食品科学工程毕业论文-

I论文题目复合添加三种天然抑菌剂的乳清蛋白膜抑菌效果的研究学院及专业本科生指导教师摘要乳清蛋白具有良好的营养特性以及成膜的能力，它可以形成透明、柔软、有弹性、不溶于水的薄膜，且具有优良的氧气、芳香物质和油脂的阻隔性。本研究以乳清浓缩蛋白（WPC80）为主要成膜物质，通过添加天然抑菌剂制成乳清蛋白抗菌膜。先测定NISIN、丁香精油和纳他霉素的最小抑菌浓度，再与乳清蛋白溶液复合，通过单因素试验，以抑菌圈的大小为测定指标研究复合膜的抑菌效果。最后将三种抑菌剂和乳清蛋白溶液复合，通过正交试验，仍以抑菌圈的大小为测定指标确定三种天然抑菌剂的最佳加入量。研究表明当NISIN、丁香精油和纳他霉素联合作用时，复合膜的抑菌效果较单独使用时显著增强。300IU/MLNISIN、15丁香精油和60PPM的纳他霉素三者联合作用效果显著强于其他八组。乳清蛋白复合抗菌膜三种抑菌剂的最佳加入量为NISIN300IU/ML、纳他霉素60PPM、丁香精油15。关键词乳清蛋白抗菌膜抑菌性；IISUBJECTSTUDYONTHEANTIMICROBIALPROPERTIESOFEDIBLEWHEYPROTEINCOMPOSITEFILMSUPPLEMENTEDWITHTHREENATURALANTIBACTERIALAGENTSCOLLEGEANDSPECIALTYCOLLEGEOFFOOD对食品的防腐效果随时间延长而降低。故在选择纳他霉素防腐剂量时应考虑被防腐食品的原料污染状况、产品性质、加工工艺、消毒除菌、储存条件、保质时间和产品包装等因素的影响,合理使用纳他霉素,达到最佳防腐效果和最经济的使用浓度,尽可能延长食品的保质期。13可食性抗菌膜131可食性抗菌膜抗菌性食品保鲜膜是指在保鲜膜中添加抗菌剂，通过抗菌剂的缓释和光催化等作用达到抗菌、保鲜目的的一种功能薄膜12。可食性抗菌膜具有以下特点1明显的阻水性，可延缓食品中水和油及其它成分的迁移和扩散；2可选择的透气性和抗渗透能力，阻止食品中风味物质的挥发；3较好的物理机械性能，可提高食品表面机械强度使其易于加工处理；4可以作为食品色、香、味、营养强化和抗氧化物质等的载体；5可与被包装食品一起食用，并且有较好的抑菌作用，对食品和环境无污染，因而在食品工业方面具有广阔的应用前景。近年来，第1章文献综述8在西欧发达国家，过去风行一时的塑料食品包装袋已逐渐被淘汰，被新型的纸质包装袋和可食性包装袋所代替。美国已有50的传统塑料食品包装袋由新型纸质食品包装代替。同时，美国新泽西州的全国淀粉及化学公司的科研人员正利用玉米为原料研制一种新型食品包装材料。世界食品出口大国意大利已明确宣布完全禁止使用塑料食品包装袋包装食品；英国从1991年开始使用一种可食用、薄而透明的薄膜保鲜果蔬；德国、瑞士、澳大利亚等国正逐渐淘汰塑料食品包装袋13；我国也在“九五”期间实施了“绿色包装”工程，即通过控制包装行业的投资方向，逐步发展易挥发、可再利用的包装材料。目前，国内外可食性包装膜的研究进展迅速。抗菌性食品保鲜膜是在成膜材料中加入天然抗菌剂，膜中抗菌剂缓慢释放，在较长的时间内逐渐作用于食品，从而持久的抑制或防止微生物的生长14。可食性抗菌膜主要有4种形式1、将抑菌性物质直接添加到成膜材料中，制成抗菌膜；2、通过特殊处理使抗菌性物质附着在膜表面；3、通过化学键的形式将抗菌性物质与成膜物质固定在一起；4、选择天然具有抗菌性的成膜材料，如壳聚糖等132可食性抗菌膜的抗菌机理可食性抗菌膜应用于食品时主要有两种方式，一是食品与可食性抗菌膜直接接触，这通常是指直接用于浸渍或喷涂食品的膜液，添加到成膜溶液中的抗菌剂一般是非挥发性的，抗菌剂通过在膜材料与食品之间的扩散而不断进入食品中，起到持久的抑菌作用；二是食品与可食性抗菌膜之间存在缝隙，这主要是指经过制膜工艺制备的独立的膜，混入膜材料中的抗菌剂具有挥发性并且耐热性比较好，在这种方式下，抗菌剂主要通过在缝隙、膜材料和食品中的蒸发和迁移达到平衡分布，在食品外部形成一个抑菌的环境15。