生物人教版高中二年级选修1 教学课件-DNA的粗提取与鉴定_第1页
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文档简介

【新闻链接】,今年8月,一则新闻一经播出,震惊全国。,甘肃白银系列杀人案告破,课题1DNA的粗提取与鉴定,学习目标,1)通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。2)概述DNA的粗提取和鉴定的原理。3)通过对DNA的粗提取实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。学习重点:DNA的物理化学性质。学习难点:粗提取的DNA的除杂。,导学案反馈,实验思路,1)DNA应从哪提取?2)怎样将DNA与细胞中的其他物质分离?3)怎样鉴定提取物是否为DNA?,DNA的溶解性,当NaCl浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最小,浓度为2mol/L时,DNA的溶解度最大。利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出。,DNA的特性,2mol/L,DNA不溶于酒精细胞中某些蛋白质溶于酒精,DNA不溶于酒精溶液,将DNA与蛋白质进一步分离(提纯),DNA的特性,DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶水解蛋白质对DNA没有影响,高温大多数蛋白质不能忍受6080的高温而DNA在80以上才会变性,洗涤剂瓦解细胞膜,去除脂质和蛋白质但对DNA没有影响,DNA的特性,DNA的鉴定,沸水浴,蓝色反应,DNA+二苯胺,DNA的特性,(一)实验材料的选取,讨论:什么样的实验材料更适合提取DNA?,实验设计,洋葱,鸡血,哺乳动物的红细胞,香蕉,DNA含量相对较高、材料易得,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液,讨论:1)动物细胞如何破碎?其原理是?2)破碎植物细胞时,加入洗涤剂和食盐的作用是?3)此步骤获得的滤液可能含有哪些细胞成分?,实验设计,蒸馏水涨破,渗透作用,洗涤剂:瓦解细胞膜食盐:溶解DNA,DNA、蛋白质、多糖、RNA等,(三)去除滤液中的杂质,讨论:1)滤液中的杂质主要是?2)为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?3)方案二与方案三的原理有什么不同?,实验设计,蛋白质,方案二:蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三:DNA耐高温而蛋白质不耐高温。,用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。,(四)DNA的析出与鉴定,思考:1)如何从滤液中析出DNA?2)纯的DNA应该是什么颜色?3)如何鉴定DNA分子?应注意什么?,实验设计,白色丝状物,用二苯胺试剂,沸水浴;做空白对照实验。,利用冷酒精,实验操作,制备鸡血细胞液加柠檬酸钠,静置或离心,破碎细胞,释放DNA加蒸馏水,同方向快速搅拌,过滤,破坏细胞膜、核膜等。,去除杂质,加入2mol/LNaCl,同方向缓慢搅拌,过滤,加蒸馏水至NaCl浓度为0.14mol/L,同方向缓慢搅拌,析出DNA,过滤,将粘稠物溶解到2mol/LNaCl溶液中,同方向缓慢搅拌,过滤,除去细胞质中的大部分杂质。,DNA析出与等体积95冷酒精混合,同方向缓慢搅拌,析出白色丝状物,除去核蛋白等。,DNA鉴定加入2mol/LNaCl溶液,搅拌。再加入二苯胺,沸水浴,以鸡血为例,实验小结,1)共有“四次过滤,两次析出,六次搅拌”2)加入“两次蒸馏水,三次NaCl溶液,一次酒精”,实验展示,加入洗涤剂和食盐,充分搅拌、研磨,以香蕉为实验材料,提取DNA,实验展示,香蕉的DNA鉴定结果,实验展示,以洋葱为实验材料,提取DNA,DNA断裂,无法形成絮状沉淀,实验展示,香蕉、洋葱的DNA鉴定结果对比,课堂巩固,1.下列哪项不宜选作DNA提取材料的是()A.洋葱表皮细胞B.鲜豌豆种子C.人的成熟红细胞D.猪肝2.实验中NaCl的物质的量浓度为2mol/L和0.14mol/L,分别对DNA有何影响?,前者是溶解DNA,过滤除去不溶的杂质后者是使DNA析出,过滤除去滤液中的杂质,C,课堂巩固,3.在DNA的粗提取实验过程中,两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是()。A.稀释血液,冲洗样品B

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