肝者,罢极之本

“肝者，罢极之本”的理论探讨与实验研究 运城护理职业技术学院中医教研室 马玉兰,主讲人简介,马玉兰，女，中国共产党员。研究生学历，副主任医师、高级讲师，中医教研室主任、临床学科部副主任，山西省高级专业技术职务评审委员会评委库成员。主要成果： 研究生毕业论文“肝者，罢极之本的理论探讨与实验研究”，进一步丰富和完善了中医从肝论治疲劳的理论基础和实验依据；参加完成的与此相关的一项天津市高教局资助课题，被确认为天津市科技成果；参加完成了中日合作科研课题“中医药促进神经再生作用的实验研究”的国内部分工作。参加工作以来，先后发表专业论文15篇；编撰的2部专业书籍和参编的内经选读教材，分别由人民卫生出版社、中国中医药出版社出版并公开发行。先后被评为本单位优秀党员、本市优秀科技工作者，并荣获本市市委市政府授予的“运城市拔尖人才”称号,课 题 思 路,“肝者，罢极之本”出自素问六节藏象论。由于历代医家对其注释不一，现代学者对其认识仍有分歧，使此藏象学说的“五本”之一至今未能受到临床医家的足够重视。因此，探讨“肝者，罢极之本”的涵义，具有重要的理论意义和实用价值。本课题首先立足内经有关理论，分析、探讨“肝者，罢极之本”的内涵及其理论基础，认为“肝者，罢极之本”提示肝在增强人体耐受疲劳方面具有重要作用；肝主藏血、主筋的生理功能可为人体耐受疲劳提供物质基础和功能保障。 为验证这一认识，我们以养肝（血）、柔筋的中药为主组成“养肝柔筋方”，观察其对大鼠耐疲劳能力的影响，并探讨其可能的作用机制。,素问六节藏象论曰 :“帝曰: 藏象何如？歧伯曰: 心者，生之本，神之变也 。 肺者，气之本，魄之处也 。 肾者，主蛰，封藏之本，精之处也 。肝者，罢极之本，魂之居也 。脾胃大肠小肠三焦膀胱者，仓廪之本，营之居也 。”,论文的主要结构 第一部分 理论探讨 （一） “肝者，罢极之本”的释义 （二） “肝者，罢极之本”的理论基础 （三） 临床及动物实验结果提示肝与疲劳具有密切 的联系 第二部分 实验研究 实验一 “养肝柔筋方”对大鼠运动训练中体重和骨骼肌氧分压的影响 实验二 “养肝柔筋方”对大鼠运动训练中骨骼肌主 要能源 物质的贮备和代谢的影响,第一部分 理 论 探讨（一） “肝者，罢极之本”的释义 1. “肝是疲劳的根本”。(姚止庵云“罢与疲通”) 2. “肝是耐受疲劳的根本”。 (高士宗曰“罷，作 羆。”) 3. “肝是免除疲劳的根本” 。(现代认为罢有免除 停止之意) 4. “肝是四肢的根本”。(丹波元坚认为罢极“即言四 肢”) 由上可见，历代医家对“肝者，罢极之本”的认识虽不尽相同，但几乎都认为肝与人体的活动及活动时耐受和消除疲劳的能力密切相关。说明早在两千多年以前，人们就已经认识到肝在人体耐受疲劳方面具有重要作用。,（二） “肝者，罢极之本”的理论基础 1. 肝主藏血为人体耐受疲劳提供物质基础和功能保障 (1) 血对人体具有极为重要的营养和滋润作用，它循脉运行不息，不断地为全身各脏腑组织器官提供丰富的营养，以维持其正常的生理活动(如素问五脏生成篇曰：“ 肝受血而能视，足受血而能步，掌受血而能握，指受血而能摄。” )。而肝具有主藏血的生理功能，对各脏腑组织器官起到营养调节作用，是人体各种机能活动所需能量的重要来源。 肝主藏血，是指肝具有贮藏血液和调节血量的生理功能。,（二） “肝者，罢极之本”的理论基础 1. 肝主藏血为人体耐受疲劳提供物质基础和功能保障（2） 肝藏血是指人体的血液生成之后，一部分通过血脉的输布被各脏腑组织器官直接利用，另一部分则贮藏于肝。 