可食性抗菌膜主要通过直接抗菌或间接抗菌两种途径实现其对食品的保鲜功能。直接抗菌是将某些具有抗菌功能的物质直接添加在载体内制成薄膜，这类薄膜会不断地向与其接触的食品表面释放抗菌物质而实现对食品的防腐；间接抗菌是在载体中添加一些能够调节包装内微环境的物质或利用包装膜的选择透过性来调节包装内微环境而不利于微生物生长和繁殖，从而实现抗菌目的16。直接抗菌常用的抗菌剂包括食品防腐剂、抗生素和溶菌酶等，这类抗菌包装膜研究和使用较为广泛；间接抗菌则常通过调节包装内气体组成和湿度等实现其抗菌功能。河南科技大学本科生毕业论文914本课题的研究目的、意义和内容随着社会的发展，对环境的保护也使人们更加关注食品安全，而食品包装材料的使用是一个重要的方面。关注食品安全从食品包装开始。降低食品包转的成本，能重复使用，减少污染，可持续发展，成为21世纪我们必须面对的重要课题。在我们生活的环境中，塑料造成的白色污染到处可见，我们城市将会被塑料等包装废弃物所包围。所以，面对这严峻的事实，我们应尽量在设训食品包装时，解决好产品和包装的合理定位，尽量采用高性能包装材料和高新包装技术，在保证商品质量的同时，尽量减少包装用料和提高重复使用率，降低综合包装成本，注重生态环境保护，使产品包装与人及环境建立一种共生的和谐关系，不断开发可控生物降解、光降解及水溶性的包装材料，把包装对生态环境的破坏降低到最低的程度。在大力推广绿色食品即无污染、安全、优质、营养类食品的同时，绿色包装的新概念也不断地被人们所重视，它是指有利于人类生存环境的包装，有利于环境保护和资源保护的包装。研究和开发绿色包装是社会发展的必然趋势，也是未来包装市场的竞争热点。绿色包装的技术系统，应该解决包装在使用前后的整个过程中对生态环境的破坏问题，研究和寻找理想的绿色包装技术，对不同的商品要开发研究相应的绿色包装制品和方法。采用生物可降解食品包转材料是解决包装材料的环境污染问题的一个行之有效的方法。乳清蛋白是由干酪生产过程中所产生的副产品乳清，并经过特殊工艺浓缩精制而成，具有很高的营养价值、生物利用价值，并且具有良好的营养特性以及成膜的能力，经过处理可以形成透明、柔软、有弹性、不溶于水的薄膜，而且这种膜在较低的湿度下具有优良的对氧气、芳香物质和油脂的阻隔性。本研究旨在以乳清蛋白和天然抑菌剂为原料，分析比较了不同抑菌剂的不同水平和不同组合对乳清蛋白复合抗菌膜抑菌效果的影响；以抑菌圈的大小为测量指标，确定复合抗菌膜的天然抑菌剂的最佳加入量，开发集防腐抑菌、保健等功能为一体的复合抗菌膜。本文主要的研究内容有三种乳清蛋白复合抑菌膜的制备NISIN、聚赖氨酸、丁香精油最小抑菌浓度的测定测定复合抑菌膜的抑菌效果，通过单因素和人正交试验确定不同抑菌剂的最佳加入量。第1章文献综述10第2章三种天然抑菌剂最小抑菌浓度的测定21材料与设备材料丁香精油（主要成分丁香酚，上海生物化学有限公司）、NISIN（106IU，洛阳市华健生物工程有限公司）、纳他霉素（浙江银象生物工程有限公司）以上均为分析纯。菌种细菌枯草芽孢杆菌BACILLUSSUBTILIS；金黄色葡萄球菌STAPHYLOCOCCUSAUREUS；大肠杆菌ESCHERICHIACOLI；沙门氏菌SALMONELLA；霉菌黑曲霉ASPERGILLUSNIGER；绿色木霉TRICHODERMAVIRIDE酵母粘红酵母RHODOTORULAGLUTINIS以上菌种均由本院微生物教研室提供培养基营养肉汤琼脂培养基（北京奥博星生物技术有限公司，批号20080712）；马铃薯葡萄糖琼脂培养基PDA（北京奥博星生物技术有限公司，批号20081006）；麦芽汁琼脂培养基（广东环凯微生物科技有限公司，批号20080912）；MRS琼脂培养基（北京奥博星生物技术有限公司，批号20080816）仪器和设备JJ1型电动搅拌器金坛市正基仪器有限公司；202型电热恒温干燥箱北京市永光明医疗仪器厂；