细菌培养标本的_采集、运送与处理

细菌培养标本的采集、运输和处理(需氧)、内容概述、细菌培养基本原则中常见的临床标本的采集、运输和处理、细菌检测始于正确的采访，细菌培养标本的正确采集、运输和处理是临床细菌检测成功的关键。 由于没有优质标本，实验室采用任何先进的分离、鉴定和药敏技术都是徒劳的，可能误解临床医生。 微生物学检测标准化应首先从标本中采集，从运输和处理标准化入手。 细菌室工作人员、临床医师和护士应了解保证标本质量的重要性。采样的普遍原则应当避免自己菌群的污染，尽可能确定代表感染过程的标本。 选取正确的解剖部位，用适当的技术和设备采集标本。 选择合适的部位采集用于厌氧菌培养的标本。 收集标本量充足，量少可能导致假阴性结果。 每个标本都标明了名字、标本的来源、采集部位、时间和日期。 将标本放入病原体生存、泄漏、无菌、潜在安全性问题均无的容器中。标本的运输原则是，所有标本必须立即送到实验室。 最好不要超过两个小时。 标本处理必须延误的，应在适当条件下保管，但不得超过24小时。 对环境敏感的微生物有志贺氏菌(应及时处理)、淋菌、脑膜炎奈瑟菌、流感菌(对低温敏感)。 脑脊液、生殖器、眼睛和内耳标本不要冷冻。 在什么情况下需要使用运输培养基？ 采集患者家中采集的标本外检标本由医院送入实验室过程、培养基原则、所有细菌需氧菌、厌氧菌、需氧菌携带非营养培养基的细菌存活：标本后，不得超过24小时增加或减少活菌数量， 未贴有拒收标本的原则标签或错误贴有标签的运输温度和运输工具不适当或泄漏的容器明显受污染的标本干燥的擦拭器标本的量在同一天内不满足相同检查条件的重复标本(血液培养除外)，问题标本的处理是送检医生或护士向用非损伤方法取得的标本发送新的标本。 损伤程序取得的标本可以与临床联系处理，但必须在申请书中注明问题。 特殊情况下，即使标本质量受损也要处理。 疑难病例的传染性疾病会诊、血液细菌培养、临床上疑似败血症、脓毒血症或其他血流感染的患者，需要通过血液细菌培养查明病原。 及时将病原菌从患者血液中分离出来，正确实施有效的抗菌治疗，有助于提高治愈率和降低医疗费用。采血的时机，临床症状出现后应尽快采血培养。 最好在发热初期和高峰时或寒战时。 原则上在使用抗菌药物之前，对于使用药物而病情无法停药的患者，也必须在使用下一种药物之前采血。 采血部位，通常采血部位为肘静脉。 疑似细菌性心内膜炎的，最好用肘动脉或股动脉采血。 多次采血时，应在不同地点进行。 请不要从血管插管内采血。 禁止在静滴抗菌药物的静脉里采集血液标本。 采血次数和间隔，急性感染患者：从双臂分别取2个血样。 感染性心内膜炎患者：24h内抽血3次，每次间隔30分钟以上抽血。 发热原因不明患者：24-48h后可采血，间隔60 min以上。 采血方法、采血部位局部皮肤应严格消毒。 将采集的血液注入血液培养瓶之前，必须换针或消毒。 血液培养瓶口也进行消毒，酒精挥发后(建议用酒精灯烧瓶口)注入血液样品。 采血量，每次采血量为成年人510ml，婴幼儿12ml，培养基与血液之比宜为10:1，稀释血液中的抗生素。 每增加1ml血液量，平均阳性率提高3.2%。抗凝剂、0.025-0.05%聚氰酸酯磺酸钠(sodiumpolyanetholsulfonate，SPS )。SPS对抗凝固抗食抗体和某些抗生素有拮抗作用。 培养条件根据患者感染、用药情况选择不同的培养瓶。 真菌培养通常可与培养共用氧气瓶。 不需要每次血液培养都进行厌氧培养。 用同样的采血既需要氧气又需要厌氧的情况下，首先需要厌氧后再需要氧气。 黄色小儿瓶蓝色未使用抗生素好氧绿色未使用抗生素好氧()紫色未使用抗生素厌氧橙未使用抗生素厌氧()，采集胸腹水和脑脊液标本用：无菌操作穿刺提取，直接注入培养瓶。 