第十章甾体激素类药物的分析.ppt

第十章甾体激素分析、主要内容、类型及结构特征、鉴别、含量测定、(1)基础知识母核；碳数；构型、构型的A键和E键“”代表双键，1。分类和结构特征，(2)分类和结构特征类固醇激素分为：1。根据其来源和生理功能的类别和结构特征。肾上腺皮质激素(皮质激素)，1。类别和结构特征，可的松，氢化可的松，强的松，强的松，和，1。类别和结构特征。氟氢化可的松氟氢化泼尼松龙倍他米松(9-F氢化可的松)(6-F氢化泼尼松龙)(16-甲基-9-F氢化泼尼松龙)，类别和结构特征，地塞米松磷酸钠曲安奈德(16-甲基(曲安奈德，-泼尼松龙)现称为曲安奈德)，氟轻松(皮肤松弛剂)，氯氟柳氮唑(哈苏)。目前名称：哈司奈德)，倍氯米松，结构点：1)21C衍生物2)A环：4-3-酮(，-不饱和酮)，具有紫外吸收。3)C17:-醇酮基具有还原性，可被各种氧化剂氧化。4)C11:羟基或羰基、C1/C2双键、6、9卤素、16或16-甲基、1、类别和结构特征、2、雄激素和蛋白质合成代谢类固醇：雄激素和去雄激素、1、类别和结构特征、睾酮、甲基丙酸睾酮、(甲基睾酮)、(丙睾酮)、睾酮的生理作用(1)雄激素效应；(2)蛋白质同化。4个卤素引入的C10位角甲基的同化作用增加以除去蛋白质，而雄性化作用减少。1.类别和结构特征。1.类别和结构特征。4-氯睾酮苯丙酮。1998年，第八届澳大利亚世界游泳锦标赛的5名成员接受了兴奋剂检查，1名教练携带兴奋剂。结构特征：1)19C衍生物，雄激素；18C衍生物或C4位置引入卤素，蛋白质合成代谢类固醇2)A环：，-不饱和酮，4-3-酮3)C17:-羟基，通常带有-取代基，1，类别和结构特征，3，孕激素：孕酮黄体激素或孕酮，1，类别和结构特征，孕酮(孕激素)，己酸孕酮(17-羟基己酸酯)，醋酸甲羟孕酮(6-甲基-17-羟基乙酰孕酮)，醋酸甲羟孕酮(6-6-羟基孕酮) 类别和结构特征，4，女性兴奋类：雌激素类，1 .类别和结构特征：雌二醇，雌二酰戊酸，类别和结构特征：炔雌醇，炔雌醇，环戊基醚，结构特征：1)18C衍生物2)环a:苯环，C3-羟基是酚羟基，具有酸性3)C10位无角甲基C17具有羟基或酮基，乙炔基。 类别及结构特征概述：分析鉴定组：1)显色反应1)母核：能与硫酸、高氯酸、磷酸、盐酸等强酸及荧光发生显色反应(1)样品硫酸显色物质(荧光)反应机理：考虑母核质子化。(2)比色测定样品硫酸-乙醇黄色(荧光)雌激素和薄层色谱检测试剂(2)官能团：(1)-醇酮基：费林试液，Cu2O红色沉淀四唑盐生成甲硫氨酸，(2)鉴定，(2)酮基黄体酮呈蓝紫色，(2)鉴别，(3)鉴别，(4)鉴别，(4)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(4)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别，(5)鉴别C20-酮C11酮空间位阻反应，C20酮反应慢饱和酮 4-3-酮 1，4-3-酮，(2)鉴定，(4)反应性亚甲基反应C20，17，11，3羰基C21，16，12，2反应性亚甲基C16是重要的，发生齐默尔曼反应，(2)鉴定，(4)鉴定，(5)反应氧气瓶燃烧或(7)炔基在羟基(OH)酯化后回流水解以测定熔点(6)卤素，(2 并具有高分离效率鉴别和其他类固醇检查在药典2005版中有16种标准物质溶液对照方法用该方法鉴别，并比较了Rf值，(2)鉴别，(3)鉴别，(4)鉴别，(4)鉴别，(5)用该方法鉴别标准物质溶液，(5)用该方法鉴别标准物质。 3.红外分光光度法是唯一可靠的。美国药典(30)英国药典(2005)日本药典(14)中国版。P(2005)和大多数类固醇激素药物采用，2。鉴别方法有很多：容量比色法、紫外分光光度法、荧光光谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。3.内容确定，1。紫外分光光度法(紫外分光光度法)中国药典和英国药典采用“其他类固醇”来检查合格的原料药是否溶于乙醇，然后必须对测定制剂进行处理，然后进行测定。