菊花组织培养和月季花药培养PPT精选文档

1，通过主题1菊花的组织培养，2，必修课的学习，我们已经知道大部分绿色开花植物是用种子繁殖的。那么，有没有不用种子而种植植物的方法呢？组织培养，3，切割，嫁接，压条，4，人工培养基中植物器官、组织、细胞和原生质体的体外培养，生长、增殖、分化和再生植物的技术。组织培养，(a)植物组织培养的基本过程，5，(1)基本知识，细胞分离，必要条件：特定营养素，激素及其他外部条件，原则3360，细胞全部能力，植物细胞具有全部能力，即分化细胞，未来一代，原则：定义：生物体的每个细胞包含该种特有的所有遗传物质的完整集合，作为完整的个体发育所需的所有基因，6，细胞分化，概念：个体发育中同一细胞的后代在形态，结构，生理功能上产生稳定性差异的过程，结果：形成其他细胞及组织，以及其他植物组织，培养的难度很大。例如，烟草和胡萝卜易于组织培养，而枸杞愈伤组织芽诱导则困难。因此植物材料的选择直接关系到实验的成败。对于相同的植物材料，材料的年龄、保存时间长度等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择未开花植物茎上新长出的枝。10，2。隔离的植物组织及细胞、营养、环境和其他条件的要求比较特殊，必须准备适当的培养基。常用的徽章之一是MS徽章。关键组件包括很多元素，如n、p、k、Ca、Mg和s。微量元素，例如b、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、co；甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等有机物。在准备好的MS培养基中，经常需要添加植物激素。与培养细菌的培养基有什么不同？11，MS固体培养基成分和比例，12，微生物培养基主要是有机营养。与微生物的培养不同，MS培养基必须提供植物生长所需的大量元素和微量元素等武器营养。读课文，思考下一个问题1。与微生物培养基相比，MS培养基的公式有什么明显的不同？2、在组织培养过程中，你认为成功的关键是什么？此阶段的适当条件是什么？组织的脱分化和愈伤组织的再分化。在植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化及再分化的最重要因素是植物激素、细胞分裂素和生长素的浓度比例可以控制植物组织培养过程中芽和根的形成。13，3。植物激素浓度、使用的先后顺序、使用率等会影响实验结果。在植物激素中，生长素和细胞分裂、脱分化和再分化是开始的主要激素。如果以不同的顺序使用这两种类型的激素，可以得到不同的实验结果。14.同时使用这两种激素时，使用量的比例决定发育方向、愈伤组织、长根或长芽。为了促进芽器官的分化，需要去除或降低生长素的浓度，或调整培养基中生长素和细胞分裂素的比例。有利于根分化，有利于抑制芽的生长素/细胞分裂素，有利于愈伤组织的形成，有利于抑制芽分化，有利于抑制根的形成，4 .除上述因素外，PH、温度、照明等条件也很重要。植物对各种条件的要求往往是不同的。菊花的组织培养通常以PH值约为5.8，温度调节为18 22，每天用荧光灯照12h。，15，生长素/细胞分裂，高根分化，抑制低芽形成，抑制根形成，16，(a)制备MS固体培养基，(b)体外移植物消毒，(c)接种，(4)接种用灭菌吸水纸吸干外植体表面的水分，在体积分数为70%的酒精中摇晃2-3次，持续到6-7s，立即取出外植体，在灭菌水中清洗，消毒液处理，去除后用灭菌吸水纸吸干体表面的水分，在0.1%的氯化汞溶液中1-2分钟，去除后用70%的酒精喷雾对空气消毒，酒精或辛泽尔用紫外线照射洗涤工作台20分钟，1，要求在接种室消毒，2，处理灭菌，在酒井灯火焰旁完成工作，每次使用仪器后要用火焰杀菌，接种后立即盖上瓶盖。21，22，(4)培养，接种后，锥瓶最好放在灭菌箱里培养，培养中要定期消毒。培养温度控制在18-22，脱分化后形成愈伤组织，每天用日光灯照射12h。