少量注入小儿瓶，大量注入成人瓶。 运输：床边无接种，用带盖无菌容器检查。血液和无菌体液的处理，提取血液和无菌体液后立即放入血培养瓶，立即检查和室温保存，不得放入冰箱！ 实验室收到标本后必须立即放入血液培养器。 夜班收到标本放在室温，不放35的烤箱。 急诊室送来的样品和室温下放置的样品，要先检查瓶底有没有变化，变成黄色后，要先抹片盲传，做防漏检查。 尿标本、标本采集时间：应在给药前或停药后5天取标本，早上开始尿首次在膀胱内停留68小时以上(给细菌以充分的繁殖时间)。 尿标本采集方法，中段尿：女性采集前用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴和尿道口。 男性应将包皮翻过来洗，用0.1%的新洁面消毒尿道口，用灭菌纱布擦拭。 弃前段尿，用无菌杯收集中段尿。 导尿管导尿无菌操作导尿可以减少尿道污染。 留置导尿者用碘酒消毒尿道口的导尿管壁，用连空气缸的细针斜穿管壁吸尿或拔去引流的尿袋，丢弃导管的前段尿，留下数毫升无污染的膀胱内尿进行检查。 不能从尿袋下端的嘴里取标本。 长期留置导管者必须在更换新导管后取尿标本。 尿标本采集方法，膀胱穿刺法：是采集尿的最佳方法，特别是检查厌氧菌，但由于是侵袭性操作，临床上很少使用，采集的标本可以直接注入血培养瓶。 肾盂尿取样法：要求泌尿科医生采样，注明左右标本可直接注入血培养瓶。尿标本的运输和保存，无菌杯立即在检查室温下放置尿标本，尿内细菌的数量显着增加，影响病原菌和污染菌的区别和细菌的定量。 不能马上派检查员去。 你可以准备4的冰箱。尿标本处理，2 h内处理完毕培养基：血琼脂和麦康凯琼脂。 接种方法： 10ul接种环垂直放入充分混合的样品中取尿，划线方法从上至下划直线，画垂直线，重复划线成网格状。 在35下培养18-24h，观察结果。、呼吸道标本、标本采样质量好坏直接影响下呼吸道病原学的诊断。 不当采样导致抗菌治疗失败，出现耐药菌。 标本采集时间，痰液：晨痰好。 多数患者早晨痰多、痰量少，早晨采集最容易。 对于通向支气管扩张症和支气管的肺空洞患者，早晨起床后可进行体位引流，采集大量痰液。 最好在投用抗菌药前或停止投用1天后采集标本。 鼻咽拭子：抗菌药物治疗前最好采集。 咽头也是呼吸和食物通道，早上起床后采集也不错。痰标本采集方法，自然咯痰：清水反复漱口后，强烈咯痰，呼吸器深部抽出新鲜痰液，用无菌容器检查。 痰量极少者可用45的10%氯化钠溶液雾化吸入导痰。 气管穿刺法：适用于昏迷和咳嗽无力患者。 纤维支气管镜提取法：适用于纤维支气管镜检查和治疗的患者。 纤维支气管镜可以直接在病灶部位采集高浓度感染病原菌，但也不能完全避免咽喉部位的正常菌群感染。儿童痰采法：弯曲舌板后压舌头，用棉拭子放入咽头，儿童按舌头刺激咳嗽时，使肺部或气管分泌物附着在擦拭子上取样。 双侧肺部感染和人工呼吸道如气管切开和气管插管患者，应用吸痰管通过人工呼吸道在叶支气管水平吸痰液。痰标本的运输和保存，患者留痰后1h内必须运送到实验室的人，可暂时保管4的冰箱。 在室温下放置数小时，口咽部固定的非病原菌过度生长，肺炎链球菌、葡萄球菌和流感菌检出率明显降低的未使用培养基样本送入实验室后，30分钟内应接种该培养基，痰样本处理、培养前处理：痰液清洗：痰液含有大量正常菌群影响病原菌检出用无菌生理盐水10-20ml冲洗2、3次，继续处理最后残留的脓痰。 痰液均质化：痰液中加入等量的约pH7.6的10g/L胰酶溶液，35下放置90 min，痰液均质化，对细菌培养无明显影响。