋与一个反向平行片层的基部以锌原子为中心，通过与一对半胱氨酸和一对组氨酸之间形成配位键相连接，锌指环上突出的赖氨酸、精氨酸参与DNA的结合。5、物理图人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段（序列标签位点，SEQUENCETAGGEDSITE，STS）为“路标”，以碱基对（BP，KB，MB）作为基本测量单位（图距）的基因组图。任何DNA序列，只要知道它在基因组中的位置，都能被用作STS标签。物理图的主要内容是建立相互重叠连接的“相连DNA片段群”（CONTIGS），并用PCR方法予以证实。五、简答题1、解释在DNA复制过程中，后随链是怎样合成的。后随链的引发过程往往由引发体（PRIMOSOME）来完成。引发体由6种蛋白质N、N、N、DNAB、C和I共同组成，只有当引发前体（PREPRIMOSOME）把这6种蛋白质合在一起并与引发酶（PRIMASE）进一步组装后形成引发体，才能发挥其功效。引发体像火车头一样在滞后链分叉的方向上前进，并在模板上断断续续地引发生成滞后链的引物RNA短链，再由DNA聚合酶III作用合成DNA，直至遇到下一个引物或冈崎片段为止。由RNASEH降解RNA引物并由DNA聚合酶I将缺口补齐，再由DNA连接酶将两个冈崎片段连在一起形成大分子DNA。3、转座作用的遗传学效应。转座引起插入突变。转座产生新的基因。转座产生的染色体畸变。转座引起的生物进化。4、因子的作用。亚基可能与核心酶的组装及启动子识别有关，并参与RNA聚合酶和部分调节因子的相互作用。因子可以极大地提高RNA聚合酶对启动子区DNA序列的亲和力。因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶专一性识别模板上的启动子。因子不仅增加聚合酶对启动子的亲和力，还降低了它对非专一位点的亲和力。5、原核与真核生物MRNA的特征比较。原核生物MRNA的特征1半衰期短。2许多原核生物MRNA以多顺反子的形式存在。3原核生物MRNA的5端无帽子结构，3端没有或只有较短的多聚（A）结构。真核生物MRNA的特征1真核生物MRNA的5端存在“帽子”结构。2绝大多数真核生物MRNA具有多聚A尾巴。6、I类内含子的自我剪切过程。在I类内含子切除体系中，鸟苷或鸟苷酸的3OH作为亲核基团攻击内含子5端的磷酸二酯键，从上游切开RNA链。再由上游外显子的自由3OH作为亲核基团攻击内含子3位核苷酸上的磷酸二酯键，使内含子被完全切开，上下游两个外显子通过新的磷酸二酯键相连。7、SANGER双脱氧链终止法。英国剑桥大学分子生物学实验室的FSANGER等人于1977年发明了利用DNA聚合酶的双脱氧链终止原理测定核苷酸序列的方法。由于这种方法要求使用一种单链DNA模板和一种适当的DNA引物，因此有时也称为引物合成法或酶催引物合成法。它利用了DNA聚合酶所具有的两种酶催反应的特性第一，DNA聚合酶能够利用单链的DNA作模板，合成出准确的DNA互补链；第二，DNA聚合酶能够利用2，3双脱氧核苷三磷酸作底物，将其掺入到寡核苷酸链的3末端，从而终止DNA链的生长。9、假定你从一新发现的病毒中提取了核酸。请用最简单的方法确定1）它是DNA还是RNA（2）它是单链还是双链确定碱基比率。如果有胸腺嘧啶，为DNA，如果有尿嘧啶，则为RNA。如果为双链分子，那么A与T（或U）的量以及G或C的量应相等。10、热激蛋白调控的基因表达机制。许多生物在最适温度范围以上，能受热诱导合成一系列热休克蛋白（HEATSHOCKPROTEIN）。受热后，果蝇细胞内HSP70MRNA水平提高1000倍，就是因为热激因子（HEATSHOCKFACTOR，HSF）与HSP70基因TATA区上游60BP处的HSE相结合，诱发转录起始。在没有受热或其他环境胁迫时，HSF主要以单体的形式存在于细胞质和核内。单体HSF没有DNA结合能力，HSP70可能参与了维持HSF的单体形式。受到热激或其他环境胁迫时，细胞内变性蛋白增多，它们都与HSF竞争结合HSP70，从而释放HSF，使之形成三体并输入核内。HSF一旦形成三体，便拥有与HSE特异结合、促进基因转录的功能。这种能力可能还受磷酸化水平的影响，因为热激以后，HSF不但形成三体，还会迅速被磷酸化。HSF与HSE的特异性结合，引起包括HSP70在内的许多热激应答基因表达，大量产生HSP70蛋白。随着热激温度消失，细胞内出现大量游离的HSP70蛋白，它们与HSF相结合，形成没有DNA结合能力的单体并脱离DNA。六、问答题1、描述蛋白质的生物合成过程。