基因预测的基本分析内容PPT课件

-,1,第六章基因预测和基因结构分析（II）,生物信息学,-,2,基因预测和基因结构分析,生物信息学中的重要内容之一预测编码蛋白质的基因,排除重复序列确定开放阅读框（openreadingframe,ORF）确定基因的调控区启动子,（一）基因预测的基本分析内容,-,3,（二）基因预测的基本方法,1.序列相似性搜索(ExtrinsicApproaches),基因组DNA序列,在6个阅读框中进行翻译并与蛋白质数据库中的序列进行比较分析（如Blastx）对EST数据库中同一生物的cDNA序列进行比较分析（如Blastn）,确定基因数目和对应的ORF,Similarity-basedGenePrediction:forsequencesthatencodeaknownproteinoraproteinwithaknownhomolog,-,4,分析举例：水稻Xa21基因序列（U37133）,CDS：1-2677bp处和3521-3921bp处Blastx分析结果（检索蛋白质数据库）：与水稻蛋白质序列比较,Blastn分析结果（检索estother数据库）：与水稻cDNA序列比较,取决于数据库中EST数据的数量和长度通过“Distancetreeofresults”查看与U37133序列同源的其它EST序列,有些蛋白质序列是推测获得的,-,5,2.根据模式序列预测基因(AbInitioApproaches),各种基因预测软件取决于人们对已知基因结构特征的认识采用统计学方法,基于一个或多个已知序列模式对未知序列进行分类,密码子偏爱性对发现的模式进行统计检验,启动子结构外显子、内含子,-,6,原核生物（E.coli）,与RNA聚合酶互作位点（-10、-35区）,LexArepressor的结合位点（启动子区段）CTGNNNNNNNNNNCAG核糖体结合位点（转录起始位点后）GGAGG,-,7,真核生物,基因结构复杂已知外显子、内含子外显子边界、启动子序列特征,-,8,目前还没有一个基因预测工具可以完全正确地预测一个基因组中的所有基因（Matheetal.2002),不同的基因预测软件分析结果有差异综合多个基因预测软件的分析结果,根据模式序列预测基因,-,9,一种分析工具可选择分析基因的不同结构,exon,poly-A,promoter重复序列,某些分析工具可选择物种模式（matrix）作为参照比较对象某些分析工具可用不同的方式呈现分析结果（文字或图形）,根据模式序列预测基因,-,10,分析举例（1）GeneFinding,Softberry(,GeneFindinginEukaryotaOperonandGeneFindinginBacteriaGeneFindinginViruses每一大类包括多个分析软件,在Softberry主页选择“GeneFindinginEukaryota”类中的“FGENESH”,在FGENESH网页输入D63710序列（fasta格式）、选择物种（human）作为参照,分析结果（文字和图像）,-,11,GenScan（/GENSCAN.html）用三个物种模式作为参照,VertebrateArabidopsisMaize,在GenScan主页输入D63710序列、选择物种（Vertebrate）作为参照,分析结果（文字和图像）,分析举例（2）GenScan,-,12,分析举例（3）GeneMark,GeneMark（/）,用于真核、原核和病毒等基因的预测多种物种参照,在GeneMark的分析主页选择“GeneMark-E”,在“GeneMark-E”网页输入D63710序列、选择物种“H.sapiens”，选择输出格式,分析结果,-,13,CombineextrinsicandabinitioApproaches,http:/bioinf.uni-greifswald.de/augustus/,/software/maker.html,combineextrinsicandabinitioapproachesbymappingproteinandESTdatatothegenometovalidateabinitiopredictions.,-,14,3.利用比较基因组预测基因(ComparativeGenomicsApproaches),依赖于全基因组测序结果亲缘关系相近生物的基因序列具有保守性,分析举例,N-SCAN/Twinscan(/nscan/),选择N-SCAN在线分析（需免费注册）,输入待分析序列，选择masking,clade,species和informant,分析结果,-,15,-,16,基因预测存在主要问题,假阳性（FalsePositive）：多预测了假的编码区，即在非编码区预测出基因假阴性（FalseNegative）：漏掉了真实的编码区，即将基因预测为非编码区过界预测（OverPrediction）：由于基因边界很难准确定位，预测经常会超过实际边界片段化（Fragmentation）：内含子太大的基因，在预测时容易断裂成两个或多个基因融合化（Fusion）：距离过近的两个或多个基因，在预测时容易被融合成一个很大的基因,-,17,包括多种基因预测软件NNPP分析启动子位点,在BCM的分析主页选择“GeneFeatureSearches”,在“GeneFeatureSearches”网页粘贴D63710序列、选择“NNPP/Eukaryotic-eukaryoticpromoterprediction”,分析结果,BCM/,（三）基因精细结构分析,-,18,Promoter2.0predictstranscriptionstartsitesofvertebratePolIIpromotersinDNAsequences.,分析启动子位点,Promoter2.0PredictionServerhttp:/www.cbs.dtu.dk/services/Promoter/,在“Promoter2.0”网页粘贴D63710序列,分析结果,-,19,分析转录因子结合位点,Cis-actingelement（顺式元件）和trans-actingelement（反式元件）的互作,-,20,分析举例PROSCAN,在Proscan网页粘贴序列（FASTA格式）,分析结果,/molbio/proscan/,分析结果,-,21,分析举例,PLACE(ADatabaseofPlantCis-actingRegulatoryDNAElement)http:/www.dna.affrc.go.jp/PLACE/index.html,在PLACE主页点击“SignalScanSearch”,在“PLACEWebSignalScan”网页粘贴序列（FASTA）,三种结果呈现方式：groupedbysignalmappedtosequencescanbysequenceorder,点击相关链接查看什么类型的转录因子结合在相关cis-element上,植物,-