3.含量测定。1)基本基团是：(1)4-3酮(三种类固醇激素具有)max240nm(醇溶液)。17000(2)芳香A环(一种类固醇激素已)max280nm(酒精溶液)，2000 2300，(3)含量测定，(2)注意问题(1)“其他类固醇”检查必须合格，(2)前处理后需要测定240nm附近的赋形剂吸收量(3)测定方法样品配制成酒精溶液测定A，计算为A=ECL，(3)含量测定，2。四氮唑比色法：四氮唑方法1)原理：在碱中，-醇酮基团将四氮唑定量还原成甲氧基，用比色法测定。(3)含量测定，(2)试剂(1)红色四唑啉(Redtetrazoline)RT三苯基四唑啉氯化物(TTC)，和(3)含量测定，红色 max=480 490 nm，=16000，(2)蓝色四唑啉)BT3，3-二甲氧基苯基-双-4，4-(3.5-二苯基)四唑氯化物教师变成单甲氧基氮(红色)然后形成二甲氧基氮(蓝色)。美国药典使用这种试剂。(1)美国药典法(英国药典法)(2)中国药典。p法(BP法、RT法、TTC法)，(3)含量测定，(4)讨论(1)结构、官能团位置a，游离体其酯可的松醋酸可的松b，单酯复合酯琥珀酸酯新戊酸酯，(3)含量测定，(4)。当c，C11-酮 C11醇可的松氢化可的松d，C16有取代基时，反应被抑制。用氟轻松(C16-oh)的rt法测定时，含量很低。iii .含量测定，(2)溶剂效应a乙醇：水含量：5%，无效应；10%，吸收率降低10%；30%，完全抑制。b其他：极性小，速度快，CH2Cl2反应增加6.1倍，CH2Cl 3反应增加6.7倍，第三，含量测定，(iii)试剂质量和加入顺序RT无色，空白a值低；BT为淡黄色，空白A值高的乙醇溶液的A值aBT不应超过0.03 0.06 BBT用氢化可的松(22.00)C校正，即用试剂的加入顺序为：先加入四唑盐，然后进行碱化，3、含量测定，3、异烟肼法1)原理：3、含量测定，异烟肼为淡黄色最大380 nm，2)讨论：反应的特异性4 30分钟1，4-3-酮，在室温下，6h5(10)-3-酮(异鲸蜡酮)，反应很慢C11-酮，几乎没有反应C20，17-酮，反应很慢，条件的变化可以测定，三，含量测定，三，含量测定，强酸性，皮质激素21-苯腙的形成在这种方法中称为波特-西尔伯反应(酸碱度法苯肼)，3。 含量测定，4。考伯反应和铁酚试剂比色法1)考伯反应雌激素黄(max465nm)桃红(max520nm)考伯提出，称为考伯反应，三，含量测定，2)反应条件环一个芳香环，C3或C2有含氧侧链d环C17 -OH或C=O，C16也可能在C13位有甲基，三，含量测定，3)双色存在问题：浓度，组成，反应时间和温度对黄酚试剂杂质干扰的影响：其他物质和稳定剂，赋形剂具有背景吸收、三、含量测定、4)铁酚试剂比色法(NH4)2Fe(SO4)26H2O H2SO 4 H2O 2NH4Fe(SO4)2铁酚试剂铁(Fe3)效应：(1)促进黄色发展速度和强度；(2)加速黄色到红色；(3)增强红色的稳定性。苯酚的作用是：(1)消除反应产生的荧光(2)加速红色的形成。硝酸银含量的测定-氢氧化钠滴定法测定含量生成硝酸和氢氧化钠滴定法同时测定醋酸地塞米松(甲基睾丸酮内标)、丙酸睾丸酮(苯丙酮)、孕酮(己烯雌酚)和炔雌醇(醋酸甲羟孕酮)采用反相高效液相色谱内标法。孕酮测定：1)色谱条件色谱柱：ODS流动相：甲醇-水(65: 35)紫外检测器，254nm2)系统适应性试验(1)分辨率：内标物的分辨率r符合要求(2)根据孕酮峰理论塔板数不小于1000，(3)含量测定，(3)内标溶液测定：己烯雌酚用甲醇配制成1毫克/毫升参考溶液，孕酮用甲醇配制成1毫克/毫升，分别准确吸取5毫升溶液和5毫升内标溶液。 在25毫升容量瓶中加入甲醇稀释至刻度，摇匀，第三步，测定含量，样品溶液：取黄体酮样品，用甲醇配制成1毫克/毫升，分别准确吸取5毫升溶液和5毫升内标溶液，放入25毫升容量瓶中，加入甲醇稀释至刻度，摇匀。 测定：取5l参比溶液和5 L样品溶液进行进样分析，进样分析由峰面积根据内标法计算。第三，含量测定和杂质检测一般采用高效液相色谱法：丙酸睾酮：其他类