肝调血是指肝可随着机体活动的需要，调节人体各部分的血量分配 。例如，当人体剧烈活动时，肝即把自身贮藏之血输布于有关的脏腑组织，以供其机能活动的需要；当人体安静休息时，有关脏腑组织的需血量相对减少，部分血液便归藏于肝。 由上可见，肝所贮藏之血是机体耐受疲劳的物质基础，肝调血作用是机体耐受疲劳的功能保障。因此，加强肝主藏血的生理功能，是提高机体耐疲劳能力的重要环节。,（二） “肝者，罢极之本”的理论基础 2. 肝主筋是人体耐受运动性疲劳的组织基础 筋是联络肌肉和骨骼的组织，主司运动。 肝主筋，是由于筋的滋养有赖于肝血。筋得肝血之濡养，则人体运动有力而灵活；若肝血不足，筋失所养，则筋力不健，运动不利。如素问上古天真论云：“丈夫七八，肝气衰，筋不能动。” 3. 肝藏魂对人体耐受疲劳具有调节作用 据中医学理论， 肝藏血，血舍魂，魂的活动有赖肝血的供养，若肝血充足，则魂得其养且有所藏，可使人体休作有时，弛张有度，这对解除活动后的疲劳，恢复精神和体力，维持人体长期、持久的机能活动（包括运动）是非常必要的。,（二） “肝者，罢极之本”的理论基础 4. 肝主疏泄为人体耐受疲劳营造有利的内环境 肝主疏泄是自元代以来，历代医家在内经基础上，从理论上对肝之生理功能的重要补充。它具体包括疏泄气机、调畅情志、促进脾胃消化吸收等三方面。就人体运动过程而言，肝之疏泄功能正常，首先有助于脾胃化生气血，为机体运动提供充足的能量；其次，可使周身气机调畅，经脉通利，促进肝调血作用的顺利实现；再次之，可使人体较好地协调自身的情志活动，保持心情愉快，精神饱满，思维活跃，反应敏捷，有利于机体对运动刺激做出积极的、适当的反应。 肝主疏泄的生理功能与肝主藏血是相互为用的，并以肝藏血为基础。,（三） 临床及动物实验结果提示肝与疲劳具有密切的联系 近年来，有学者从不同角度探讨了肝与疲劳的关系。如王氏等通过对3413例肝病患者临床症状的分析，发现疲乏症状的出现及减轻，与肝病的发生及好转密切相关；提示人们：临证重视疲乏症状，对多种肝病的预防、诊断、治疗和预后均有重要价值。 本课题组前期工作者的实验研究表明，具有养肝（血）、柔筋作用的中药复方“养肝柔筋方”可显著提高小鼠抗运动性疲劳的能力，提示运动性疲劳与肝之间存在密切的联系。,综上所述，我们认为“肝者，罢极之本”理论基础的核心是肝主藏血；因肝主筋，筋主运动，故运动性疲劳与肝的关系尤为密切。所以，通过养肝（血）、柔筋可提高人体耐受体力性疲劳的能力。,现代研究表明，运动性疲劳是多种因素（能量耗竭、代谢产物堆积、离子代谢紊乱、调节机能下降等）综合作用的结果，而能源物质被耗、能量供应不足是其中最基本、最重要的因素。因为人体的运动源于骨骼肌的收缩，而骨骼肌细胞的收缩依赖于体内能源物质代谢产生的三磷酸腺苷（ATP）被分解释出之能量。如1982年，Edwrads在关于运动性疲劳产生机理的研究报告中指出:在运动过程中，当骨骼肌细胞的能量消耗和兴奋性丧失达到一定程度时，机体为保护自身免于衰竭，使兴奋性突然崩溃，以拯救能量储备进一步下降而产生灾难性的变化，同时伴随力量或输出功率突然衰退，表现为疲劳。此即“肌肉疲劳的突变理论”之精髓，它特别重视“能量”和“电传导”（兴奋性）间的相互关系 ，且突出强调“能量被耗”是引起运动性疲劳的首要因素。因此，现代抗运动性疲劳的研究十分重视机体（尤其是骨骼肌）能源物质的贮备和代谢状况。,血的营养和滋润作用，是维持人体运动功能的必要条件；肝主藏血的生理功能，对人体起到营养调节作用，与人体的活动密切相关。