痰标本处理，判定标本是否通过洗涤痰液克染色后，用低倍镜检查扁平上皮细胞数量的扁平上皮细胞数量的10/lp，确认新取标本，不应培养的标本来自下呼吸道后，用油镜观察细菌的着色、形态及排列，进行初步病原学诊断。 要发现白细胞内的细菌，必须报告。 痰标本的处理、培养基：血琼脂、麦康凯琼脂、嗜血杆菌巧克力琼脂、沙保弱琼脂。 刻划方法：划分为四个区域，在划定下一个区域之前，先将环烧伤接种，冷却后刻划。 下一个区域与上一个区域交叉4-6次。 在35下用510%二氧化碳培养24-48h。，咽拭子和口腔拭子在采集前重复用冷热水漱口，拭子的选择：无菌，要求不含抑制剂的预先润湿拭子(非常重要)检查者将舌头向外侧拉，尽量向外侧拉小舌头，将棉拭子向舌根对于化脓性扁桃体炎和口腔念珠菌症，直接取出病灶部位，使擦拭子不接触口腔和舌粘膜。 减少污染。 立即发送检查。 在室温下保存。 接种该痰，经保护性毛刷标本处理取出后，加入无菌生理盐水1ml立即检查。 振动，离心，涂膜染色。 接种培养基多为痰接种划片方法和尿培养、粪便培养、社区感染标本：社区感染性腹泻、志贺菌、沙门氏菌、弧菌、埃尔森菌等肠道病原菌感染。 将标本接种到适当的选择性分离培养基中即可。 弧菌、埃尔森菌增加细菌培养，提高检出率。 住院患者腹泻标本：大量使用广谱抗生素后，常引起菌群失调。 住院超过3天，或住院诊断不是胃肠炎不进行正常粪便培养。 应考虑梭状芽胞杆菌的培养和毒素测定。 常见病原菌有困难的梭菌、弯曲菌、葡萄球菌、肠球菌、念珠菌等。 选择培养基根据涂膜的结果而不同。粪便标本的采集应在发病早期及尽量用抗生素治疗前采集。 排便后，选择有脓血、粘液部分的粪便(液状粪便取絮状物)，稀便1ml以上，固体便1克以上，无便患者可使用直肠拭子。 对于难以取粪便的人和婴幼儿，可以用肛拭采集。 用无菌甘油水润湿擦拭器的前端。 然后插入肛门约45cm (幼儿约23cm )，轻轻旋转，擦去直肠表面粘液后退出，放入搬运培养基进行检查。 除婴儿及有活动性腹泻症状的患者外，不建议用刮水器进行常规病原检查。粪便标本运输、卡波普管：普通培养碱戊酮水：霍乱菌培养难菌培养：及时送检，厌氧运输培养基。粪便标本处理，一般培养： MAC、SS、10%羊血曲霉培养基(暂无)四区划片(同痰标本) MAC，SS35下10%羊血曲霉培养基425%-10%二氧化碳培养霍乱菌培养：接受标本时间和患者电话碱性胨水35下培养68小时后移植4号平板(四区划片)继续35培养，取生殖器、尿道标本，男性患者：尿道标本：2h不排尿，清洗龟头后，用碘伏等消毒，挤出分泌物，或用专用细擦拭器插入尿道口旋转1-2cm取分泌物，立即接受检查。 前列腺液标本：由医生按摩前列腺，无菌操作从尿道口取前列腺液放入无菌杯检查。生殖器、尿道标本采集、女性患者：成人患者：应在扩张器的支持下，用无菌擦拭器擦去分泌物，用新的无菌擦拭器紧贴宫颈内道进行检查。 未成年患者：不应使用阴器，无菌刮水器在阴口取分泌物检查。 尿道：2h不排尿，擦去尿道口渗出物，插入尿道口旋转1-2cm取出分泌物，立即检查。 生殖道、尿道标本处理，即刻普通培养和淋菌培养：室温支原体、衣原体： 4保存，生殖道标本处理，普通培养：血琼脂三区划线35培养淋菌培养淋菌巧克力平板预温后，即刻接种三区划线355-10%CO2培养杜氏杆菌培养嗜血菌巧克力平板， 立即用三区划线355-10%CO2培养手术创口、烧伤创面和脓液处理、无菌生理盐水擦拭病灶表面后，用棉拭子取病灶深部脓液和分泌物，放入运输培养基进行检查。 采用擦拭器2个，培养1个，涂层1个。 开放性脓肿：尽可能抽吸或将擦拭子插入伤口，紧贴伤口前端取样。 最好从脓肿的底部或脓肿的壁上采集。 封闭性脓肿：用碘酒、酒精消毒皮肤后，最好用无菌注射器抽取脓液检查，进行厌氧培养。 取样前病灶应避免局部使用抗菌药物