高中生物实验知识点总结

高校生物实验知识点总结一、光学显微镜的结构、成像原理和倍率计算方法结构：光学部分：目镜、镜筒、物镜、快门(大口径)和反射镜(平面镜和凹面镜)机械部分：镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(有通光孔、按压夹)、镜头转换器、粗细、细聚焦螺钉。注：目镜没有旋转螺纹，透镜越长放大倍率越小。物镜有旋转螺纹，透镜越长放大倍率越大。形象原理：映在眼球内的是倒立放大的虚像。 (物镜质量的优劣直接影响成像的清晰度)倍率：目镜和物镜倍率的乘积)注：显微镜的倍率是指直径的倍率，即长度和宽度，而不是面积。二、显微镜的使用：装置镜(镜头安装)对光装置片焦点调节观察1 .设置。 显微镜在工作台的前面稍微向左放置，在离工作台边缘810cm处设置物镜和目镜(目镜5、物镜10 )照在光上。 转动适配器，使低反射镜对准光通过孔，选择大光圈对准光通过孔。 左眼一边盯着目镜，一边将反射镜朝向光源直到视野的亮度变得适度。 为了调节视野的亮度，只有快门和反射镜，光线过强，使用小光圈，或者使用平面镜的光线较弱，所以使用大光圈，或者使用凹面镜。 选择低反射镜选择大光圈选择反射镜(左眼观察)3 .观察。 将切片或片放在载物台上，标本朝向透光孔的中心。 转动粗的聚焦螺杆(顺时针)，慢慢下降低低下侧的镜筒，直到物镜接近切片(约0.5cm )，左眼观察目镜，逆时针旋转粗的聚焦螺杆，慢慢上升镜筒，观察物体像时(找不到物体像时，可以重复一次，或移动片材使标本移动到通光孔的中心)。观察时双眼都张开，用左眼容易观察，用右眼看画。 从侧面观察镜筒从左眼观察物像细焦点的螺旋很清晰4 .高倍镜的转换。 找到物体像后，必须将观察的物体像移动到视野的中央，取下低倍镜，换算成高倍镜，用细聚焦螺杆和反射镜调整视野，直到物体像清晰为止。步骤：移动座椅旋转镜头转换器调整反射镜和光圈微调聚焦螺杆注：更换高倍物镜时，只能移动转换器，更换镜头后，只能调节细的聚焦和反射镜(或光圈)。问题1 :将低倍镜换成高倍镜后，如果看不到原像或者看不到原像，可能是原因吗？ (ABC )a、物体像不在视野内的b、焦距不在同一平面c内的载玻片为相反方向，盖玻片为下d，未更换目镜q2 :倍率与视野的关系：放大倍率越小，视野范围越宽，观察细胞数越多，视野越明亮，工作距离越长放大倍率越大视野范围越窄，可见细胞数越少视野越暗，工作距离越短。所以装束不能翻过来。5 .片材的制作和移动：制作：清水滴下材料投入复盖片材移动：物体像在哪里，载玻片在哪里移动。 (原因：物体像移动的方向与实际移动玻璃板的方向相反)6 .脏污判定：1)脏污随着载玻片的移动而移动时，会位于载玻片上2 )污垢不与载玻片一起移动，在更换目镜后消失的情况下，如果在更换目镜中的物镜后消失，则污垢位于物镜中3 )污垢不与载玻片一起移动，即使换镜也不会消失，在镜子上。7 .完成工作。 使用完毕后，取下座椅，旋转镜头转换器，逆时针旋转物镜，放入镜壳取出目镜，插入镜箱，盖上盖子。 校正显微镜。实验1 :观察细胞中DNA、RNA的分布(必修一P26 )。一、实验目的：初步掌握观察细胞中DNA和RNA分布的方法2 .实验原理：1 .甲基绿和吡咯红染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA为绿色，吡咯红使RNA为红色。 用甲绿和吡咯红的混合染色剂对细胞进行染色，可以显示细胞中DNA和RNA的分布。2 .盐酸改变细胞膜的渗透性，加速染色剂进入细胞，同时分离染色休中的DNA和蛋白质，有利于DNA和染色剂的结合。3 .方法步骤：操作步骤注意问题的说明应清洁口腔上皮细胞制载玻片，滴加质量分数为0.9%的NaCl溶液用消毒过的牙签，自己马上在口腔内侧壁轻轻刮取细胞将载玻片在酒精灯下干燥，防止污垢干涉的观察效果保持细胞原来的形态消毒防止感染，漱口避免取材失败固定片将水解干燥的载玻片置于质量分数为8%的盐酸溶液中，在300C水浴中保温5min以改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体DNA和蛋白质的分离而染色冲洗掉的涂膜用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S，洗掉残留在外面的盐酸染色滴2滴吡咯红绿染色剂在载玻片上染色5min观察最初的低倍镜观察，选择染色均匀、颜色淡的区域，移动到视野中央，清晰调整后，更换高倍物镜观察，优化观察效果实验2测定生物组织中糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18 )。