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文档简介
实验一毛细血管采血法测定红细胞计数Hb要求通过实验熟练掌握毛细血管采血技术、细胞计数板的结构和用法,掌握红细胞计数的原理、方法和临床意义。 掌握Hb测量的实验原理和操作方法。 一、毛细血管采血法、实验步骤1 .酒精消毒药指头2 .酒精挥发(疼痛和稀释),皮肤干燥后左手拇指、食指、中指固定患者无名指端,右手持采血针,迅速穿刺指端。 3 .擦去第1 d眼的血(有组织液稀释和易凝固),用采血管采血需要血量4 .擦去采血管外周的血液(量正确),尽快放入准备了采血管的稀释液中,将血液挤出到底,用上清洗采血管3次,混合。 4 .采血结束后,消毒干棉球压迫伤口,帮助止血。 (1)血红蛋白吸引管的使用,1 .吸引管的构造2 .使用拇指和中指握住橡胶的头部,用食指堵住橡胶头部的小孔,压迫橡胶的头部进行吸引(吸引时手慢慢离开的话,血会被橡胶的头部吸入),达到必要量时(或稍微多一点时) 接着,将吸引管的吸引端接触手指端的皮肤,将压紧的橡胶头离开,擦去吸引管,放入试管的底部,用上清洗3次),(2)计数板的使用(3)计数的顺序和原则,1 .按一定的顺序计数的2 .压线细胞的数量几乎数不清,(4)显微镜的使用,1 .打开光圈,在低倍镜下使光源适当2 .将计数板放在载物台上,以较低的倍率找到刻度线,调整到更高的倍率。 二、红细胞计数,原理稀释红细胞后,进行高倍镜计数,换算成每升血液的红细胞数。 1 .操作,1 .红稀释液2ml.2 .用末梢采血法采血的10毫升加入稀释液中.3.混合后静置10分钟放入4 .池中,静置5分钟静置5分钟.计算中央四角的四角和正中间的五个四角。 6 .结果公式: HBC/L=数得到的细胞数*5* 10 * 200 * 106,2,2 .注意事项,1 .采集第一滴血包括组织液(稀释作用和促凝作用)2.样品准确,不能气泡,血管外多馀的血必须擦拭3 .血红蛋白吸管必须清洗干净充电电池不能有气泡。 否则,必须再次补充电池,二、Hb测定,原理:高铁氰化钾将Hb氧化为高铁Hb,然后高铁Hb与CN-络合,形成棕红色的氰化高铁血红蛋白。 操作:5ml氰化试剂20ul外周血,混合静置10min,然后540nm比色。 hbg/l=a/(44 * 1.000 cm ) * 64458 mg/1000 * 251,3 .参考值和临床意义,RBC成年男性(4.05.5)1012/L成年女性(3.55.0)1012/L新生儿(6.07.0)1012/LHb成年男性: 120160g/L; 成年女性: 110150g/L; 新生儿: 170g200g/L; 老年人(70岁以上):男性: 94122g/L; 女性: 87112g/L。 红细胞和血红蛋白生理性增高代偿性精神要素的病理
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