要点蛋白质的生物合成是一个比DNA复制和转录更为复杂的过程。它包括翻译的起始核糖体与MRNA结合并与氨基酰TRNA生成起始复合物。肽链的延伸由于核糖体沿MRNA5端向3端移动，开始了从N端向C端的多肽合成，这是蛋白质合成过程中速度最快的阶段。肽链的终止及释放。核糖体从MRNA上解离，准备新一轮合成反应。2、比较原核生物和真核生物基因调控的异同点。1、转录因子是与称之效应成分的特殊的DNA序列相互作用的DNA结合蛋白，效应成分位于基因的调节区或启动子区。在细菌系统中，这些效应成分称为操纵基因部位。转录因子激活还是阻遏转录取决于启动子前后序列和细胞的生理状态。转录因子的DNA结合活性常常可以被效应分子调节。2、ECOLI中的LAC操纵子是由一套编码用于乳糖代谢的酶的基因。这些基因被转录为单一一条顺反子MRNA的一部分。LAC操纵子的转录受到LACI阻遏物和CAP的调控。乳糖和其它的半乳糖苷，例如IPTG结合LACI阻遏物并且使它的特殊序列结合活性下降1000倍。在乳糖存在下，LAC操纵子被转录，合成乳糖代谢需要的蛋白质。3、CAP是LAC操纵子的正调节剂，当存在乳糖（LACI是非活性的）并且葡萄糖水平低时，它能够很强地促进LAC表达。在这样的条件下，CAPCAMP复合物结合LAC操纵基因并直接与RNA聚合酶的亚基相互作用。人们认为这种相互作用可以促进RNA聚合酶结合启动子和开放起始复合物的形成。4、ARA操纵子受到ARAC活性的正调节，ARAC既可以作为ARA操纵子转录的阻遏物，也可以作为它的激活剂，主要取决于细胞内阿拉伯糖和葡萄糖的浓度。在缺少阿拉伯糖时，ARAC是一个阻遏物结合位于ARA操纵子内的两个分开的操纵基因部位，导致一个抑制DNA环的形成。然而当阿拉伯糖存在以及CAPCAMP复合物存在时，抑制DNA环被破坏，CAPCAMP复合物能促进ARA操纵子的转录。5、TRP操纵子从两个水平上控制色氨酸生物合成酶的生产,取决于细胞内色氨酸的浓度。当色氨酸水平高时，TRP阻遏物色氨酸复合物形成，TRP阻遏物结合TRP操纵子抑制转录。第二水平调控称之衰减作用，当TRPTRNATRP丰富时和一个终止结构形成时，衰减作用使得转录提前终止，导致RNA聚合酶从DNA上脱落下来。6、甾类激素受体是配体依赖性的转录因子，它们通过与靶基因应答成分结合将激素信号直接转导到核。这些受体是诱导还是阻遏转录取决于配体的可利用性和启动子的前后序列。甾类激素受体以同源二聚体与回文DNA序列结合。7、大多数转录因子都含有功能结构域，这些因子中的DNA结合结构域大体有螺旋转角螺旋（HELIXTURNHELIX）、锌指（ZINCFINGERS）和亮氨酸拉链（LEUCINEZIPPERS）3种主要类型。螺旋转角螺旋基元由两个螺旋和一个转角组成，用来结合许多原核生物和某些真核生物中的特异的DNA序列；锌指基元是由锌离子通过配位键与组氨酸和半胱氨酸残基形成的，不同蛋白中的锌指数目不同，锌指蛋白TFIIIA通过结合于基因的转录部分内的控制区调控小的核糖体RNA（5SRRNA）的转录。在亮氨酸拉链基元中相邻链内的亮氨酸象两手手指那样交叉锁住，提供了可将两个螺旋结合在一起的疏水堆积相互作用。这种基元被不同的真核生物转录因子用来产生用于结合DNA的二聚体结构。3、衰减作用如何调控大肠杆菌中色氨酸操纵子的表达转录的弱化理论认为MRNA转录的终止是通过前导肽基因的翻译来调节的。因为在前导肽基因中有两个相邻的色氨酸密码子，所以这个前导肽的翻译必定对TRNATRP的浓度敏感。当培养基中色氨酸的浓度很低时，负载有色氨酸的TRNATRP也就少，这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢，当4区被转录完成时，核糖体才进行到1区（或停留在两个相邻的TRP密码子处），这时的前导区结构是23配对，不形成34配对的终止结构，所以转录可继续进行，直到将TRP操纵子中的结构基因全部转录。而当培养基中色氨酸浓度高时，核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在4区被转录之前，核糖体就到达2区，这样使23不能配对，34区可以自由配对形成茎环状终止子结构，转录停止，TRP操纵子中的结构基因被关闭而不再合成色氨酸。所以，弱化子对RNA聚合酶的影响依赖于前导肽翻译中核糖体所处的位置。一、填空（每空1分，共15分）1DNA修复包括3个步骤核酸外切酶对DNA链上不正常碱基的识别与切除，DNA聚合酶I酶对已切除区域的重新合成，连接酶对剩下切口的修补。