1 .实验目的：用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质二、实验原理：某些化学试剂使生物组织中的有机化合物发生特定的颜色反应。可溶性还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖等)与茶碱试剂作用，可生成砖红色的Cu 2O沉淀。 这将是：葡萄糖Cu (oh )2-葡萄糖酸Cu 2O(红砖) H 2O、即Cu (OH ) 2被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2 .脂肪可以被苏丹iii染液染成橙色(或者被苏丹iv染液染成红色)。 淀粉因碘而变蓝。3 .蛋白质和缩二脲试剂起作用，引起紫色反应。 蛋白质分子中含有大量肽键，在碱性NaOH溶液中与缩二脲试剂中的Cu2发生作用，引起紫色反应。 中所述情节，对概念设计中的量体体积进行分析3 .实验材料1 .可溶性还原性糖检定实验选择糖度高、颜色白色的植物组织，如苹果、梨。 (组织颜色浅，容易观察。 中所述情节，对概念设计中的量体体积进行分析做脂肪鉴定实验。 应该选择富含脂肪的种子，花生种子最好，实验前通常要浸泡34小时。进行蛋白质鉴定实验时，可以使用含有丰富蛋白质的大豆和蛋白。四、实验试剂斐林试剂(包括甲液：质量浓度为0.1g/ml naoh溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ml的cuso4溶液)、苏丹iii或苏丹iv染液、双缩二脲试剂(包括a液：质量浓度为0.1 g/ml的NaOH溶液和b液：质量浓度为0.01g/ml的cuso4溶液)五、方法步骤：(1)可溶性糖的鉴定操作方法注意问题的说明1 .制备组织样品液。(剥皮、切片、研磨、过滤)苹果和梨组织液应暂时制备。 苹果多酚氧化酶含量高，组织液易氧化成褐色，隐藏产生的颜色。2 .取1根试管，向试管内注入2mL组织样品液。3 .向试管内注入1mL新的茶碱试剂，使其振动。 分别制备、储存构成茶碱试剂的甲液、乙液，使用前将甲液、乙液等量混合制成茶碱试剂请勿将甲液、乙液分别放入苹果组织样品液中进行检查。 菲林试剂不稳定，甲、乙液混合保存后，生成的Cu (OH ) 2在70900C下分解为黑色CuO和水分别加入甲、乙液有可能与组织样品液反应，没有生成Cu (OH ) 2。4 .试管放入装有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察溶液颜色：浅蓝色茶色砖红色(沉淀)用试管夹住试管上部，使试管底部不接触烧杯底部，试管口不适合受试者。也可以用酒精灯直接加热试管。 防止试管内的溶液从试管中飞出烫伤缩短实验时间。(2)脂肪的鉴定操作方法注意问题的说明花生种子浸泡、去皮、切子叶片，将片放入载玻片水滴中，用吸水纸吸片水。 干燥种子要浸泡34小时，新花生浸泡时间可以缩短。 浸渍时间短，切片困难，浸渍时间长，组织柔软，切出的切片难以成形。 切片应尽可能薄，以便于观察。子叶片上滴加苏丹iii或苏丹iv染液23滴，染色1分钟。 染色时间过长是不好的。用吸水纸吸取薄片周围的染液，用50%的酒精洗涤浮色，吸取酒精。 酒精用于清洗浮色，不清洗浮色会影响橙色脂肪滴的观察。 同时，酒精是脂溶性溶剂，可以使花生细胞的脂肪粒子溶解在油滴中。用吸水纸吸取纸张周围的酒精，滴加12滴蒸馏水，盖上玻璃罩。 滴清水可以防止盖玻璃盖住时产生气泡。低倍镜下发现花生子叶片最薄处，细胞可见橙色或红色圆形颗粒。 服装不能放得太长。 时间一长，油滴就会溶解在乙醇中。实验观察DNA和RNA在细胞内的分布实验原理： DNA绿色，RNA红色分布：真核生物DNA主要分布于细胞核，线粒体和叶绿体内也含有少量DNA的RNA主要分布于细胞质。实验结果：细胞核呈绿色，细胞质呈红色实验二物质鉴定还原糖菲林试剂砖红色沉淀脂肪苏丹III 橙色脂肪苏丹IV红色蛋白质双缩二脲试剂紫色反应1 .还原糖的检验(1)材料选择：还原糖含量高，白色或接近白色，苹果、梨、萝卜等。