精密电子天平北京赛多利斯天平有限公司；HHS恒温水浴锅金坛市亿通电子有限公司；移液枪上海荣泰生化工程有限公司；YSQSGH280型手提式压力蒸汽灭菌锅上海华线医用核子仪器有限公司；SWCJ1F型单人双面净化工作台苏州净化设备有限公司；自制有机玻璃皿；烧杯；纱布；滤纸；玻璃棒；涂布棒；接种环；酒精灯；玻璃试管；玻璃培养皿；三角瓶22实验方法221NISIN效价的测定混合培养法首先配制浓度为河南科技大学本科生毕业论文11250IU/ML、500IU/ML、1000IU/ML、2000IU/ML、4000IU/ML的NISIN溶液备用，然后分别取溶液1ML分别注入无菌培养皿中与倒入的9ML培养基混合均匀，得NISIN浓度分别为25IU/ML、50IU/ML、100IU/ML、200IU/ML、400IU/ML的培养基；等其凝固后，将菌悬液均匀涂抹于培养基表面。适温适时培养，观察结果，以完全没有菌生长的最低浓度为NISIN的最低抑菌浓度MIC，并且用无菌水与培养基混合做对照。222丁香精油最低抑菌浓度MIC的测定不同浓度V/V挥发油的制备17，取丁香精油2ML，加1ML吐温80溶解，加无菌水至10ML，得浓度为2ML/10ML，再用无菌水稀释，得浓度分别为15，10，5，25，125备用。然后将各稀释液1ML分别注入无菌培养皿中与倒入的9ML培养基混合均匀，得浓度分别为15，10，025，05，025，0125；等其凝固后，将菌悬液均匀涂抹于培养基表面。适温适时培养，观察结果，以完全没有菌生长的最低浓度为丁香油的最低抑菌浓度MIC。同时用无菌水和10吐温80作对照。223纳他霉素最低抑菌浓度MIC的测定将各种供试菌种用无菌生理盐水制成10111012CFU/L均匀的菌孢子悬液。纳他霉素用蒸馏水制备成不同浓度的悬浮液后分别与细菌和霉菌培养基混合，形成浓度梯度平板，将菌种接种其上，霉菌和酵母放于28的培养箱中培养，细菌放在37的培养箱中培养，观察结果，并设立空白对照组。23结果与分析231NISIN效价表21NISIN对不同菌种效价TAB21THEMINIMALINHIBITINGCONCENTRATIONOFTHENISIN供试菌种PATHOGENICFUNGI浓度IU/ML枯草芽孢杆菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌沙门氏菌粘红酵母菌黑曲霉绿色木霉4002001005025第2章三种天然抑菌剂最小抑菌浓度的测定12CK1注以上数据均为3次试验重复。“CK1”为无菌水，“”表示无菌生长，“”表示菌体生长弱，“”表示菌体生长较强，“”表示生长很强。NISIN主要抑制大部分革兰氏阳性菌,特别是细菌的芽孢。NISIN能抑制葡萄球菌属、链球菌属、小球菌属和乳杆菌属的某些菌种抑制大部分梭菌属和芽孢杆菌属的芽孢19。例如能有效抑制肉毒梭状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、枯草芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌等引起的食品腐败。从表21可以看出，不同浓度的NISIN对大肠杆菌，沙门氏菌，粘红酵母菌，黑曲霉，绿色木霉没有抑菌效果；而一定浓度的NISIN对枯草芽孢杆菌，金黄色葡萄球菌有一定的抑菌效果；NISIN对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为200IU/ML。早期的研究认为,NISIN一般对霉菌、酵母菌和革兰氏阴性菌是无效的,但近期的研究表明,在一定条件下如冷冻、加热、降低PH和EDTA处理。一些革兰氏阴性菌如沙门氏菌、大肠杆菌、假单胞菌等对NISIN敏感。NISIN对革兰氏阳性菌营养细胞和芽孢有不同的抗菌机理。NISIN对营养细胞的抗菌机理有不同的看法。