三江2018年松材线虫病和薇甘菊疫情监测普查工作方案

三江县2018年松材线虫病与维甘疫情监测调查计划为贯彻柳州市林业局关于开展2018年松材线虫病和薇甘菊疫情监测调查的通知 (柳林通字201833号)的文书精神，根据广西松材线虫病普查技术方案，正确掌握我县松树线虫病感染情况，确保我县森林健康持续发展。 特别制定本方案。一、调查时间。 一年两次。 春季的4月10日到5月30日完成外业调查，6月10日完成县内业务统计，向市森防站报告。 秋季从9月10日到10月30日完成外业调查，11月5日完成县内业务的统计报告。 报告资料要求纸和电子版同时报告。二、成立人口普查指导小组。 为确保调查顺利进行，设立了“三江县松树线虫病和维根疫调查指导小组”组长：韦认忠(林业局局长)副组长：刘贝宁(林业局营林站长，党组成员)荣英俊(古宜镇副市长)莫培恩(丹洲镇副市长)兰应德(斗江镇副市长)欧智(林溪镇副市长)石广民(八江镇副市长)吴来付(德洞镇副市长)韦爱兰(程村乡副乡长)谏铭昌(旧堡乡副乡长)吴艳辉(和平乡副乡长)吴建能(高基乡副乡长)吴永秀(同乐乡副乡长)贾求顺(富禄乡副乡长)潘金海(洋溪乡人民代表大会副主席)梁军(良口乡武装部部长)傅俊(梅林乡武装部部长)杨善勋(林业局党组成员)成员：潘道锋、谭学东、向春娥、陆真汉、曹禹红、王红芳、観毅刚、穆雄庆、赵理文、李升黎、各乡(镇)林业站站长、森防员。三、调查内容调查枯死的松树的地方、数量、松林面积、枯死的原因等。 弄清了枯死的松的分布场所、松的种类、分布面积、枯死株数、松褐天牛危害等，制作了松的枯死状况的分布图，并填写了松的枯死状况表。四、调查范围。 三江县辖区包括15个乡镇和一个国营林场，调查重点包括重要的生态区域、松材线虫疫点及其周边松林、人为活动频繁的城镇和交通沿线、港口、风景区、松木产品生产和使用机构、建筑现场、仓库、驻军营房、木材集散地、移动通信所、电视发射台、高压线塔、电缆线路和高压线路等地区五、铁路勘察和重点区域调查(1)选择合理的路线，勘察全县松属林，线路勘察应尽量复盖分布较多的松属林分，确保松材线虫病验证率达到100%。 特别对松材线虫病发生区周围、交通沿线两侧、近3年新建的通信(电力)线路(基站)两侧、风景区(寺院)、高速公路(包括铁路)及其他项目建设现场、城镇、开发区、工业区、电视发射台和木材集散地及其包装材料经营单位等重点地区或重点地区周围的松林进行重点调查(二)重点区域调查、松材线虫病调查应对重大工程建设地、人员活动密集的重点区域实施重点监测调查。 充分利用森林监护人巡山机会，有效掌握松树的分布、生长、枯死动态，进行松树枯死原因调查，发现原因不明的枯死松树枯死情况即采样鉴定，初步镜检发生线虫(松材线虫和松材线虫等)时，立即进行广西林业有害生物鉴定中心(广西林林林)维根的调查重点调查了沿着林缘、坡谷、河溪、道路(道路和铁路)，果园、林中裸地、垃圾场、闲置地、菜园周边和池基周边等维根容易生长的地区、高速公路两侧、风景区、生态公益林区等地区。 发现怀疑威根的报告，请专家确认，尽可能在最初的时间发现疫情。六、调查方法(一)勘查。 根据当地松林分布的特征，沿着设计了易于观察所有林分的检查路线的检查路线，目视寻找枯死松树的有无、针叶树褪色、变黄、枯萎、针叶树变红褐色的松树，选定样品对象。主要考察路线有：1.古宜高基和平丹洲2 .斗江-林溪-八江3 .古宜-程村-老堡； 4 .良口洋溪富禄梅林； 5 .古宜-独窟-同乐。 勘查需要GPS轨迹记录，采用广西林业有害生物野外数据采集系统记录航迹，GPS勘查路线命名为县乡镇勘查3位数字码。 将各检查路线的GPS轨迹导入林业有害生物GIS信息管理系统进行保存。 填写发现松树枯死时的记录调查点信息，并填写附表1。(二)细查。 