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文档简介
临床检验免疫学思考题答案抗原抗体反应一、抗原抗体反应的原理1)AG、AB能特异性结合(内因)AG、AB能特异性结合,是由于AG表位抗原决定簇和ABFAB段(V区)之间的特异性结合,二者在空间结构上是严格互补的。1)AG、AB结合的动力(外因)静电引力(又称库仑引力)它是指抗原和抗体分子上带有相反电荷NH3或COO之间的相互吸引力。例如AB分子上赖氨酸离解层中含有NH3,AG分子上天门冬氨酸离后含有COO,这两者之间就可相互吸引而产生静电引力。该力的大小与两个电荷间距离的平方成反比。距离越近,静电引力就越强。范得华力(又称电子云力)该力是原子与原子、分子与分子间所具有的一种吸引力。当AG、AB两分子外层轨道上的电子相互作用时,电子云由于偶极摆动而产生吸引力,从而促使AG、AB的结合。该力大小小于静电引力。氢键该力是由于分子中的H原子和电负性较大的O、N、S原子间的相互吸引而形成的。氢键对于维持生物大分子(AGAB)的形态和结构有很大作用。它的大小大于范得华力。疏水作用力AB是蛋白质,AG少数是多糖,多数也是蛋白质,那么它们就是胶体物质,在水溶液中就带有NH3或COO极性基团,从而带上正电或负电,成为亲水胶体。当AG表位和ABFAB段相互靠近时,亲水层消失,排斥掉两者间的H2O分子,促进AG、AB的结合。疏水作用力在整个AG、AB反应中提供的作用最大二、抗原抗体反应的特点1)特异性AG、AB的结合实质上是抗原表位和抗体可变区之间的结合。AB可变区可形成一个平穴槽,AG则楔状嵌入,由于两者在化学结构和空间结构上的互补,使得它们的结合具有特异性。这种结合如同钥匙与锁的关系,一把钥匙只能开相应的一把锁2)最适比例AG、AB的结合并不是在任何比例下都进行得充分、完全的。要形成我们肉眼可见的反应(如沉淀、凝集现象等),就涉及到最适比例问题。3)可逆性AG、AB结合形成抗原抗体复合物,这一过程是一个动态平衡,在一定的条件下,反应是可逆的AGABAGAB,其主要原因为AG、AB结合是非共价键结合,不为化学反应。三、影响抗原抗体反应的主要因素自身因素1)AG与AG的理化性质、抗原表位的数目及种类有关;2)AB与AB的来源有关是R型抗体或H型抗体;与AB的特异性、亲合性有关;与AB的浓度有关。外界环境条件1)电解质一般实验室所用电解质都是生理盐水(09NACL),浓度不能过高。浓度过高,会使AB蛋白质优先沉淀而出现盐析现象。2)PH一般为PH68,当PH18,或抗B141岁后抗A116,或抗B18如3岁以上抗A或抗B效价仍05CM曾感染过结核菌,细胞免疫功能好阴性直径25CM表明现处于结核的活动超敏反应的检测1、型超敏反应皮试的原理型当变应原再次进入致敏者皮肤,与吸附在肥大细胞或/和嗜碱性粒细胞上的特异IGE高变区结合,导致肥大细胞或嗜碱性粒细胞脱颗粒,释放生物活性介质如组织胺、白三烯、激肽等。型用皮内注射、皮肤斑贴等方法使变应原进入已致敏机体,体内致敏的T细胞CD4TH1再次遇到相应抗原后,释放出大量细胞因子,如IL2、IFN、TNF、IL3、GMCSF,(1)活化巨噬细胞及NK,增强吞噬细胞作用;(2)吸引WBC到达AG所在部位,促进吞噬;(3)促进T细胞增生和分泌细胞因子,加重局部炎症反应,最后造成局部以单核细胞和淋巴细胞浸润为主的炎症反应。2、比较、型超敏反应皮试抗原、时间、结果、意义)抗原时间结果意义型鱼虾、牛奶、花粉、青霉素等。