一种观点认为，NISIN吸取于细胞膜上,可以抑制细胞壁中肽聚糖的生物合成，使细胞膜和磷脂化合物的合成受阻，导致细胞内物质外泄，引起细胞裂解20。另一观点认为NISIN的抗菌机理与DHA和DHB密切相关，因为NISIN中的DHA和DHB能够与敏感菌株细胞膜中某些酶的巯基发生作用，释放细胞质，造成敏感细胞裂解。NISIN对芽孢的作用是在其萌发前期及膨胀期破坏其膜，以抑制其发芽过程。232丁香精油最低抑菌浓度表22丁香精油的最低抑菌浓度测定TAB22THEMINIMALINHIBITINGCONCENTRATIONOFTHECLOVEOIL供试菌种PATHOGENICFUNGI浓度枯草芽孢杆菌BACILLUSSUBTILIS大肠杆菌C金黄色葡萄球菌STAPHYLOCOCCUSAUREUSSTAPHYLOCOCCUSAUREUSSTAPHYLOCOCCUSAUREUSSTAPHYLOCOCCUSAUREUSSTAPHYLOCOCCUSAUREUS沙门氏菌SALMONELLA粘红酵母菌RHODOTORULAGLUTINIS黑曲霉绿色木霉MAVIRIDE0400200100050025CK1CK2河南科技大学本科生毕业论文13注以上是各浓度做3次平行实验。“CK1”为无菌水，“CK2”为吐温80，“”表示无菌生长，“”表示菌体生长弱，“”表示菌体生长较强，“”表示生长很强。研究表明，丁香的乙醇提取液对酵母、青霉、黑曲霉、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌有很强的抑菌作用21。丁香抑菌效力强、抗菌谱广，可抑制细菌、酵母及霉菌，对食品污染菌有广谱抑菌作用，最低抑菌质量浓度低，特别是抑制真菌作用强，这在植物抑菌材料中是比较少见的。表22也表明，在一定的时间和条件下，一定浓度的丁香精油对供试的细菌、酵母和霉菌具有良好的抑制效果。丁香精油对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、绿色木霉、黑曲霉抑菌效果较好，最低抑菌浓度均为005；对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、粘红酵母菌，的最低抑菌浓度较大，均为010。孙卫青22采用平板法测定辣椒、花椒、生姜、大蒜、黑胡椒、丁香油树脂对几种霉菌、细菌、酵母菌的最低抑菌浓度，丁香的抗菌性最强，其次是丁香油树脂抑菌范围较广，PH4285，与此相比，苯甲酸钠抗菌活性PH范围就狭窄多了，只有在PH45以下效果才较好，其抗菌效力随PH会值升高而减弱。周建新等23研究也认为，丁香对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌有较大的杀伤作用。顾仁勇等24研究表明在具有抑菌作用的植物材料中，多数是对细菌的抑制力较强而对真菌酵母及霉菌的抑制力较差，丁香的突出优点是抑制真菌作用强，这说明丁香精油作为天然食品防腐剂具有独特的优势。233纳他霉素最低抑菌浓度表23纳他霉素最低抑菌浓度TAB23THEMINIMALINHIBITINGCONCENTRATIONOFTHENATAMYCIN供试菌种PATHOGENICFUNGI浓度PPM枯草芽孢杆菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌沙门氏菌粘红酵母菌黑曲霉绿色木霉5040302010CK1注以上数据均为3次试验重复。“CK1”为无菌水，“”表示无菌生长，“”表示菌体生长弱，“”表第2章三种天然抑菌剂最小抑菌浓度的测定14示菌体生长较强，“”表示生长很强。纳他霉素是26种多烯烃大环内酯类抗真菌剂之一，它对所有的霉菌和酵母菌几乎都有极强的抑制力，但对细菌、病毒等其他微生物则无效。这是由于纳他霉素分子的疏水部分即大环内酯的双键部分以范德华力和整个甾醇分子结合，形成抗生素一甾醇复合物，破坏细胞质膜的渗透性；分子的亲水部分即大环内酯的多醇部分则在膜上形成水孔，损伤膜的通透性，从而引起菌内氨基酸、电解质等重要物质渗出而死亡25。