2真核生物的序列大致可以分为不重复序列，中度重复序列和高度重复序列；3转座子的类型有单拷贝序列和复合转座子，TNA家族和转座噬菌体；4RNA的转录包括转录启始，延伸（延长）和终止三过程；5TRNA的种类有起始TRNA，延伸TRNA，同工TRNA和校正TRNA；6蛋白质运转可分为两大类若某个蛋白质的合成和运转是同时发生的，则属于翻译运转同步机制运转同步机制；若蛋白质从核糖体上释放后才发生运转，则属于翻译后运转机制运转机制；7在PH80时核酸分子带负电，在电场下向正级移动；8质粒DNA及其分离纯化的方法主要有氯化铯密度梯度离心和碱变性法；9乳糖操纵子的体内功能性诱导物是别乳糖；10染色体中参与复制的活性区呈Y型结构，称为复制叉；二、选择选择1C2D3C4A5D6A7A8A9B10C1DNA的二级结构指（C）；A是指4种核苷酸的连接及其排列顺序，表示了该DNA分子的化学构成；B是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构；C是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。2下列哪一种蛋白不是组蛋白的成分（D）AH1BH2A、H2BCH3、H4DH53下面那一项不属于原核生物MRNA的特征（C）A半衰期短B存在多顺反子的形式C5端有帽子结构D3端没有或只有较短的多聚（A）结构41972年，第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是（A）AECORIBECOBCECOCDECORII5下面那项不属于原核生物操纵元的结构DA启动子B终止子C操纵子D内含子6下列叙述不正确的是AA共有20个不同的密码子代表遗传密码B每个核苷三联体编码一个氨基酸C不同的密码子可能编码同一个氨基酸D密码子的第三位具有可变性7反密码子中那个碱基对参与了密码子的简并性（摇摆）（A）A第一个B第二个C第一个与第二个D第三个8SHINEDALGARNO顺序SD顺序是指AA在MRNA分子的起始码上游813个核苷酸处的顺序B在DNA分子上转录起始点前813个核苷酸处的顺序C16SRRNA3端富含嘧啶的互补顺序D启动基因的顺序特征9下列有关TATA盒HOGNESSBOX的叙述,哪个是正确的BA它位于第一个结构基因处B它和RNA聚合酶结合C它编码阻遏蛋白D它和反密码子结合10TRNA的分子结构特征是CA密码环B5端有CCAC有反密码环和3端CCAD有反密码环和5端CCA三、判断题（每题1分，共10分）123456789101双链DNA中作为模板的那条链称为有意义链；（）2转录原点记为1，其上游记为正值，下游记为负值；（）3TRNA都必须通过A位点到达P位点，再由E位点离开核糖体；（）4琼脂糖凝胶分辨DNA片段的范围为0250KB之间，聚丙烯酰胺凝胶，其分辨范围为1个碱基对到1000个碱基对之间；（）5在先导链上DNA以53方向合成，在后随链上则沿35方向合成；（）6DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶；（）7在转录终止子柄部的AT碱基对可以增强结构的稳定性；（）8RNA聚合酶同操纵基因结合（）9转座要求供体和受体位点之间有同源性10高等真核生物的大部分DNA是不编码蛋白质的（）1突变是指可以通过复制而遗传的DNA结构的任何永久性改变。2启动子是一段位于结构基因5端上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与范本DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。3翻译指以新生的MRNA为模板，把核苷酸三联遗传密码子翻译成氨基酸序列、合成多肽链的过程，是基因表达的最终目的。4基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，使之进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持续稳定的繁殖和表达。5细菌转化是指一种细菌菌株由于捕获了来自另一种细菌菌株的DNA而导致性状特征发生遗传改变的生命过程。6基因家族是指真核细胞中许多相关的基因常常按功能成套组合，被称为基因家族9PCR是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,即在DNA聚合酶作用下，经过DNA解链（变性）、引物与模板DNA相结合（退火）、DNA合成（链的延伸）三步，不断重复，最终将目的核酸扩增的技术。