如运动时，肝可利用自身贮藏之血，调节体内的血量分配，使各脏腑组织的供血量与其机能活动相适应，从而不致过早产生疲劳。因肝主筋（中医的筋，涵概现代医学的肌肉、肌腱、韧带等组织），所以肝主藏血的功能对骨骼肌的能量代谢可能尤为重要。,骨骼肌是完成运动的直接机能组织，骨骼肌的疲劳是外周疲劳的中心环节；骨骼肌能源物质被耗、能量供应不足，是导致骨骼肌疲劳的首要因素。故本课题拟在前期工作表明“养肝柔筋方”抗运动性疲劳作用与能量代谢有关的基础上，以运动性疲劳大鼠的骨骼肌为主要研究对象，观察本方对其主要能源物质的贮备和代谢过程中相关指标的影响，试图从改善骨骼肌能源物质贮备和代谢的角度，探讨本方抗运动性疲劳的作用机制，从而为肝主藏血、主筋、为“罢极之本”等中医基础理论，及“养肝柔筋方”的临床应用提供部分实验依据。,第二部分 实验研究实验一 “养肝柔筋方”对大鼠运动训练阶段体重和骨骼肌氧分 压（PO2）的影响 （一） 材料和方法 1. 实验动物及分组 健康雄性Wistar大鼠，按体重和游泳能力将大鼠分成四组，每组11只，分别标记为安静对照组、模型组、中药组、糖原填充组。 2. 实验药物 “养肝柔筋方”水煎剂：当归、五味子、酸枣仁、木瓜各30等，常规水煎2次，合并浓缩至2生药/ml。 葡萄糖溶液：用蒸馏水将葡萄糖粉剂配制成浓度为2/ml的溶液。,3. 实验方法 （1） 运动方式 实验共21天。安静对照组不做任何运动；其它三组大鼠除星期天外，每天无负重游泳至疲劳一次（糖原填充组在最后3天每天游泳30min）。 （2） 动物给药 模型组与安静对照组：均灌胃蒸馏水1次/日，2ml/次 ，连 续21天。 中药组：灌胃“养肝柔筋方” 水煎剂9.54ml/kg体重/次(平均 每只大鼠约2ml/次 ) ，连续21天。 糖原填充组：按糖原填充法，在实验的前17天中，灌胃蒸 馏水；从实验第18天开始，灌胃葡萄糖溶液，连 续4天。,4. 指标的测试方法 5. 统计学方法 组间比较用方差分析、q检验，自身前后比较用t检验。,（二） 结果 1. 一般状况 实验开始时，各组大鼠食欲正常，毛顺而润泽，耳色红润，双目有神，活泼好动，被抓时逃避反应敏捷；而游至疲劳被捞起时则双目无神，几乎无逃避反应，但经休息及进食后，其精神状态很快恢复。 实验过程中，模型组大鼠（包括糖原填充组在实验期间的前17天中）逐渐出现嗜卧懒动，饮食略减，体毛欠光泽，耳色欠红润，被抓时逃避反应较迟钝，游至疲劳后其精神状态需较长时间才得以恢复。 中药组大鼠食欲较旺盛，神色无明显变化，反应较敏捷，疲劳后其精神状态的恢复也较快。,各游泳组大鼠疲劳性游泳时间在实验前无差异（P0.05）。实验第20天，如图所示，模型组与中药组比较，差异有非常显著性（P0.01）。 提示：“养肝柔筋方”水煎剂具有一定的抗运动性疲劳作用（根据中医学理论，本方适用于运动性疲劳证属肝血不足，筋脉失养者）。,2. 各游泳组大鼠疲劳性游泳时间的测定结果,3. 各组大鼠体重的比较,如图所示，实验前各组大鼠体重无差异（P0.05）。实验第22天，中药组、糖原填充组与模型组比较，有显著性差异 （P0.05）。提示：“养肝柔筋方”和糖原填充法均可在一定程度上防止大鼠运动过程中体重的过度下降。,4. 各游泳组大鼠游泳1.5h前后腓肠肌PO2下降幅度的比较,如图所示，各游泳组大鼠运动中腓肠肌PO2下降幅度在实验前无差异（P0.05）；实验第21天各组PO2下降幅度均较实验前显著增加（P0.01），并出现组间差异，中药组和糖原填充组均明显大于模型组（P0.05）。