但细菌细胞膜缺乏甾醇麦角固醇类结构，所以纳他霉素对其抑制效果不明显。当最小抑菌浓度MIC10000UGML时才显示出抑制细菌作用。表23也表明纳他霉素对细菌几乎不起作用，但对霉菌和酵母抑制作用非常明显。它对粘红酵母菌和绿色木霉的最小抑菌浓度均为40PPM,对黑曲霉的最小抑菌浓度为20PPM。第3章复合抗菌膜抑菌性能的研究15第3章复合抗菌膜抑菌性能的研究31实验材料与仪器311材料乳清浓缩蛋白（WPC80）新西兰恒天然乳业公司、丁香精油（主要成分丁香酚，上海生物化学有限公司）、NISIN（106IU，洛阳市华健生物工程有限公司）、纳他霉素（浙江银象生物工程有限公司）、甘油、氢氧化钠以上均为分析纯。3112菌种细菌枯草芽孢杆菌BACILLUSSUBTILIS；金黄色葡萄球菌STAPHYLOCOCCUSAUREUS；大肠杆菌ESCHERICHIACOLI；沙门氏菌SALMONELLA；霉菌黑曲霉ASPERGILLUSNIGER；绿色木霉TRICHODERMAVIRIDE酵母粘红酵母RHODOTORULAGLUTINIS以上菌种均由本院微生物教研室提供3113培养基营养肉汤琼脂培养基（北京奥博星生物技术有限公司，批号20080712）；马铃薯葡萄糖琼脂培养基PDA（北京奥博星生物技术有限公司，批号20081006）；麦芽汁琼脂培养基（广东环凯微生物科技有限公司，批号20080912）；MRS琼脂培养基（北京奥博星生物技术有限公司，批号20080816）312仪器和设备JJ1型电动搅拌器金坛市正基仪器有限公司；202型电热恒温干燥箱北京市永光明医疗仪器厂；精密电子天平北京赛多利斯天平有限公司；HHS恒温水浴锅金坛市亿通电子有限公司；笔试酸度计上海宇隆仪器有限公司；移液枪上海荣泰生化工程有限公司；YSQSGH280型手提式压力蒸汽灭菌锅上海华线医用核子仪器有限公司；SWCJ1F型单人双面净化工作台苏州净化设备有限公司；自制有机玻璃皿；烧杯；纱布；滤纸；玻璃棒；涂布棒；接种环；酒精灯；玻璃试管；打孔器；玻璃培养皿；三角瓶。河南科技大学本科生毕业论文1632实验方法321WPC/NISIN复合膜研究分别配制蛋白质浓度为12、NISIN含量为200IU/ML、250IU/ML、300IU/ML、350IU/M、400IU/ML的WPC/NISIN混合溶液，搅拌15MIN使其充分溶解，将溶液的PH值调节到8，放入一定温度的水浴锅中加热一段时间，冷却后加5的甘油搅拌均匀，超声波除去气泡，吸取5ML的成膜液倒入有机玻璃皿直径80MM中，在60的干燥箱中干燥3H成膜，待测。322WPC/丁香精油复合膜研究配制蛋白质浓度为12的WPC溶液，搅拌15MIN使其充分溶解，用1MOL/LNAOH溶液将溶液的PH值调节到8，放入一定温度的水浴锅中加热一段时间，同时用甘油将丁香精油稀释成为30，20，10，5，25的混合溶液，待WPC溶液冷却后分别加5的不同浓度甘油/丁香精油混合液，并高速分散均质机10000RPM下搅拌1MIN，超声波除去气泡，吸取5ML的成膜液倒入有机玻璃皿直径80MM中，在60的干燥箱中干燥3H成膜，待测。323WPC/纳他霉素复合膜研究分别配制蛋白质浓度为12、纳他霉素含量分别为20PPM、30PPM、40PPM、50PPM、60PPM的WPC/纳他霉素混合溶液，搅拌15MIN使其充分溶解，将溶液的PH值调节到8，放入一定温度的水浴锅中加热一段时间，超声波除去气泡，吸取5ML的成膜液倒入有机玻璃皿直径80MM中，在60的干燥箱中干燥3H成膜，待测。324WPC/丁香精油、NISIN、纳他霉素复合膜研究分别配制乳清蛋白含量为12，NISIN含量为分别为300IU/ML、350IU/ML、400IU/ML，纳他霉素含量分别为40PPM、50PPM、60PPM的溶液，搅拌15MIN使其充分溶解，将溶液调节到PH为8，放入一定温度的水浴锅中加热一段时间，同时用甘油将丁香精油稀释成为30、20、10的混合溶液，待WPC溶液冷却后加5的甘油/丁香精油混合液，按三因素三水平做九个试验点。