一轮复习细胞工程

细胞工程学、植物组织培养、植物细胞杂交、动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、核移植、植物细胞工程学、动物细胞工程学、理论基础、细胞全能性、其他动物细胞技术基础，一、植物细胞工程学基本技术，一)细胞全能性1，概念：生物细胞可能使后代细胞成为完整的个体。 2、原因：包括受精卵、有丝分裂、体细胞、全基因3、全能程度；(1)受精卵全能最高；(4)形成不同组织、器官的原因：基因选择性表达；(5)条件： (1)离体状态；(2)提供营养物质和激素；(4) 体细胞：分化度低，分化度高，分裂能力强，分裂能力弱(二)植物组织培养技术(重点理解)，1，原理：植物细胞的全能性2，过程：外植体损伤组织根、芽植物体，再分化、去分化、避光，植物激素：细胞分裂素、生长素、分化培养基，人工种子：胚状体、不定芽、顶芽和腋芽用人工薄膜包装，杂种细胞，愈伤组织，杂种株，植物细胞a，植物细胞b，原生质体a，原生质体b，融合的原生质体，去除细胞壁，再生细胞壁，植物组织培养，植物细胞融合，植物细胞融合，植物体细胞杂交过程，4， 优势：(与有性杂交方法相比)克服植物远缘杂交的不亲和性，2， 原理：细胞膜流动性与细胞全能性(3)植物细胞的杂交，3，原理：物理方法离心，振动，电刺激，化学方法聚乙二醇(PEG ).动物胚胎及幼龄动物组织，器官，胰蛋白酶，10代细胞，继代培养，无限继代，单一细胞，二，动物细胞培养，1，过程， 不易传代，增殖逐渐缓慢停止，细胞核型发生变化，使用或冷冻保存的正常细胞通常在10多岁以内，维持细胞的正常二倍体核型。 常见现象：细胞壁，抑制接触，(1)无菌，无毒环境(2)营养(3)温度和PH(4)气体环境： (添加一定量的抗生素，定期更换培养液)，补充合成培养基中不足的物质，36.5 0.5度； PH为7.2-7.4。 O2作用：呼吸供能CO2作用：维持培养液的PH值(葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等)。有氧、95%空气和5%CO2、2、动物细胞培养、2、条件、比较：培养基特有成分、培养基的性质、原理、比较项目、细胞全能性、蔗糖、植物激素、固体培养基、植物组织培养、葡萄糖、动物血清、液体培养基、细胞增殖、动物细胞培养、1、原理：三、动物细胞核移植、2、分类： 动物细胞核全能性胚胎细胞核移植，体细胞核移植，供体细胞(供体)，细胞培养，体细胞，卵母细胞(减中期：供体)，脱核，核移植，重组细胞，重组胚胎，胚胎移植，代理母体，新个体，分娩，活化，3，过程：完成细胞分裂和发育过程，包括促进体细胞核全能性的物质和营养，4，动物细胞融合，1，原理：细胞膜流动性，灭活聚乙二醇； 2、诱导融合的方法：细胞a、细胞b、杂交细胞、灭活病毒、物理法化学法、仙台病毒等3、过程：4、动物细胞融合、5、单克隆抗体的制备过程、细胞融合、筛选、可产生特定抗体的细胞群、单克隆抗体、在特定选择培养基中筛选、 克隆培养，特异抗体检定，1，过程，1，过程b淋巴细胞骨髓瘤细胞，诱导融合，B-B细胞，B-肿瘤细胞，肿瘤-肿瘤细胞，选择培养，杂交瘤细胞(B-肿瘤细胞)，克隆培养，抗体检查，杂交瘤细胞，体外培养，单克隆抗体，八克隆抗体，五， 单克隆抗体的制备，2，原理：3，单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，可大量制备，骨髓肿瘤细胞无限增殖，一个b淋巴细胞只分泌