根据记录检查点信息检查的结果，对可能发病的林分进行了进一步调查，对死因不明的可疑松枯死树、濒死树都应进行抽样检查。 按照本方案第三点所列取样方法，抽取一定数量的样品，进行分离镜检查，确定是否有松材线虫。 各勘察地需要GPS定位记录和发生情况照片，采用广西林业有害生物野外数据采集系统记录航海地点，各地勘察GPS定位，命名为县乡镇样地3位数字码。七、各位进行调查发现枯死的松树时，调查员必须在现场正确调查枯死原因，登记分布场所、树种、小班面积、枯死株数、松墨天牛受害程度等(1)采样方法1 .采样部位一般在树干的下部(胸高)、上部(树干与主侧枝的边界)、中部(上、下部之间)这3个部位进行采样。 如果只有一部分树枝出现症状，则在树干的上部和死亡的树枝上进行取样。 外部症状明显时，可按胸高取样。 春季松褐天牛化蛹期，可在蛹室周围取样。2 .取样时在取样部位剥取树皮，直接切取100-200克木片剥取树皮，或从木质部向髓心挥手将木屑切取100-200克或取样部分分别切取2厘米厚的圆盘。3 .取样时应排除人畜破坏、森林火灾、其他病虫害等原因引起的枯死树木。4 .取样时，应考虑以下因素：松材线虫病的发病高峰一般在10-11月，针叶树变黄，树脂分泌减少，死亡约1个月至1个半月为止。松林中一般优势树先发病。由于地区不同种类松材线虫的致病性、松抗性差异等原因，部分松树只有部分枝条表现出传染病的外部症状。 这种症状在混交林中特别明显。抽样要立即重点抽取完全枯死或刚枯死的优等树(针叶为黄绿或黄褐色，未完全枯死，树皮未脱落，材质未腐烂)。5 .采集的样品应立即标上标签(记录样品编号、采集场所、树种、树龄、采集时间和样品等)。 填写样品记录表见附表3。(2)样本数林业的小班单位，表现出典型症状的松树在10株以下时，如果全部采样的10株以上，则首先抽取10株，选择剩馀数量的1%-5%。(三)样品的保存和处理；收回的样品必须立即分离鉴定。 如果需要保存的话，将木片放入塑料袋，拧紧袋口，在袋子上开几个小孔(可以直接保存木片、圆盘)，放入4的冰箱。 需要长期保存时，请始终在样品上浇水(通常在半个月到一个月之内完成分离鉴定)。样品分离鉴定结束后，必须立即销毁样品。松树线虫调查监测的具体技术操作规程见国家标准松材线虫普查监测技术规程（GB/T 234782009）。八、分离鉴定线虫分离在室内用贝尔曼漏斗法或光盘法将取回的样品线虫分离，分离时间一般需要12小时以上。 将分离的液体收集到试管和烧杯中，通过自然沉淀和离心分离进行镜检查。线虫培养免疫木保温保湿培养：将样品切短，在烧杯中加入少量清水，将木段下端浸入水中，木段上端用湿纱布复盖，在30保温保湿培养3天，注入杯中的水，可获得较多雌雄成虫，或者将样品树适当润湿，放入塑料袋中，封袋口，30分钟(3)玻璃板制作如果在清洁的载玻片的中央滴下水滴，水滴的量最好在装入盖玻片后立即充满盖玻片下面的空间。 用细针挑，用细吸管把线虫吸入载玻片的水滴中，使底沉。 带线虫的滑动玻璃在酒精灯的火焰上往返56秒，杀死线虫。 用细针排列水滴中的死线虫，用镊子夹住玻璃罩从一侧轻轻复盖。(4)鉴定1 .通常的显微镜形态检定(仅雌雄成虫以雌成虫为中心):将制作的玻璃片放置在显微镜下观察其形态，判别是否为松材线虫，填入镜检记录表。松材线虫的分离、培养、镜检技术操作规程见国家标准松材线虫病检疫技术规程（GB/T 234762009）2分子检测(适用于各虫态):松材线虫的分子检测技术采用实时PCR检测技术。九、数据整理和报告(1)数据整理调查数据以县级为单位统计调查数据(附表4、5 )，调查数据统计到乡镇级行政区级，由县级统计到市级，市级报告自治区级。 将自治区直属机关(林场、保护区和热林中心)的调查数据汇总到所属县区，报告自治区检疫站。(二)资料的报告；1 .每次调查完成后，形成调查工作总结(包括附表4、5 )，分别于6月15日