7应答元件是指能与某个（类）专一蛋白因子结合，从而控制基因特异表达的DNA上游序列简答题1简述真核生物与原核生物转座模式的异同点；相似处靶位点中STAGGERCUT序列以DR形式出现在转座因子两侧转座因子的IR序列是转座酶的识读和作用的位点转座子的准确切除将引起靶基因的回复突变不同点；原核生物COPY的复制与转移；转座与切除是不同的事件；非准确切除表现缺失，倒位效应。真核生物COPY的复制与转移，但多数情况为切除后再整合；切除、整合、转座为同一事件的不同过程；非准确切除主要表现FOOTPRINT效应。2简述原核生物RNA聚合酶各组成部分的主要功能；位于前端的因子使双链解链为单链；位于尾端的因子使单链新聚合为双链、因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶专一性识别模板上的启动子、因子完成NTP之间的磷酸酯键的连接、因子促使RNAPOL与非模板链（SENSESTRAND）结合3简述核糖体的活性位点有那些；核糖体包括至少5个活性中心，即MRNA结合部位、结合或接受AATRNA部位（A位）、结合或接受肽基TRNA的部位、肽基转移部位（P位）及形成肽键的部位（转肽酶中心），此外还有负责肽链延伸的各种延伸因子的结合位点。4简述抗菌素对蛋白质合成抑制的可能作用方式；抗菌素对蛋白质合成的作用可能是阻止MRNA与核糖体结合（氯霉素），或阻止AATRNA与核糖体结合（四环素类），或干扰AATRNA与核糖体结合而产生错读（链霉素、新霉素、卡那霉素等），或作为竞争性抑制剂抑制蛋白质合成。5简述分子生物学研究的三大理论和两大技术保证；三大理论基础140年代确定了遗传信息的携带者，即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质，解决了遗传的物质基础问题；250年代提示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机制,解决了基因的自我复制和世代交替问题；350年代末至60年代，相继提出了“中心法则“和操纵子学说,成功地破译了遗传密码，充分认识了遗传信息的流动和表达。两大技术保证1DNA的体外切割和连接，2DNA的核苷酸序列分析技术生物学研究的三大理论和两大技术保证；6简述核酸杂交的原理；将带有互补的特定核苷酸序列的单链DNA或RNA混合在一起，其相应的同源区段就会退火形成双链结构。如果退火的核酸来自不同的生物有机体，所形成的双链分子就被称为杂种核酸分子8述原核生物的转录后调控方式；（1）可诱导调节（2）可阻遏调节（1）可诱导调节是指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由原来关闭的状态转变为工作状态，即在某些物质的诱导下使基因活化。（2）可阻遏调节这类基因平时都是开启的，处在产生蛋白质或酶的工作过程中，由于一些特殊代谢物或化合物的积累而将其关闭，阻遏了基因的表达。六、问答题区别可诱导和可阻遏的基因调控方式。A卷一、填空题1分子生物学是从分子水平研究生命现象、生命的本质。生命活动及其规律的科学。2人类基因组包括两个部分DNA即染色体DNA（或单倍体DNA）（核内DNA05分）和染色体外DNA（线粒体DNA）（核外DNA05分）3主要的DNA修复方式重组修复、切除修复和SOS修复。4真核生物转录水平的调控主要是通过顺式作用元件、反式作用因子和RNA聚合酶的相互作用来完成。5可用于分析基因转录水平变化的技术有NORTHERNBLOTDNA芯片（核酸分子杂交05分）和RTPCR。6反义RNA是指能与MRNA互补配对的RNA分子。7基因突变主要是DNA一级结构的改变，其分子机制可以是替换、插入或缺失等。8基因治疗的策略基因添加（增补）、基因干预、基因置换、导入自杀基因、基因修饰。9在特定环境信号刺激下，有些基因的表达表现为开放或增强，这种表达方式称为诱导表达，相反，有些基因的表达表现为关闭或下降，这种表达方式称为阻遏表达。10写出三种真核细胞转染的方法磷酸钙共沉淀法、电穿孔法、DEAE葡聚糖法、显微注射法、脂质体介导法。