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文档简介
第4节酶的固定化,学习导航1.说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。重、难点2.尝试制备固定大肠杆菌细胞。,一、固定化酶1.含义:通过物理或化学的方法,将_与_结合,使酶固定在载体上,并在一定的_内进行催化反应。2.方法:共价键结合法、_、物理吸附法。,水溶性的酶,不溶性的载体,空间范围,包埋法,3.优点(1)酶的_,可以反复使用多次。(2)酶不与产品混合,制品_。(3)可极大地降低生产成本。,活性稳定,较易纯化,4.实例:木瓜蛋白酶的固定化过程取尼龙布浸入等体积的_溶液中10s左右盐酸溶液中室温下水解45min蒸馏水冲洗至pH中性室温下放入_溶液中浸泡20min_缓冲液(pH7.8)反复洗涤木瓜蛋白酶溶液中固定3.5h,温度为_。,CaCl2溶液和甲醇,戊二醛,磷酸,4,二、固定化细胞1.含义:用适当的载体将_固定起来。2.优点:比固定化酶更_,使用寿命_。3.实例:大肠杆菌细胞的固定化可以用_培养基培养大肠杆菌,取菌液加入_和_,搅拌均匀,待_凝固后,切成小块,用生理盐水和蒸馏水洗净,即得到固定化的大肠杆菌细胞。,合成酶的细胞,简捷,更长,液体,生理盐水,琼脂,琼脂凝胶,要点一酶固定化的方法1.包埋法:将酶包裹在多孔性载体中,如包裹在聚丙烯酰胺等高分子凝胶中,或醋酸纤维素等半透性高分子膜中。,2.共价键结合法:将酶分子相互结合,或将其结合到纤维素、琼脂糖、离子交换树脂等载体上的固定方式。3.物理吸附法:将酶吸附到固体吸附剂表面的固定方式,固体吸附剂多为活性炭、多孔玻璃等。,下列关于酶和细胞的固定,叙述不正确的是()A酶分子很小,宜采用包埋法B酶分子很小,宜采用共价键结合法或物理吸附法固定C细胞个大,难被吸附或结合D细胞宜采用包埋法固定,【解析】一般来说,酶更适合采用共价键结合法和物理吸附法固定,而细胞多采用包埋法固定。这是由于细胞相对较大,而酶分子很小,个大的细胞难以被吸附或结合,个小的酶容易从包埋材料中漏出。【答案】A,【误区警示】酶和细胞的固定方法容易混淆,酶分子很小,适于用共价键结合法和物理吸附法固定;细胞个大,难以被吸附或结合,多采用包埋法固定。,变式训练下列有关固定化酶和固定化细胞的说法,错误的是()A固定化酶和固定化细胞的技术包括包埋法、共价键结合法和物理吸附法B某种固定化酶的优势在于能催化一系列生化反应,C固定化酶技术一次只能固定一种酶D固定化酶和固定化细胞都能反复使用,但酶的活性不会迅速下降解析:选B。固定化酶只能固定一种酶,固定化细胞可以固定一系列酶,固定化酶和固定化细胞都能反复使用,但酶的恬性不会很快下降。,要点二比较直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的特点,特别提醒固定化细胞可以保证细胞的完整性,由于环境条件改变比较小,所以酶的活性较为稳定。,下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述中,正确的是()A固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧量C利用固定化酶降解水体中的有机磷农药,需提供适宜的营养条件D利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物,【解析】固定化酶耐受性比较好,和溶解氧没有关系;利用固定化酶降解水体中的有机磷农药,不需要提供营养条件;利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类既可以作为反应底物,也可以作为碳源来调节酵母菌代谢方式。【答案】A,变式训练关于固定化酶中的酶说法正确的是()A酶的种类多样,可催化一系列的酶促反应B酶被固定在不溶于水的载体上,可反复利用C酶作为催化剂,反应前后结构不改变,所以固定化酶可永远利用下去D固定化酶由于被固定在载体上,所以丧失了酶的高效
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