动物细胞工程

动物细胞工程,动物细胞工程常用的技术手段：,动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合单克隆抗体,(基础),一动物细胞培养的概念,动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。,二动物细胞培养的过程,1为什么选用幼龄动物？,2为什么细胞培养要分散成单个细胞培养？怎么分散？,3用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要成分是什么？用胃蛋白酶行吗？,思考,因为动物细胞增值能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。,成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增值。从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,1.在进行动物细胞培养时，用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。2.动物细胞培养适宜的PH为7.27.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。,相关概念,细胞贴壁,悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。（要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。）,相关概念,接触抑制,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。,二动物细胞培养的过程,原代培养：将动物组织用胰蛋白酶处理成单个细胞，配制成一定浓度的悬浮液，放入培养瓶中在培养箱中培养的过程。通常把动物组织消化后的初次培养称为原代培养。传代培养：培养瓶中的细胞越来越多，用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成悬浮液，分瓶培养的过程。即原代培养后再处理后的后续培养。,相关概念,胚胎或幼龄动物的组织器官,细胞悬液,10代细胞,40、50代细胞,原代培养,传代培养,无限传代,相关概念,胚胎或幼龄动物的组织器官,细胞悬液,10代细胞,40、50代细胞,原代培养,传代培养,细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到4050代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。,无限传代,（细胞株）,（细胞系）,取的组织、器官,细胞悬浮液,酶,贴满瓶壁的细胞,单个细胞,加入液,动物胚胎或幼龄动物,胰蛋白,培养,接触抑制,归纳过程,出现现象,剪碎,培养,加液,4050代细胞(细胞株),无限传代（细胞系）,传代培养,胰蛋白,加酶,原代培养,讨论,1、胰蛋白酶处理细胞会把细胞消化掉吗？,3、动物细胞培养能否像植物组织培养那样获得完整个体？,2、为什么使用冷冻保存的细胞是10代以内的细胞？,4、体外培养的细胞需要哪些物质和环境条件？,1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）3、温度和PH36.5度左右,7.2-7.44、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）,保证细胞顺利的生长增殖,三动物细胞培养的条件,大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据,二动物细胞培养的条件,五植物组织培养和动物细胞培养的比较,全能性,增殖,蔗糖,动物血清,细胞株、细胞系,细胞,某些蛋白质,下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：（1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自_。（2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是，然后用酶处理，这样做的目的是。,动物胚胎或幼龄动物,剪碎,胰蛋白,使细胞分散开来，与培养液充分接触，便于培养,（3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有_等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞停止分裂增