2030分钟速发型IGE红晕、红斑、风团以及搔痒感判断对所实验的变应原是否过敏型包内寄生菌、微生物、寄生虫、组织抗原、化学物质4872小时迟发型TH1,CTL红肿、硬结或水泡反应或了解机体的细胞免疫功能主要组织相容性复合体及其编码分子重点HLAI、II类分子的结构、分布及意义。组成结构分布意义I类HLAA、B、C由一条链和一条链组成,链的N端胞外区分为1、2、3三个结构区,其中1、2构成抗原结合槽,与处理后的抗原肽结合形成MHC抗原肽复合体。所有有核细胞膜上1、识别和提呈内源性抗原肽2、对CTL的识别起限制性作用II类HLADR、DP、DQ由一条链和一条链组成,两条肽链的胞外区分别有1、2和1、2两个功能区,由1与1共同形成抗原结合槽。抗原提呈细胞如B细胞、巨噬细胞、树突状细胞及活化的T细胞等1、识别和提呈外源性抗原肽2、对TH的识别起限制性作用移植免疫学及其检验技术1、移植排斥反应的类型及产生的原因和避免方法。排斥反应的临床分类分两大类宿主抗移植物反应移植物抗宿主反应、加速超再次反应类型原因避免方法超急性排斥反应受者体内预存有抗供者细胞的抗体(针对HLA),抗体与供体细胞(HLAAG)结合,激活补体,细胞破坏;补体活化产物使血小板凝聚,释放凝血因子X,产生血管内凝血移植前对受体血清与供体细胞进行细胞毒试验CDC试验加速性排斥反应同超级性,但抗体效价及亲和性要CDC试验低些。极少数也可能由致敏淋巴细胞引起。急性排斥反应慢性排斥反应供、受者HLAAG型别不完全一致造成。早期以细胞免疫为主、晚期体液免疫为主尽可能选HLAAG型别一致的供体2、移植物抗宿主反应的概念及产生原因。移植物抗宿主反应多发生在骨髓移植中移植物中免疫活性细胞攻击宿主产生原因(1)宿主免疫活性细胞处于反应无能状态(2)移植物中含有大量的免疫活性细胞3、移植前选择供体应做哪些检测(一)交叉配合试验1检测受体血清中有无抗供体细胞的抗体(1)微量补体依赖的细胞毒试验(COMPLEMENTDEPENDENTCYTOTOXICITY,CDC试验方法受体血清供体LC补体观察细胞死亡情况,大于10应放弃此供体2混合淋巴细胞培养受者LC供者LC观察二者LC的增殖转化程度细胞增殖反应程度与供、受体HLA抗原相容性呈负相关双向、单向培养均可。(2)HLA型别检测(和问题四一样)4、血清学与细胞学鉴定HLA抗原的基因位点是哪些,检测时应采用什么细胞1血清学方法(SEROLOGICALLYDEFINEDANTIGEN,SD抗原)(1)检测位点A、B、C、DR、DQ(2)检测细胞检测A、B、C位点用总淋巴细胞检测DR、DQ位点用B淋巴细胞2细胞分型法(LYMPHOCYTEDEFINEDANTIGEN,LD抗原)检测位点DP待测细胞BLC5、举例解释CDC试验。微量补体依赖的细胞毒试验(COMPLEMENTDEPENDENTCYTOTOXICITY,CDC试验方法受体血清供体LC补体观察细胞死亡情况,大于10应放弃此供体6、移植后监测排斥反应应做哪些检测(1)3HTDR四小时掺入法如患者即将发生排斥反应,实际体内淋巴细胞已被同种异型的HLA抗原刺激,已有增殖分化。取出患者淋巴细胞,加入3HTDR,培养四小时,收获细胞,测CPM,根据CPM值推测T细胞的致敏状态。(2)外周血T细胞计数E花环形成试验CD4/CD8原来低,现在升高,预示急性排斥反应将发生(动态观察)流式细胞仪测(3)补体C3测定在排斥反应时,补体成分消耗增加,导致血清中C3的减少。免疫学检验的质量控制免疫学检测质控的内在品质和外在因素各有哪些如何进行衡量外在因素精密度、准确度、敏感性、特异性等衡量方法精密度用标准差(SD)和变异系数(CV)来衡量其大小。准确度
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