提示： “养肝柔筋方”和糖原填充法均可促使大鼠运动中骨骼肌PO2下降幅度的增加，其中，前者作用优于后者。,（三） 讨论 1. 大鼠运动性疲劳模型及其与“肝者，罢极之本”的关系 运动性疲劳是机体生理机能因运动而暂时性下降的现象，与患者因病出现的的疲乏症状相比，它不受病因的影响，而是从生理方面客观地反映机体疲劳的产生，因而有利于观察药物对机体耐疲劳能力的影响，故本课题选其作为“肝者，罢极之本”的实验研究模型。根据肝主筋（肝血养筋）、筋主运动等中医基础理论，结合“养肝柔筋方”的功效和大鼠一般健康状况，可以初步判定此模型属肝血不足，筋脉失养之证。,（三） 讨论 2. “养肝柔筋方”对大鼠运动训练阶段体重变化的影响 有资料显示 ，机体在运动过程中的体重变化，可以反映机体热能平衡状态和运动能力的改变。 本实验后期，模型组大鼠在运动能力下降的同时，其体重也显著低于其它三组大鼠，说明其体内出现了热能负平衡。这从一个侧面反映出本实验大鼠的运动性疲劳与其能源物质的贮备和代谢有关，而“养肝柔筋方”可能在一定程度上改善了运动大鼠能源物质的贮备和代谢状况。,（三） 讨论 3. “养肝柔筋方”对大鼠运动训练阶段腓肠肌PO2变化的 影响 运动过程中组织PO2下降幅度可以反映该组织的摄氧能力。本实验结果显示， “养肝柔筋方”和糖原填充法皆可协同耐力运动加强大鼠腓肠肌的摄氧能力，其中“养肝柔筋方”的作用略优于糖原填充法。提示 “养肝柔筋方”可促进运动过程中骨骼肌能源物质的有氧代谢。,实验二 “养肝柔筋方”对大鼠运动训练中骨骼肌主要能源物质的贮备和代谢的影响 （一） 材料和方法 1. 实验动物及其分组和用药情况：同实验一。 2. 实验取材：在实验第22天取材。快速采血后分别取出肝脏、股四头肌等组织。 3. 观察指标： 肌糖原、肝糖原、血糖、骨骼肌和血液中的LA含量和LDH活力、血BUN、骨骼肌肌凝蛋白三磷酸腺苷酶（M-ATPase）活性。 4. 统计学方法：用方差分析，q检验。,（二） 结果 1. 各组大鼠股四头肌、肝组织糖原含量的比较,如图所示，各游泳组游泳后的肌、肝糖原含量均较安静对照组显著下降（均P0.05) 。提示：“养肝柔筋方”协同运动增加体内糖贮备的作用接近经典的糖原填充法。,如图所示，游泳后模型组的血糖浓度显著低于其它三组（P0.05）。提示：“养肝柔筋方”和糖原填充法均可在一定程度上维持大鼠运动中的血糖浓度。,（二） 结果 2. 各组大鼠血糖浓度的比较,（二） 结果 3. 各组大鼠股四头肌和血液中LA含量的比较,如图所示，各游泳组游泳后的肌LA和血LA含量均较安静对照组显著增加（ P0.05 ， P0.01）。其中，模型组最高，糖原填充组次之，中药组最低（ P0.05）。提示：“养肝柔筋方”和糖原填充法均可减少大鼠运动中肌肉和血液中的LA含量，其中“养肝柔筋方”的作用明显优于糖原填充法。,（二） 结果 4. 各组大鼠股四头肌LDH活力的比较,如图所示，各游泳组游泳后的股四头肌LDH活力均较安静对照组有所升高。其中，糖原填充组最高（P0.05）；中药组略高于模型组，无统计学差异（P0.05）。提示：“养肝柔筋方”对机体运动中骨骼肌LDH活力无明显影响。,如图所示：各游泳组游泳后的血LDH活力均较安静对照组显著升高（ P0.01 ，P0.05）。其中，模型组最高，糖原填充组次之，中药组最低（ P0.01 ，P0.05）。提示：“养肝柔筋方”可降低机体运动中血LDH活力。,（二） 结果 5. 各组大鼠血液中LDH活力的比较,（二） 结果 6. 