兰花组织培养ppt课件

兰花的组织培养，尤迪，1，兰花(学名Orchidaceae)，兰科系统是多年生草本植物，也被称为胡基花。古今名人对他评价很高，被誉为花中的君子，是中国十大花之一。兰花的品种很多，据不完全的统计数据显示，世界上有2万多种，其中蝴蝶、春兰、寒兰、蕙兰等比较知名。花鱼：淡泊、优雅、美丽、高洁、贤德，2，3，4，1，兰花无性快速繁殖2，快速繁殖的影响因素3，兰花无病毒植物的鉴定，5，1，兰花无性快速繁殖原球茎发生系统是兰花唯一有效的大规模无性繁殖方法。这种方法是法国学者G.Morel于1960年开创的，促进了兰花产业的形成，获得了巨大的经济效益。(a)培养计划外植体诱导原球茎的大量增殖，分化为小植物根深蒂固的幼苗，培养温室栽培；(2)将兰花的芽、叶、花器官、种子等培养成体外移植体，诱导再生植物。茎尖是细胞分裂最活跃的部分，诱导更容易，培养成功率高。培养兰花的芽时，首先从健壮的植物上剪下10厘米长的芽，去除苞片，用含有适量洗涤剂的自来水清洗干净，然后用75%的酒精消毒，用5%的灭菌水45次漂洗，用5%的漂白粉冲洗约10分钟或4 10min的灭菌水45次，准备。在叶片培养中，要选择有幼叶的花柄。、6、(3)接种和培养1。接种：在茎尖、超净工作台、体外显微镜下，用镊子剥消毒茎部分的幼叶，露出生长点，然后在解剖学上切下0.50.8mm大小的芽(为了便于解毒，应尽可能小)，接种培养基。从叶子、茎上剪下的小叶子和花梗上的小叶子一起，在灭菌状态下切成0.3 0.5的小块，接种在培养基上。2.培养基：使兰花发芽的培养基有MS或b5 0.5 1.0 mg/lnaa 1.0 mg/l6-ba 10%椰奶。诱导叶片原球茎形成的培养基：Kyoto NAA 0.1 g/ml 6-ba 1.0 mg/l肌醇100g/mL+烟酸0.1g/mL+维生素b 10.05mg/l腺嘌呤20mg/l蔗糖2、7，3。原球茎诱导培养芽的生长点或叶片接种原球茎诱导培养基。茎尖培养了23周，生长点开始显示为绿色。茎和叶首先开始生长，生长点组织的基部变大，开始形成原茎，大约30d左右，可以看到原茎形成。培养温度一般低于23 。光强度1500-2000 LX)(徽章的选择，褐变)4。原球茎的增殖培养形成的原球茎可以继续分裂增殖，加速繁殖，直到获得所需数量为止。用于继代培养的培养基可以与诱导培养一起使用固体培养或液体培养，培养条件也是一样。原球茎的生长主要有四种类型：很容易增殖的类型；原球茎增殖缓慢，但容易分化成幼苗。在原球茎接种后停止生长。转换后几周内没有死亡，褐色的变化，形成了小球茎。要缩短很容易增殖的培养周期，增加世代交替，加速繁殖，通过液体冲击培养形成很多新的生长点，然后分割接种于固体或液体的培养基进行繁殖。8，对球茎生长缓慢的类型，应改变培养基公式，特别是降低离子浓度。必须扔掉其他类型的材料。原球茎增殖的早期是褐色物质容易产生的分割，最初分割的原球茎应在离子浓度低的培养基中培养。5.墓的分化培养增殖的原茎不一定能顺利分化成幼苗。不同品种的差异很大。兰花不易受到生长调节物质的影响。因此，不能用改变激素浓度的方法诱导再生植物。兰种一般将球茎转移到离子浓度低的培养基上，诱导培养，添加一些椰汁等自然提取物质，茎就会很快重新生成。6.只有苗生长培养大的兰花个体移植方便，新形成的幼苗必须转移到大的培养容器，在一定的时间后才能移植。一般来说，1厘米的树苗移植到长苗培养基上，培养到10厘米，才能移植。9，现阶段幼苗的生长代谢比较稳定，培养基成分可能简单，但培养基的离子浓度不能太高。否则会产生幼苗或畸形儿。7.苗种植从培养瓶中去除3-4片叶，3-10厘米根高的组织培养苗，洗净根培养基，移植到泥炭或蛭石中(这种基质材料有保湿和透气性)，保持药光，注意保湿，定期施肥，促进生长。10，2，快速繁殖的影响因素(a)培养基兰花组织培养中使用的培养基为10多种。选择基本培养基时要考虑的核心问题是离子浓度一般应用低离子浓度，不同培养阶段所需的离子浓度不同。培养基中添加了生长调节物质、生物活性物质、氨基酸、天然提取物等。(b)材料褐变是兰花组织培养成功的关键，褐变的主要原因是物质在伤口分泌酚化合物，苯酚在多酚氧化酶的作用下转化为醌，引起褐变，醌在培养材料组织中与蛋白质聚合，其他酶系统失活导致代谢障碍，生长受阻。11，(3)原球茎幼苗在兰花第一代培养中形成的原茎一般可以分化成幼苗，但有些品种通常不会分化成幼苗或畸形。除了品种差异外，将香蕉汁、椰子汁等植物组织提取物添加到培养基中的培养条件也很重要。或者，添加一定浓度的IAA、NAA或降低培养基的离子浓度。(4)变种兰花组织培养中的变异主要与高浓度激素、器官继代培养、茎尖部位及大小、自己的豆芽等有关。前三个可以在培养中改善和阻止，后者是不可避免的。因此，必须慎重选择外植体、培养基和培养条件。在继代和增殖过程中，要及时淘汰变异物质。用核酸分子检测技术检测再生植物，快速检测变异。12，3，兰花无病毒植物的鉴定目前国内外对兰花病毒的检测主要采用生物学检测、电子显微镜检测、血清检测和分子生物学检测等方法。例如：三段式夹心酶联免疫吸附法(threeantoistendwich-ELISA tas-ELISA)是健兰花叶病