最后用蒸馏水配制并在高速分散均质机10000RPM下搅拌1MIN，超声波除去气泡，吸取5ML的成膜液倒入有机玻璃皿直径80MM中，在60的干燥箱中干燥3H成膜，待测。第3章复合抗菌膜抑菌性能的研究17表31正交实验因素水平表TAB31THEFACTORSANDITSLEVELSOFORTHOGONALEXPERIMENTS因素水平NISIN浓度/IU/MLA纳他霉素浓度/PPMB丁香精油浓度/（）（C）123300350400405060051015325乳清蛋白抗菌膜抑菌效果的测定（1）菌悬液及含菌平板的制备将上述各种供试菌种用适宜斜面培养基活化，以无菌生理盐水制成10111012CFU/L均匀的菌孢子悬液。将融化的灭菌培养基倾入无菌培养皿中待凝固后滴入01ML菌孢子悬液，用无菌涂布环将菌孢子悬液涂布均匀即成含菌平板，待用。（2）抑菌圈实验参照QB/T25912003方法18，略有改动。用无菌打孔器分别将不含防腐剂的蛋白膜和含有防腐剂乳清浓缩蛋白膜打成直径为6MM的圆片，紫外灯下灭菌30MIN1H，然后将膜片分区域贴于含菌平板上，倒置于恒温培养箱中培养细菌在37下培养24H，真菌在28下培养4872H后测量抑菌圈直径，并计算面积。33结果与分析331三种抑菌剂分别与WPG复合的抑菌性研究表32WPC/NISIN复合膜抑菌效果TAB32INHIBITORYEFFECTOFWPC/NISINCOMPOSITEMEMBRANE抑菌圈INHIBITORYZONEMM2浓度IU/ML枯草芽孢杆菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌沙门氏菌粘红酵母菌黑曲霉绿色木霉20037109120000250452011010000300533012940000350621014160000400812016990000河南科技大学本科生毕业论文1805101520200250300350400NISIN浓度（IU/ML抑菌圈直径MM2金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌图331WPC/NISIN复合膜抑菌效果图FIGURE331WPC/NISINCOMPOSITEFILMBACTERIOSTATICEFFECTDIAGRAM由表32及图331可以看出，NISIN复合膜对大肠杆菌，沙门氏菌，粘红酵母菌，黑曲霉，绿色木霉没有抑菌效果，表明NISIN添加到乳清浓缩蛋白膜中同样对革兰氏阴性细菌、酵母和霉菌等没有抑菌效果。200IU/ML的NISIN复合膜对枯草芽孢杆菌，金黄色葡萄球菌均产生一定的抑菌性，其中对金黄色葡萄球菌抑菌性较强，对枯草芽孢杆菌抑菌性较弱。随着NISIN含量的增加，复合膜抑菌性显著增强（PRARBK3119600111833137267最佳水平组合R155000620050133A3B3C3河南科技大学本科生毕业论文22表38大肠杆菌正交实验结果TAB38ESCHERICHIACOLIRESULTSOFORTHOGONALTEST实验号ABC空列大肠杆菌抑菌圈MM2111111317212221689313331916421231575522311876623121297731322088832131422933211731K1164067166000134533极差分析K2158267166233166500RCRARBK3174700164800196000最佳水平组合R164330143361467A3B3C3表39金黄色葡萄球菌正交实验结果TAB39STAPHYLOCOCCUSAUREUSRESULTSOFORTHOGONALTEST实验号ABC空列金黄色葡萄球菌抑菌圈MM2111111517212221745313332065421231826522312247623121656731322457832131757933211915K1177567193333164333极差分析K2190967191633182867RCRARBK3204300187867225633最佳水平组合R267330546755211A3B1C3第3章复合抗菌膜抑菌性能的研究23表310沙门氏菌正交试验结果TAB310SALMONELLARESULTSOFORTHOGONALTEST实验号ABC空列沙门氏菌抑菌圈MM2111111256212221501313332014421231547522312056623121301731322114832131315933211523K1159033163900129067极差分析K2163467162400152367RCRARBK3165067161267206133最佳水平组合R054340237269411A3B1C3表311粘红酵母菌正交实验结果与分析TAB311STICKYREDYEASTRESULTSOFORTHOGONALTEST实验号ABC空列粘红酵母菌抑菌圈MM2111112962122250731333807421233245223152462312875731323058321351593321827K1553333083356200极差分析K2574335320056933RBRARCK3549008363354533最佳水平组合R025335280002400A2B3C2河南科技大学本科生毕业论文24表312黑曲霉正交试验结果TAB312ASPERGILLUSNIGERRESULTSOFORTHOGONALTEST实验号ABC空列黑曲霉抑菌圈MM2111111123212221501313331923421231174522311556623121973731321145832131543933211957K1151567114733154633极差分析K2156767153333154400RBRARCK3154833195100154133最佳水平组合R052008036700500A2B3C1表313绿色木霉正交试验结果TAB313TRICHODERMARESULTSOFORTHOGONALTEST实验号ABC空列绿色木霉抑菌圈MM2111113782122258631333912421233855223159462312925731323818321359693321604K1625333813363300极差分析K2634675920052500RBRCRAK3527008136762900最佳水平组合R107674328810800A2B3C1NOTEVALUESN35WITHDIFFERENTSUPERSCRIPTLETTERSINEACHROWARESIGNIFICANTLYDIFFERENTP005第3章复合抗菌膜抑菌性能的研究25研究发现，NISIN、丁香精油、纳他霉素与乳清蛋白复合膜能增强其抑菌效果，比单一使用一种抑菌剂获得了更宽的抑菌谱。丁香精油和NISIN基本对霉菌和酵母菌没有抑菌作用，加入了那样他霉素后，复合膜对霉菌和酵母也有了很强的抑菌作用。正交试验发现当NISIN和丁香精油、纳他霉素同时作用时，复合膜的抑菌效果较单独使用时显著增强，但两者联合对不同菌种增效倍数也有差别。其中对大肠杆菌抑菌效果增效最大；对霉菌抑菌效果较差；纳他霉素几乎不抑制细菌，只对霉菌和酵母菌起作用，和丁香精油、NISIN混合后对霉菌和酵母的抑制作用比单独使用时增强，从表311313也可以看出，对酵母菌和霉菌抑菌圈的影响纳他霉素的极差远大于NISIN和丁香精油；因为丁香精油和NISIN对细菌都有抑制作用，所以复合使用时对细菌的抑制作用比单独使用时效果要好，从表37310的极差分析中也可以看出，NISIN和丁香精油对细菌的极差也都远大于纳他霉素；随着混合防腐剂浓度增加，抑菌效果显著增强，300IU/MLNISIN、60PPM的纳他霉素和15丁香精油联合作用效果显著强于其他八组。