多聚酶链式反应扩增DNA片段 PPT精选文档_第1页
多聚酶链式反应扩增DNA片段 PPT精选文档_第2页
多聚酶链式反应扩增DNA片段 PPT精选文档_第3页
多聚酶链式反应扩增DNA片段 PPT精选文档_第4页
多聚酶链式反应扩增DNA片段 PPT精选文档_第5页
已阅读5页，还剩18页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1,实验四PCR基因扩增,2,实验目的,通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。,3,实验原理,聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)，是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法，故又称为基因的体外扩增法。在待扩增的DNA片断两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍。,4,PCR技术的原理,1.变性：在加热或碱性条件下可使DNA双螺旋的氢键断裂，形成单链DNA，称之为变性。2.退火：是模板与引物的复性。引物是与模板某区序列互补的一小段DNA片段。3.延伸：从结合在特定DNA模板上的引物为出发点，将四种脱氧核苷酸以碱基配对形式按53的方向沿着模板顺序合成新的DNA链。,5,6,7,8,9,10,11,12,一般PCR反应条件,13,实验仪器,电泳仪,14,琼脂糖凝胶电泳槽,15,PCR仪,16,凝胶成像系统,17,移液器,18,实验材料,1、DNA模板2、4种dNTP3、引物1、引物24、Taq酶5、琼脂糖6、DNA相对分子质量标准物7、吸头、50ulPCR管,19,试剂,10PCR缓冲液(含Mg2)4dNTP(每种1mmol)Tag酶1U/ulDNA模板引物1:5-GGGGAATTCATGGTGAGCAAGGGC-3引物2:5-GACCTGCAGGCATGCAAGCTTGGC-3引物溶液浓度10pmol/ul,20,实验步骤,1在0.5mlRCR管内配置20ul反应体系：,21,PCR反应程序,(1)94变性5min，(2)94变性1min，(3)52退火1min，(4)72延伸1min。(5)重复(2)-(4)30次（6）72延伸1min。,22,实验报告,要求：1、写出本实验目的、原理；2、实验器材及实验步骤；3、列出实验结果示意图并分析原因。
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 辅导培训

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论