分解纤维素的微生物的分离知识点PPT课件

.,课题3,分解纤维素的微生物的分离,.,纤维素酶：,纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。,纤维素,纤维二糖,葡萄糖,.,甲乙,在2支20mL的试管中，分别放入16cm的滤纸条，再分别加入pH为4.8、物质的量浓度为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液10mL、11mL。在加入10mL缓冲液的试管中加入1mL纤维素酶（7080U/mL）。将二支试管固定在50mL的锥形瓶中，在摇床上以140r/min的转速振荡反应1h，观察结果。,4、纤维素酶活性的测定实验：,.,.纤维素分解细菌的筛选：,1.方法：,刚果红染色法这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选,刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。,2.原理：,.,土壤取样,选择培养,梯度稀释,将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,挑选产生透明圈的菌落,二、实验设计,（此步可以省略）,.,2、选择培养的操作方法,将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养1-2d，直至培养液变混浊。吸取一定量的培养液，转移至另一瓶新鲜的选择培养基中，以同样的方法培养到培养液变混浊。,选择培养,（富集培养）,增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离所需要的微生物。,1、目的：,.,刚果红染色法,方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应,方法二：在倒平板时就加入刚果红,.,为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_实验，纤维素酶的发酵方法有_发酵和_发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的_含量进行定量测定。,课题延伸,发酵产纤维素酶,液体,固体,葡萄糖,.,碳源氮源生长因子无机盐水,微生物需要的五大类营养要素物质,（一）微生物需要的营养物质及功能,.,概念来源常见的生长因子,微生物生长不可缺少的微量有机物酵母膏、蛋白胨、动植物组织的提取液维生素、氨基酸、碱基等,生长因子,思考,是否培养所有微生物的培养基中都需要加生长因子？,.,1、碳源,2、自养型微生物利用无机碳源，异养型微生物利用有机碳源；,有机碳源：如糖类,无机碳源：如CO2,5自养型微生物的能源是光能或无机物氧化释放的化学能；异养型微生物的能源是和碳源一样（有机碳源）,3、自养型微生物利用无机氮源，异养型微生物可能利用无机氮源也可能利用有机氮源,4、有机碳源也是异养型微生物的主要能源,.,8有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物发酵来生产，为了提高酶的产量，请你设计一个实验，利用诱变育种的方法，获得产生纤维素酶较多的菌株。(1)写出实验步骤：_.制备含有_的固体培养基。_._.(2)预期实验结果结论：,.,8.答案（1）将培养好的菌株分为两组，一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不处理作对照。把诱变组的大量菌株接种到多个含有纤维素的固体培养基上，同时对照组接种未处理的菌株。把它们置于相同的条件下培养一段时间后，取培养基用刚果红染色，观察记录菌落周围透明圈的大小情况,.,(2)诱变组中菌落周围的透明圈与对照组相比较大，说明诱变育种获得了高纤维素酶产量的菌株诱