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第五章第一节降低反应活化能的酶第五章细胞的能量供应和利用第1节降低反应活化能的酶一、细胞代谢和酶1、细胞代谢概念:细胞内经常发生多种化学反应,统称细胞代谢。细胞代谢的意义:细胞代谢是生命活动的基础。活化能:分子从常态变为容易发生化学反应的活跃状态所需要的能量。3、酶在细胞代谢中的作用:降低化学反应的活化能。4 .加快化学反应的方法:加热:通过提高分子的能量加快反应速度加入催化剂:与通过降低化学反应活化能加快反应速度的无机催化剂相比,酶能显着降低化学反应活化能,因此催化效率高。5、酶的本质:关于酶的本质的探索:巴斯德以前,发酵是一种纯粹的化学反应,与生命活动无关巴斯特的观点:发酵与活细胞有关,发酵不是细胞中的某种物质,而是整个细胞。李比希的见解:引起发酵的是细胞中的某种物质,但这些物质只能在酵母细胞死亡分解后发挥作用毕希纳观点:酵母细胞中的某些物质在酵母细胞破碎后仍可继续起催化作用,如活酵母细胞中萨姆纳提取酶,证明酶是蛋白质郝郛、奥特曼发现少数RNA也具有生物催化功能6、酶的概念:酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物,大部分是蛋白质,少数是RNA。调味汁一般来说,活细胞产生酶化学的本质大多数酶是蛋白质,少数是RNA合成原料氨基酸或核糖核苷酸合成地点主要是核糖体,也可以在核内合成生理作用生物催化作用作用机理降低化学反应的活化能作用部位生物体内(细胞内、外)、生物体外7、酶的特性:效率:酶催化效率是无机催化剂的107-1013倍。特异性:每种酶只能催化一种或一种化学反应酶的作用条件温和:酶在最佳温度和PH下活性最高。 温度过高的话,过酸和过碱会使酶变性失活,无法恢复的低温会使酶暂时失活,但适度升温的话活性会恢复。二、影响酶促反应的因素(难点)1 .基质浓度(反应物浓度)酶浓度2、PH值:过酸、高碱使酶失活3、温度:高温下使酶失活。 低温下酶活性降低,适当温度下酶活性恢复。酶相关曲线1 .显示酶效率的曲线(1)催化剂化学反应速度快,与无机催化剂相比酶的催化效率高。(2)酶缩短达到化学平衡的时间,不改变化学反应的平衡点2 .表示酶特异性的曲线(1)向a反应物中加入酶a后,与没有加入酶时相比,反应速度显着加快,说明酶a催化底物a参与反应。(2)在a反应物中加入酶b,反应速度与未加入酶的情况相同,显示酶b不催化基质a。3 .影响酶活性的曲线(1)上述两条曲线的含义:在一定温度(pH )范围内,随着温度(pH )升高,在酶活性增强的最佳温度(pH )下,酶活性变得最强,超过该范围的酶活性逐渐减弱。(2)强酸、强碱、高温破坏酶的空间结构,使酶永久失活的低温只抑制酶的活性,温度上升时活性恢复。3 .基质浓度和酶浓度对酶促反应的影响酶反应应援速度度酶浓度(基质量一定)(1)底物浓度对酶促反应的影响(酶量一定,其他条件适当):底物浓度低时,随着底物浓度的增加反应速度加快,反应速度与底物浓度大致成正比,且达到一定极限时,反应速度达到最大值,此时受酶数和活性的影响,即使底物浓度进一步增加(2)酶浓度对酶促反应的影响:基质充分失活,其他条件适当时,反应体系不含抑制酶活性的物质或不利于其他酶作用的因素时,酶促反应的速度与酶浓度成正比,但基质量一定时,受基质量的影响,酶浓度增加反应速度不变。三、实验控制变量法:变量、参数(实验中人为控制变化的变量)、变量(随参数变化的变量)、无关变量的定义。对照实验:除一个要素外,其馀要素不变的实验。 通常设置对照组和实验组。实验设计应遵循的原则:对照原则、单变量原则、等量原则。1 .比较过氧化氢酶在不同条件下的降解实验注意事项:酶具有效率,滴加的FeCl3溶液中混入少量过氧化氢酶会影响实验的准确性为什么要使用新鲜的肝脏? 过氧化氢酶为蛋白质,放置过度会被细菌分解,肝组织中酶分子数减少,活性降低。为什么需要肝脏的研磨液? 研磨破坏肝细胞结构,释放细胞内酶,增加酶与基质的接触面积。实验结论酶具有催化作用,催化效率远高于无机催化剂Fe3。2 .验证唾液淀粉酶特异性的实验已知滴加菲林试剂水浴后出现砖红色沉淀时,证明还原糖的存在唾液淀粉酶将淀粉水解成麦芽糖,但蔗糖不能水解成葡萄糖和果糖。 麦芽糖、果糖、葡萄糖具有还原性,淀粉和蔗糖无还原性。q :用淀粉酶分解淀粉和蔗糖的实验中鉴定的试剂只是菲林试剂不能使用碘液吗?答:淀粉、蔗糖和斐林试剂的沸水浴中没有砖的红色沉淀,淀粉、蔗糖的水解物和斐林试剂的沸水浴中有砖的红色沉淀,因此检测出斐林试剂是有砖的红色沉淀就会发生水解的试管。 因此,可以用茶碱试剂测定淀粉有无水解和蔗糖有无水解。蔗糖和蔗糖的水解物和碘液不能变成蓝色,不能确定蔗糖有无水解。3 .影响酶活性的条件(要求控制变量法、自我设计实验)用淀粉酶研究温度对酶活性的影响,建议用过氧化氢酶研究PH值对酶活性的影响。温度对酶活性的影响初探实验原理:1 .淀粉遇碘后,形成紫蓝色复合体。2 .淀粉酶可以使淀粉逐渐水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇到碘时,会变成红褐色或红褐色。 )麦芽糖和葡萄糖遇到碘就不显色。 注:市售的a-淀粉酶的最佳温度约为600C步骤顺序试管1试管1试管2试管2试管3试管33%淀粉液2毫升2毫升2毫升2%淀粉酶液2毫升2毫升2毫升温度预处理060100反应混合混合混合恒温时间五分钟五分钟五分钟加入碘一滴一滴一滴预期现象蓝色不变青蓝色q :温度影响酶实验中鉴定的试剂只有碘液,不能使用菲林试剂吗?a :茶碱试剂需要用水浴加热,加热2次不仅影响单变量,还影响酶活性,实验结果不可靠PH
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