二、单项选择题1增强子的作用是（B）A增强DNA复制B增强基因转录C增强基因稳定性D增强RNA的稳定性2反式作用因子的激活方式不包括（D）A表达式调节B共价修饰C蛋白质相互作用DDNA成环3以下哪项不是目前使用的研究转录子组的主要方法（D）A基因芯片技术B表达系列分析C差异显示PCRDWESTERNBLOT4无义突变是（B）A产生另一种氨基酸序列不同的蛋白质B突变后产生缩短的多肽链C产生的一种氨基酸序列相同的蛋白质D突变毫无意义5质粒是（A）A环状双链DNAB线性双链DNAC环状单链DNAD线性单链DNA6可检测基因拷贝数变化的是（C）A生物质谱技术B双向电泳CSOUTHERNBLOTDRNAI7以下哪种因素不直接影响转录的是（D）A启动子B阻碍蛋白C基因激活蛋白DSD序列8限制性核酸内切酶可对（A）A双链DNA的特异部位进行切割B单链DNA的特异部位进行切割C多肽链的特异部位进行切割DMRNA的特异部位进行切割9以下哪项是原核生物基因组的结构特点（C）A由DNA或RNA组成B有单链、双链之分C操纵子结构D与组蛋白结合10以下哪项属于启动子和上游启动子元件（C）A内含子B外显子CTATA盒D终止子三、简答题2简述乳糖操纵子的结构有三个结构基因Z、Y、A，（1分），启动子（P）、（1分），操纵元件（O）、（1分）CAP结合位点、（1分），启动子、操纵元件和CAP结合位点一起构成糖操纵子的调控区、（1分）（如果不写调控区，写I基因是调节基因，编码阻遏蛋白。可给1分）。3什么是SOS修复指DNA损伤严重时，应急而诱导产生的修复作用，称为SOS修复。（1）当DNA双链发生高密度大片段损伤,原有的DNA聚合酶活性减低。（1）细胞紧急启动应急修复系统，诱导产生新的DNA聚合酶或修饰原有的DNA聚合酶。（1）这种新的DNA聚合酶或修饰的DNA聚合酶活性低，识别碱基的精度差，无校对功能，（1）因此易造成DNA复制错误，甚至引起基因突变。（1）4什么是错义突变由于DNA分子中碱基的取代（1）,经转录产生MRNA后,相应的密码子发生了变化1分,使决定某一氨基酸的密码子变为另一种氨基酸的密码子,（1）能使它所编码的蛋白质的氨基酸组成和排列顺序都发生了改变1分。这种基因突变叫错义突变。（1）5WHATISRNAINTERFERENCERNAIRNAI即RNA干扰（涉）。（1）是将一段短双链的RNA1分序列导入机体或细胞中,（1）诱导机体或细胞中与之有同源的序列MRNA发生降解，（1）导致基因的表达受到抑制,甚至表达受到完全抑制的现象。（1）6简述PCR的应用进行DNA1分体外扩增1分,基因克隆1分,分析基因拷贝数1分,基因诊断1分。7WHATISGENETHERAPY基因治疗（1分）是将目的基因1分导入靶细胞内（1分），成为宿主细胞遗传物质的一部分（1分），目的基因表达产物对疾病起治疗作用（1分）。8简述人类基因组计划的研究目标及研究内容研究目标阐明构成人类的全部DNA的结构（1分）；阐明基因的编码方式和分布特点（1分）；理解基因及其调控序列之间的相互关系（1分）；理解DNA全部序列所蕴藏的意义（1分）。研究内容完成遗传图谱、物理图谱、序列图谱、转录图谱分析（1分）。四、论述题1已知一个基因的CDNA序列，现在要把该基因插入质粒载体中，论述其基因克隆的过程。获得目的基因（1分）根据该基因的CDNA序列从CDNA文库中获得（1分）人工合成（1分）提取MRNA,RTPCR扩增获得目的基因（1分）选择合适的载体1分DNA分子的体外连接1分粘性末端法；平端连接（1分）人工接头法同聚体尾法（1分）将重组DNA导入宿主细胞1分用转化法（1分）转染法（1分）目的基因的筛选和鉴定1分遗传学方法或答抗生素法或蓝白筛选（1分）免疫学方法核酸杂交法PCR技术（1分）酶切鉴定回答问题清晰（1分）2论述核酸分子杂交SOUTHERNBLOT和NORTHERNBLOT的基本原理及其在基因诊断中的应用。核酸分子杂交是分子生物学研究的基础技术之一，从整体上可分为SOUTHERNBLOT和NORTHERNBLOT两大类SOUTHERNBLOT用于基因DNA分子的检测（1分）。如果基因拷贝数发生变化（增多或减少），但基因序列没有改变，就可以根据基因序列合成探针（1分）；利用同源互补序列可以退火形成异源双链（1分）的原理，探测染色体上能与探针结合的DNA序列（1分）。如果将两部分综合起来作答，需紧扣“探针”、“同源互补序列”、“异源双链”等关键点，如用“同源/互补序列”给1分；如答“不同来源的互补核酸序列”给1分）。SOUTHERNBLOT在基因诊断中多用于检测特异性DNA的存在（1分），包括DNA片段的定位和测定分子量（1分）；进行限制性酶谱分析（1分）及基因突变分析（1分）。NORTHERNBLOT则用于RNA分子的检测，其原理和操作基本过程与SOUTHERNBLOT相似（1分）。在基因诊断中用于RNA的定性及相对定量B卷题一、填空题12真核生物转录水平的调控主要是通过顺式作用元件（启动子）、反式作用因子（转录因子）和RNA聚合酶的相互作用来完成。