(2)试剂：菲林试剂(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液、乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)目前正在配合中。(3)工序：将试样液2mL放入试管放入1mL刚调制的菲林试剂(将菲林试剂的甲液和乙液等量混合后放入)将水浴加热2min左右观察颜色的变化(白色浅蓝砖的红色)。模拟尿糖的检测1、样品：正常人尿和糖尿病患者尿2、检验方法：菲林试剂(水浴加热)或班尼试剂或尿糖试验纸3、结果：(用菲林试剂测定)试管内发生砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿，没有发生砖红色沉淀的是正常人的尿。4、分析：糖尿病患者尿液中含有还原糖，与菲林试剂反应产生砖红色沉淀，正常人尿液中无还原糖，无反应。2、脂肪的检测(1)材料选择：脂肪量越多的组织，越好像花生子叶。(2)步骤：制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片的中央灬染色(苏丹iii染液23滴切片上23min后吸引染液滴下体积分率50%酒精洗涤浮色吸引多馀的酒精)灬制作薄片(12滴清水在材料切片上盖上玻璃罩)灬镜检查鉴定(显微镜对光低倍镜观察高倍镜观察橙色的脂肪粒子)3 .蛋白质的检测(1)试剂：缩二脲试剂(a液：0.1g/ml NaOH溶液、b液：0.01g/mL的CuSO4溶液)(2)工序：在试管中加入样品液2ml加入双脲试剂a液1mL，加入振荡双尿试剂b液4滴，观察振荡颜色变化(紫色)考试要点提示：(1)常见的还原性糖和非还原性糖是什么？葡萄糖、果糖、麦芽糖是还原性糖淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。(2)还原性糖植物组织取材条件？糖度高，颜色接近白色或白色，苹果、梨、卷心菜叶、萝卜等。(3)研磨中加入石英砂为什么不加入石英砂对实验有什么影响？加入石英砂是为了充分研磨。 不添加石英砂的话，组织试料液中的还原性糖减少，检测时的溶液颜色的变化变得不明显。(4)菲林试剂甲、乙两种液体的使用方法是？ 混合的目的是什么？ 为什么现在混用？生成混合使用氢氧化铜； 氢氧化铜不稳定。(5)在还原性糖中加入菲林试剂后，溶液颜色变化顺序为浅蓝色茶色砖红色(6)花生种子切片为什么薄，只有薄切片能透光，用显微镜观察。(7)转动细焦螺旋时，花生切片的细胞为什么总是一部分清晰，另一部分模糊？切片厚度不均匀。(8)脂肪鉴定中的乙醇作用是什么？ 洗掉浮色。(9)缩二脲试剂a、b两种液体混合使用吗？ 首先加入a液的目的。 如何比较看颜色的变化？不能混合首先加入a液的目的是使溶液成为碱性，首先比较一下大豆组织样品液。实验3观察叶绿体和细胞质流动1、材料：新鲜苔藓类叶、黑藻叶或菠菜叶、口腔上皮细胞黏附片2、原理：叶绿体经显微镜观察，呈绿色、球形或椭圆形。用健那绿染液染色的口腔上皮细胞的线粒体呈蓝绿色，细胞质接近无色。知识概述：采访电影的低倍观察高倍观察考试要点提示：(1)为什么不直接取苔藓类的叶子，直接取菠菜的叶子？苔藓类的小叶很薄，只由一层细胞构成，菠菜的叶子由很多层细胞构成。(2)拿菠菜叶子的下表皮时，为什么要带一点叶肉？表皮细胞除了保护细胞外，一般不含叶绿体，叶肉细胞多含叶绿体。(3)如何加快黑藻细胞质的流动速度？ 最佳温度是多少？用光照射，提高水温，切伤一部分叶片的25左右。(4)观察黑藻哪个部位的细胞，细胞质流动最明显？叶脉附近的细胞。(5)如果视野中某细胞的细胞质的流动方向为顺时针方向，则片材中该细胞的细胞质的实际流动方向如何？还是顺时针方向。(6)一般细胞的细胞质不流动，只流动黑藻等少数植物的细胞质吗？不，活细胞的细胞质都在流动。(7)观察植物根毛细胞的细胞质流动，应如何调节显微镜视野的亮度？视野必须适度地暗淡。 可用反射镜的平面镜采光或缩小光圈。(8)强光照射下叶绿体向光面的变化如何？ 叶绿体的受光面积越小越适合光源。实验4观察有丝分裂1、材料：洋葱根尖(洋葱、大蒜)2、步骤： (1)培养洋葱根尖；(2)片材制作制作流程：解离漂洗染色制作1 .解离：药液：质量分率为15%盐酸、体积分率为95%的醇(1:混合液)。时间： 35min .目的：使组织中的细胞相互分离2 .漂洗：用清水漂洗约10min。 目的