23，(5)移植，移植生根的菊花试管苗之前，要打开培养瓶封膜，让试管苗在培养间生长几天。1、打开密封膜，2、清洗、转移，用水清洗去除根的培养基，将幼苗移植到无毒的蛭石或珍珠岩等环境中，生活一段时间。24，(6)栽培，3，移植，珍珠岩：固体基质类型，水分含量高，水分含量高，通透性好，适于栽培，树苗结实后移植到土壤中，树苗移植后每天观察并记录幼苗生长情况，及时浇水和施肥，开花，25，26，例如：玉米、大豆、梨、杏，如松树、冷杉、博，28，29，30，31，3，花的结构，32，4，花的作用，被子植物的性生殖是在花上完成的。雌蕊和雄蕊是性生殖的主要部分，第二，被子植物花粉粒的形成，第一，雄蕊结构，雄蕊：33，2，花药的结构，34，花粉是通过微孢子母细胞减数分裂形成的，花粉是单倍体生殖细胞，第三，被子植物花粉发育。在任何时期，花粉都不能通过培养产生愈伤组织或胚胎，因此在花粉发育的过程中，只有某个时期对体外刺激敏感。材料选择的成功是花药文化成功的关键材料选择，41、最合适的小孢子发育时期单核侧期，单核前花药接种选择，质地非常脆弱；如果在单核后选择接种花药，花瓣会有些松动，给消毒带来困难，很难选择单核花药。选择花药培养器，选择其他时期的缺点，42，花药培养时间，为选择单核期花药，通常选择完全不开放的花蕾。盛开的花或稍开的花不适合选择作为实验材料。选择未完全开放的花蕾的原因，可以选择完全未开放的花蕾，单核花药，菌少，容易消毒，选择单核花药，一般月季花的花药培养时间从5月初到5月中旬，即玫瑰的第一个开花期。开花期的花蕾可以改善营养状态和生理状态，提高花粉的诱导成功率。43、月桂花药培养时，花粉粒()a，四分体b，单核中期C，单核细胞d，2，或3核花粉粒，C，2，培养基：花药培养基中使用的培养基会因植物而异。小麦N6，土豆，玫瑰为MS，油菜为B5培养基，44，某些植物的花粉核不易着色。该方法应采用烘焙绿铬矾法，6，实验操作，(a)选择材料，最常用的方法是紫红色醋酸法，1，确定花粉发育时间：45，紫红色醋酸染色机制，碱性染色剂，花粉细胞内有染色体，染色体的主要成分是DNA和蛋白质，碱性紫红色醋酸纤维组成，2，紫红色醋法，46，在载玻片上放入花药和1%质量分数的醋酸酯，用镊子夹碎花药，盖球在显微镜下检查。染色操作，3，烘焙化青-铬钒法，无水酒精和冰醋酸以体积比3: 1的比例混合。卡诺固定液的制备方法，作用：快速穿透细胞固定，保持染色体结构的完整性，加强染色体的碱性，达到良好的染色效果。47、anther应在卡诺固定液中固定20min，然后放入玻璃片中，用铬钒溶液染色，盖上封面幻灯片，用显微镜检查。烘焙化青-铬钒溶液的制备方法，染色操作，48，(2)材料消毒，1，酒精处理，花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒后立即去除。无菌水清洗无菌吸墨纸在花蕾表面的水分，49，2，消毒液处理，(3)接种和培养，在0.1%的氯化汞溶液中清洗24分钟(1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白剂溶液也可以)；有花萼、花瓣或尖形保护装置，大体无菌，所以对整个花蕾或幼穗消毒即可。50、在杀菌状态下去除萼片和花瓣，用镊子去除花药后，与花丝连接的花药对愈伤组织或胚状体形成不好，立即将花药接种到培养基上。通常每瓶接种7-10个。1，剥花药，损伤花药，2，接种，注意：51，培养条件：温度控制约25 ，不需要光。幼小的植物形成后，才需要光。3，培养，培养：一般20-30天后发现花药有裂纹。愈伤组织排出愈伤组织或释放胚胎。将卡氏组织转移到分化培养基上，使再生植物进一步分化。注意：花药开裂，一花药中可能会产生很多幼植物。花药开裂后，应尽快分离幼小植物，移植到新培养基上。否则植物很难分离。，52，花药文化，特别是通过愈伤组织形成的花粉植物，常发生染色体倍性变化