13反义RNA是指能与MRNA互补配对的RNA分子。14基因突变主要是DNA一级结构的改变，其分子机制可以是替换、插入或缺失（倒位）等。5SOUTHERNBLOT可用于检测DNA，NORTHERNBLOT可用于检测RNA,WESTERNBLOT可用于检测蛋白质6人类基因组计划要完成的图谱有遗传图谱、物理图谱、序列图谱和转录图谱。7基因组学是指阐明整个基因组（遗传物质）的结构、结构与功能的关系以及基因之间相互作用的科学。8在基因治疗中常用的抑制基因表达的方法是反义RNA、RNAI（基因敲除）、核酶或者三链DNA技术。9基因诊断的主要技术有核酸分子杂交、PCR扩增（RTPCR）、DNA序列测定、DNA芯片技术。10目前肿瘤基因诊断的主要策略有检测肿瘤染色体异位及融合基因，检测癌基因和抑癌基因，检测肿瘤相关病毒，检测肿瘤标志物或MRNA等。二、单项选择题1能导致蛋白质翻译提前终止的基因突变是_B_A错义突变；B无义突变；C同义突变；D移码突变；2可检测基因拷贝数变化的是AASOUTHERNBLOTB双向电泳C酵母双杂交DRNAI3生物质谱技术常用于D的研究中。A基因组学BRNA组学C转录子组学D蛋白质组学4限制性核酸内切酶可对_A_A双链DNA的特异部位进行切割B单链DNA的特异部位进行切割C多肽链的特异部位进行切割DMRNA的特异部位进行切割5遗传病的间接基因诊断是检测与致病基因连锁的_C_A基因突变B多态性C遗传标志D基因重排6以下哪项不是基因诊断的特点DA高灵敏度B结果稳定C早期诊断D依赖表型改变7将特定的目的基因导入特定的细胞，通过定位重组，矫正原有的缺陷基因的基因治疗策略是AA基因置换B基因添加C基因干预D基因修饰8在基因治疗中基因转移的生物学方法是以B作为基因转移系统，A质粒载体B病毒载体C脂质体D粘粒9适合制备单链DNA的载体是BA粘性质粒BM13噬菌体C逆转录病毒D腺病毒10分子生物学是从D研究生命现象、生命的本质、生命活动及其规律的科学。A细胞水平B转录水平C翻译水平D分子水平三、简答题1什么是基因诊断基因诊断（1分）是利用分子生物学技术,从DNA或RNA水平（1分）检测基因的存在（1分）、分析结构的变异和表达状态（1分），应用基因重组、PCR、核酸杂交、基因芯片的各种分子生物学技术对疾病或症状进行诊断基因突变（1分）指遗传物质发生的可遗传的变异（1分）。基因的核苷酸序列组成及数目发生改变（1分）。常涉及DNA的一级结构（1分）；其分子机制可以是替换，插入，缺失，重排等（1分）。3简述切除修复的大致过程。切除修复是修复DNA损伤最为普遍的方式。修复过程需要多种酶的一系列作用（1分），基本步骤如下首先由核酸酶识别（1分）DNA的损伤位点，在损伤部位的5侧切开磷酸二酯键。不同的DNA损伤需要不同的特殊核酸内切酶来识别和切割；由53核酸外切酶将有损伤的DNA片段切除（1分）；在DNA聚合酶的催化下，以完整的互补链为模板，按53方向DNA链，填补已切除的空隙（1分）；由DNA连接酶将新合成的DNA片段与原来的DNA断链连接起来。这样完成的修复能使DNA恢复原来的结构（1分）。4PCR在基因分析和基因诊断中有哪些应用进行DNA体外扩增1分、基因克隆1分（或PCR原理2分），分析基因拷贝数1分（定性定量分析）（PCRSSCP或DNA序列分析或甲基化分析）1分，基因突变的诊断1分5RNAI技术的原理是什么长双链RNA被细胞内的双链RNA（1分）特异性核酸酶切成2123个碱基对的短双链RNA，称为小干扰性RNA（1分），SIRNA与细胞内的某些酶和蛋白质形成复合体（1分），该复合体可识别与SIRNA有同源序列的MRNA（1分），并在特异的位点将该MRNA切断（1分）。（或基本意思一致也给分）。6葡萄糖不存在和乳糖存在时乳糖操纵子如何进行复合调控葡萄糖不存在CAP1分发挥正调控作用1分，乳糖存在，阻遏蛋白由于诱导剂的存在1分而失去负调控作用1分，基因被打开，启动转录1分（或基本意思一致也给分）7什么是诱导表达和阻遏表达在特定环境信号刺激下1，有些基因的表达表现为开放或增强1，这种表达方式称为诱导表达1，相反有些基因的表达表现为关闭或下降1，这种表达方式称为阻遏表达1。（或基本意思一致也给分）8基因治疗的基本策略有哪些基因置换（1分）指将特定的目的基因导入特定细胞，通过定位重组，以导入的正常基因置换基因组内原有的缺陷基因。基因添加（1分）通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。基因干预（1分）采用特定的方式抑制某个基因的表达，或者通过破坏某个基因的结构而使之不能表达，以达到治疗疾病的目的。