各组大鼠血BUN含量的比较,如图所示：与安静对照组比较，模型组血BUN含量显著增加（P 0.01），中药组和糖原填充组的增加均不明显（P0.05）。提示：“养肝柔筋方”和糖原填充法对大鼠运动中血BUN含量无明显影响 。,（二） 结果 7. 股四头肌M-ATPase活性观察结果 (1),安静对照组大鼠股四头肌M-ATPase - 组化染色(钙激活法) *100,正常安静状态下，大鼠股四头肌M-ATPase的分布情况。其中，型纤维着色呈浅棕黑色。,模型组大鼠股四头肌M-ATPase -组化染色(钙激活法) *100,由图可见，模型组大鼠游泳2h后股四头肌型纤维M-ATPase的分布稀疏，着色明显变浅，呈淡黄色。提示：运动性疲劳大鼠股四头肌型纤维M-ATPase的活性明显降低。,（二） 结果 7. 股四头肌M-ATPase活性观察结果 (2),糖原填充组大鼠股四头 肌M-ATPase - 组化染色(钙激活法) *100,由图可见，糖原填充组大鼠游泳2h后，股四头肌型纤维M-ATPase的分布较模型组增加，着色略加深，呈棕黄色。提示：糖原填充法可在一定程度上提高大鼠运动状态下股四头肌型纤维M-ATPase的活性。,（二） 结果 7. 股四头肌M-ATPase活性观察结果 (3),中药组大鼠股四头肌M-ATPase - 组化染色(钙激活法) * 100,由图可见，中药组大鼠游泳2h后股四头肌M-ATPase的分布较安静对照组和模型组均为稠密，着色明显加深，呈深的棕黑色。提示：“养肝柔筋方”可明显提高大鼠运动状态下股四头肌型纤维M-ATPase的活性。,（二） 结果 7. 股四头肌M-ATPase活性观察结果 (4),（三） 讨论 1. “养肝柔筋方”对大鼠运动训练阶段糖贮备的影 响 运动生理学研究表明，肌、肝糖原储量和血糖水平直接影响机体耐运动性疲劳的能力，若能增加糖贮备（如糖原填充法），则可在一定程度上提高运动能力，延缓运动性疲劳的产生。本实验结果显示， “养肝柔筋方”和糖原填充法均可在一定程度上增加运动训练大鼠的肌、肝糖原含量，并维持其血糖浓度。提示： “养肝柔筋方”增加体内糖贮备的作用接近经典的糖原填充法。,（三） 讨论 2. “养肝柔筋方”对大鼠运动过程中股四头肌、血液中LA含量的影响 研究表明，LA在肌肉局部的堆积与肌力呈显著负相关。因而减少肌细胞内LA的堆积，对提高肌力、增强机体耐疲劳能力具有重要意义。本实验结果显示，中药组大鼠的股四头肌和血液中LA水平显著低于模型组（并显著低于糖原填充 组）。结合PO2和SDH活性变化情况，其体内较低的LA水平可能主要是由于“养肝柔筋方”促进糖的有氧代谢，在一定程度上减少了LA的生成。,（三） 讨论 3. “养肝柔筋方”对大鼠运动过程中股四头肌和血 液中LDH活性的影响 LDH是糖无氧酵解供能的标志酶。本次实验结果显示“养肝柔筋方”对大鼠股四头肌LDH的活性无明显影响，提示该方对糖酵解供能过程没有明显的促进作用。 研究表明，运动到一定强度时，可引起肌细胞膜的通透性呈可逆性增加，LDH分子可漏出到细胞外，使血清中LDH活性明显升高。本实验显示中药组和糖原填充组的血LDH活力均较模型组显著降低，提示：“养肝柔筋方”和糖原填充法均可在不同程度上保护肌细胞膜的结构和功能（前者作用优于后者）。,（三） 讨论 4. “养肝柔筋方”对大鼠运动过程中血BUN含量的 影响 血清BUN含量是反映蛋白质分解代谢的的主要指标。运动中血BUN增量大小，提示机体利用蛋白质供能的程度。本实验结果显示，与安静对照组相比，模型组大鼠游泳2h后，血