考虑到综合效果，即抑菌谱的宽广和好的抑菌效果，同时考虑到抑菌剂添加量太多对食品风味会造成不良影响，第三组为最佳配方,即300IU/MLNISIN、60PPM的纳他霉素和15丁香精油。第四章结论26第四章结论本文主要探究了天然防腐剂丁香精油、NISIN和纳他霉素与WPC复合膜的抑菌性，并对添加不同的抑菌剂以及不同的剂量对复合抗菌膜的抑菌效果的影响，主要结论如下1、NISIN对大肠杆菌、沙门氏菌、粘红酵母菌、黑曲霉、绿色木霉没有抑菌效果；NISIN对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为200IU/ML。2、丁香精油对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、绿色木霉、黑曲霉的最低抑菌浓度均为005，对金黄色葡萄球菌、粘红酵母菌、沙门氏菌的最低抑菌浓度均为0103纳他霉素对大肠杆菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌没有抑菌效果；纳他霉素对粘红酵母菌和绿色木霉的最低抑菌浓度均为40PPM对黑曲霉的最低抑菌浓度为20PPM。4、NISIN复合膜对大肠杆菌、沙门氏菌、粘红酵母菌、黑曲霉、绿色木霉没有抑菌效果；随着NISIN含量的增加，复合膜对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌性显著增强。5、0125的丁香复合膜对枯草芽孢杆菌没有抑菌效果；对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌均表现出较好的抑菌性，其中对大肠杆菌抑菌性最强。随着丁香浓度的增加，复合膜抑菌性增强；其中025的丁香复合膜对枯草芽孢杆菌产生抑菌性，而对粘红酵母菌的最低抑菌浓度为1。在对霉菌的抑菌作用中，丁香复合膜前期能够抑制霉菌孢子生长，但后期霉菌生长迅速，抑菌效果差。6、纳他霉素复合膜对大肠杆菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌没有抑菌效果；20PPM的纳他霉素复合膜就能对黑曲霉产生抑菌性，而对粘红酵母菌和绿色木霉的最低抑菌浓度为40PPM随着纳他霉素含量的增加，复合膜对黑曲霉、粘红酵母菌、绿色木霉抑菌性显著增强。7、当NISIN、丁香精油和纳他霉素同时作用时，复合膜的抑菌效果较单独使用时有所增强，但三者联合对不同菌种增效倍数也有差别。其中对大肠杆菌抑菌效果增效最大，对霉菌抑菌效果增效有限。随着混合防腐剂浓度增加，抑菌效果显著增强（P005）；400IU/MLNISIN、1丁香精油和60PPM的纳他霉素三者联合作用效果显著强于其他八组。参考文献27参考文献1徐云升可食用膜的改性研究J食品工业科技2002，1072752高翔抑菌作用及其在食品保鲜中的应用国调味品12期3周柏玲，杨丽莉，李蕾，等丁香和桂皮提取物对果蔬抑菌效果的影响J保鲜与加工，2003，196192114马丽珍，南庆贤不同浸提条件对植物香辛料抑菌性能的影响J食品与发酵工业，2003，20（12）8125王春梅，张杰等丁香酚对灰霉病菌的抑制活性及菌丝形态的影响江西农业报2008，2072756吕世明、陈杖榴、陈建新丁香酚体外抑菌作用研究食品科学，2008，91221247郑穗华乳酸链球菌素在食品工业中的应用J广州化工，2000，437408郭良辉，许巧情等溶菌酶与NISIN复合生物保鲜剂对蚌肉的保险效果水利渔业，2007，1521121149张百刚，高华NISIN抑菌作用的研究中国乳品工业2008，10252710李东等纳