自杀基因治疗（1分）将“自杀”基因导入宿主细胞中，这种基因编码的酶能使无毒性的药物前体转化为细胞毒性代谢物，诱导靶细胞产生“自杀”效应1分。（或答基因修饰，基因抑制也给分）一、判断题；对的打“”，错的打“X”1现代分子生物学的研究几乎都是围绕核酸和蛋白质进行的。（）2原核生物翻译效率受SD序列顺序的影响，与SD序列的位置无关。（X）3重组修复是先进行复制再进行切除修复。（）4在同样的环境条件下，具有不同遗传背景的人发病的几率或病情的进展不同。（）5点突变是指一个嘌呤碱基被嘧啶碱基取代或一个嘧啶碱基被嘌呤碱基取代。（X）6基因诊断可检测基因突变引起的疾病，不能检测外源性致病基因引起的疾病。（X）7基因置换是通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。（）8差异显示PCR是目前使用的研究转录子组的主要方法之一。（）9NORTHERNBLOT常用于检测RNA,WESTERNBLOT常用于检测DNA。（X）10反义RNA可增强基因表达，RNA干涉可沉默基因表达。（X）二、单项选择题1以下哪项属于真核生物基因的顺式作用元件（C）A内含子B外显子C增强子D操纵子2以下哪种病毒的基因组是单股负链RNAB）ASARS冠状病毒BH5N1禽流感病毒C呼肠孤病毒D人类免疫缺陷病毒3原核生物与真核生物基因组比较，以下哪项是原核生物的特点（A）A基因密度高B无操纵子结构C有多基因家族和假基因D多复制起点4以下不产生高度多态性的重复序列是（A）A大卫星DNAB小卫星DNAC微卫星DNAD回文结构5当DNA损伤严重时，应急而诱导产生的修复作用是以下哪项（D）A直接修复B切除修复C重组修复DSOS修复6反式作用因子的激活方式不包括（C）A表达式调节B共价修饰CDNA成环D蛋白质相互作用7真核生物的转录调控作用主要是反式作用因子与顺式作用元件结合后影响以下哪项的形成（B）ARNA聚合酶B转录起始复合物C启动子DDNA结合域8可检测基因拷贝数变化的是（C）A生物质谱技术B双向电泳CPCRDRNAI9可用于分析基因转录水平的变化的是（A）ARTPCRBPCRSSCPCSOUTHERNBLOTDDNA测序10SOUTHERN杂交的原理是根据基因序列合成探针，利用同源互补序列可以退火形成（A）A杂交双链DNAB杂交三链DNAC杂交双链DNARNAD杂交双链RNA11反义RNA是指能与以下哪项互补配对的RNA分子（D）ACDNAB编码链DNAC反义链的DNADMRNA12RNA干涉是指由以下哪项诱导的同源MRNA降解过程（A）A双链RNAB单链RNAC双链DNAD单链DNA13以下哪项不是真核细胞转染的方法（D）A磷酸钙沉淀法B电穿孔法C脂质体介导法D氯化钙转化法14在大肠杆菌中表达真核细胞的目的基因时，下列描述正确的是（A）A目的基因必须是CDNAB目的基因必须是基因组DNAC目的基因必须是MRNAD必须保留目的基因5端非编码区15无义突变是（B）A产生另一种氨基酸排列顺序不同的蛋白质B突变后产生缩短的多肽链C产生的一种氨基酸序列相同的蛋白质D不产生异常蛋白质16移码突变由以下哪种原因造成（B）A点突变或替换B缺失或插入C倒位或易位D转换或颠换17以下哪项不是基因诊断的特点（D）A高灵敏度B结果稳定C早期诊断D依赖表型改变18在基因治疗中基因转移的生物学方法是以什么作为基因转移系统（B）A质粒载体B病毒载体C脂质体D粘粒19在基因治疗中常用的抑制基因表达的技术不包括（CA反义RNABRNAIC双链DNAD核酶20生物质谱技术常用于以下哪项的研究中（D）A基因组学BRNA组学C转录子组学D蛋白质组学三、填空题1分子生物学是从分子水平研究生命现象、生命的本质、生命活动及其规律的科学。2真核生物的结构基因转录为单顺反子MRNA，并需要转录后加工。3原核生物转座因子可以分为以下三类插入序列、转座子、MU噬菌体。4切除修复是细胞内最普遍的修复机制，其过程包括识别、切除、合成、连接。5根据切除部位的大小，切除修复可分为两类，其中核苷酸片段切除修复是细胞内更为普遍的修复方式。6色氨酸操纵子受R基因编码的阻遏蛋白调控外，还受L基因编码的衰减子调控。7在特定环境信号刺激下，有些基因的表达表现为关闭或下降，这种表达方式称为阻遏表达。8RTPCR是一种以MRNA为模板的体外扩增CDNA的技术。9RNA诱导的沉默复合物RISC是SIRNA（小干涉性RNA）或短双链RNA与细胞内某些酶和蛋白质形成的复合体。10转基因技术是指将外源基因或目的基因或外源DNA导入受精卵细胞或胚胎干细胞中，通过随机重组插入到染色体DNA中。11基因敲除是指通过同源重组定向地将外源基因插入宿主细胞染色体DNA，从而使特定基因在细胞内或生物活体内失活的过程。12限制性核酸内切酶分为三种类型，其中型限制性核酸内切酶能在DNA分子内部的特异位点，识别和切割双链DNA，其切割位点的序列可知、固定。13在体外连接DNA的方法中，粘性末端最适合DNA片段的连接。14基因一级结构的某个位置增加一个核苷酸或一段核苷酸序列形成的基因结构改变称为插入突变。15基因诊断的主要技术有核酸分子杂交、PCR扩增、DNA序列测定、DNA芯片技术。16制备合适的探针是核酸分子杂交用于基因诊断的关键。17遗传病的间接基因诊断是检测与致病基因连锁的遗传标志（记）。18基因治疗是将目的基因导入靶细胞内，成为宿主细胞遗传物质的一部分，目的基因表达产物对疾病起治疗作用。19人类基因组计划要完成的图谱有遗传图谱、物理图谱、序列图谱和转录图谱。20基因组学是指阐明整个基因组的结构、结构与功能的关系及基因之间相互作用的科学。四、简答题2什么是基因突变基因突变（1分）指遗传物质发生的可遗传的变异（1分）。基因的核苷酸序列组成及数目发生改变（1分），常涉及DNA的一级结构（1分）；其分子机制可以是替换，插入，缺失，重排等（1分）。一、判断题对的打“”，错的打“X”1不对称转录有两方面的含义一是DNA分子上一股可转录，另一股不可转录；二是模板永远在同一条单链上。X）2差异显示PCR是目前使用的研究转录子组的主要方法之一。（）3反式作用因子是指能直接或间接地识别或结合在各顺式作用元件核心序列上的一组DNA序列。（X）4病毒基因可能是单链或双链，闭合环状或线性，DNA或RNA组成。（）5单基因病无论是由同源染色体的一条或两条染色体上的基因突变引发都符合孟德尔遗传规律。（）6不同种类及不同状态的细胞有不同的CDNA文库。（）7复性并不是变性反应的一个简单逆反应过程。8逆病毒载体是一种RNA病毒，其感染颗粒是由包装蛋白包装的两条DNA链组成，两条DNA链5端经氢键连接。（X）9目前检测非限制酶切位点突变的方法有PCRRFLP。（X）10具有催化自我剪接活性的RNA，称之为核酶，打破了“酶必定是蛋白质”的传统观念。（）二、选择题1真核生物基因组与原核生物基因组比较，真核生物基因组具有（D）A多顺反子结构B衰减子C基因是连续的D大量的重复序列2TAQDNA聚合酶不具有以下特性DA53方向的聚合活性B53方向的外切活性C较弱的非模板依赖性D35方向的外切活性3原核生物与真核生物基因组比较，以下哪项是原核生物的特点（A）A基因密度高B无操纵子结构C有多基因家族和假基因D多复制起点4在真核基因表达调控中，能促进转录的速率。（B）A操纵子B增强子C沉默子DTATABOX5色氨酸操纵子的转录终止调控方式除阻遏蛋白的调控外，还包括以下哪项的调控。（B）AI基因B衰减子C操纵基因DRNA聚合酶6真核转录调控作用主要是反式作用因子与顺式作用元件结合后影响以下哪项的形成（B）ARNA聚合酶B转录起始复合物C启动子DDNA结合域7可变数目串联重复属于以下哪种类型（B）A反向重复序列B卫星DNAC中度重复序列D端粒DNA8以下属于功能基因组学研究内容的是（A）A基因表达谱B基因组遗传图谱C基因组物理图谱D基因组测序9碱基置换使氨基酸密码子转变为终止密码子的突变是（B）A同义突变B无义突变C插入突变D终止密码子突变10基因编码序列中中丢失7个核苷酸产生的突变属于（B）A错义突变B移码突变C无义突变D融合突变11紫外线引起DNA突变通常是产生（D）AAABGGCUUDTT12适合制备单链DNA的载体是（B）A粘性质粒BM13噬菌体C逆转录病毒D腺病毒13DNA变性是指（C）ADNA与RNA结合；BDNA与蛋白质解离C两股链分开；D两股链断裂14鉴别RNA的分子杂交称为（A）ANORTHERNBLOTBSOUTHERNBLOTCEASTERNBLTOTDWESTERNBLOT15使热变性的DNA溶液迅速冷却，则只能形成一些（A）A不规则的碱基对B双链DNAC单链DNAD三链DNA16为减少杂交反应中出现的非特异性反应，在杂交前常用的封闭物不包括（C）A鲑鱼精子DNAB小牛胸腺DNAC葡萄糖D脱脂奶粉17将特定的目的基因导入特定的细胞，通过定位重组，矫正原有的缺陷基因是（A）A基因置换B基因添加C基因干预D基因修饰18有关包装细胞叙述不正确的是（C）A包装细胞是通过基因工程技术对细胞进行修饰的B产生病毒结构基因GAG、POL、ENV所编码的蛋白C为逆转录病毒载体包装成为重组病毒提供全套病毒蛋白D包装细胞能转录产生编码完整病毒的基因组RNA19R