中药制剂理化鉴别的方法ppt课件

中药制剂的理化鉴别方法。 、第一节必备知识一、理化鉴别含义中药制剂的理化鉴别利用其药味(原料药)中某些或某些指标成分的理化性质，通过化学分析方法和仪器分析方法，检查相关成分是否存在于制剂中，进而判断所含药味与处方的一致性，鉴定药品真伪药品真实性鉴定是药品质量控制的重要内容，也是衡量药品质量的重要依据。 如果药品缺乏真实性，可以判定为不合格，用假药论证。二、理化鉴别的特征、理化鉴别以制剂药味中的指标成分(主要是有效成分或特征成分)为检测对象，可以更客观地评价药品的真实性。 对于液体制剂和其他不含原料药粉的制剂，理化鉴别很重要。三、理化鉴别的方法，目前中国药典中收载的理化鉴别法有一般化学鉴别法、微量升华法、荧光鉴别法、分光光度法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。 其中，特别是薄层色谱的广泛应用，是由于色谱具有分离分析的双重功能，显着提高了鉴别工作的灵敏度和专业性，成为今后中药制剂鉴别的发展方向。 中国药典 (2005 )新增了中药(116种)鉴别方法，第二节一般化学反应法(GeneralChemicalReaction )，一是原理一般化学反应法利用测定试剂与制剂中指标成分的化学反应，从产生的颜色、沉淀、气体等现象中可以看出某些成分因此，一般化学反应法是指一般所说的显色反应和沉淀反应。2 .特点1 .一般化学反应法具有操作简便、适用性强等特点。 2 .其否定功能强于肯定功能，专业性差。 3 .容易发生假阳性或假阴性反应，克服假阳性或假阴性反应的方法如下：预处理样品，去除干扰成分，丰富检测成分。 选择专业性强的检测试剂。 必要时进行阳性或阴性对照试验，保证其属性和灵敏度。三、常用化学反应主要是制剂中生物碱、黄酮类、蒽醌类、皂苷、香豆素、萜烯类及各种矿物类成分的鉴别(一)生物碱1 .碘化铋钾反应引起的红褐色沉淀2 .碘化汞钾反应引起的白色沉淀3 请注意排除其他成分的干扰。 少数生物碱与上述共同沉淀试剂无反应，具有特异性强的其他反应。(二)黄酮类化合物最常用的检测反应是盐酸镁粉反应，呈紫红色。 山楂丸(山楂)、抗骨增殖丸(黄鼠狼)、参茸保胎丸(黄芩苷)等。 此外，黄芩苷提取物采用二氯氧化锆盐酸显色反应检测。 (三)蒽醌类化合物主要应用碱液反应(Borntrager反应)，阳性反应呈红色，加酸后红色呈黄色。 例如大黄流浸膏。(四)皂苷，常用的定性鉴别反应是泡沫反应样品的水溶液摇晃后产生持续性泡沫。 乙酸酐浓硫酸反应甾体皂苷呈污绿色，三萜皂苷呈红、紫红色。 浓硫酸反应呈红、红紫色。 三氯化锑或五氯化锑反应氯仿液呈紫色。 氯仿浓硫酸反应氯仿层出现红色或蓝色，具有绿色荧光。 例：地奥心血康胶囊(黄山药和穿山龙薯蓣的提取物)、养心定悸膏(甘草、红参、麦冬)。(五)香豆素、内酯类和酚类，常用的检测反应为氯亚氨基- 2，6 -二氯醌-四硼酸钠反应(Gibbs反应)，呈蓝色。 异羟肟酸铁反应呈红色。 应用品种有养阴清肺膏(牡丹皮)、前列舒丸(牡丹皮)等。、挥发性成分主要采用香草醛-浓硫酸反应检测该成分，反应呈红、紫红色。 应用品种主要有万应锤(沃尔沃)、牛黄解毒片(沃尔沃)、养心定心悸膏(桂枝、生姜)等。(7)矿物药、朱砂、石膏、雄黄等是中医药常见的矿物药。 1 .朱砂(主要包括HgS )主要采用铜片反应。 HgS 2HCl CuCuCl2 Hg (白) H2S天王补心丹等中药中朱砂的鉴定。 2、石膏、牡蛎、蟾蜍等药物富含钙盐，主要采用草酸铵反应。 CaSO4 (NH4)2C2O4CaC2O4(白) (NH4)2SO4CaC2O4溶解于盐酸中，难溶于醋酸. CaC2O4 2HClCaCl2 H2C2O4止咳桔红口服液(石膏)、安胃片(蟾蜍)、龙牡丹壮骨颗粒(牡蛎、龙骨、乳酸钙、葡萄糖酸钙等)、 3 .雄黄(主要包括as2s2) (1)氯化钡沉淀法(硫检测) as2S2 KCl O3 HNO 32k3as O3 H2 so4cl24no H2 so 4b ACL2baso 4(白)牙痛一粒丸(2)硫化氢反应(砷检测)2as2S2 o 22 as2O3 so2as2O3 H2O2H3 aso 32h3aso3H2 sas2s3(黄) 6h 在碳酸铵中溶解于4 as2s 312 (NH4)2co34 (NH4)3as3o4(NH4)3ass3co 2小儿痉挛等中. 由于，o，(8)动物药含有大量的蛋白质和氨基酸，为了区别这种药物，经常使用氨醇进行反应，对紫红色进行反应。 例如龟龄集(鹿茸、海马等)、参茸保胎丸(阿胶、鹿茸)等.四、操作方法；(1)供试液的制备(参照前述)；(2)操作方式多为试管反应，或在检查用纸上或蒸发皿(坩埚)中反应；五、结果判断反应现象或结果与药品基准对照，一致则符合规定。 不一致就判定不符合规定。 6、注意事项、试管反应一般使用210cm的试管，取试验液12ml。 装检验液时，试管要稍微倾斜一些。 检查液必须沿着试管内壁滴下。 吸管下面的嘴不能接触内壁。 加入反应试验液后，一般摇动试管，与供给试验液混合。 摇晃时要缓慢摇晃，不要上下摇晃，手指不要堵住试管的口，要有层次反应就不要摇晃试管。 一般需要在白色背景下观察反应产生的颜色和沉淀，沉淀为白色和类白色时需要在黑色背景下观察。 反应需要加热时，一般用水浴加热。 用试管夹试管，内容物不得超过容积的2/3。 试管要倾斜45度。 试管口不得堵塞，不得对人。 加热有机溶液绝对不允许使用火热源。 反应需要无水条件时，应保持试管、蒸发皿等容器的干燥，如乙酸酐-浓硫酸反应。七、应用实例、1 .千柏鼻炎片2 .小儿清热止咳口服液3 .茴香核丸4 .地奥心血康胶囊5 .养阴清肺膏、6 .安胃片7 .天王补心丹8 .牙痛一粒丸9 .脑卒中回春片、第三节升华鉴别法(Sublimation )、一、原理本法利用某些成分的升华性，达到一定温度.二、特征升华法具有简便、实用等特点，升华性仅为少数中药化学成分，升华物纯度高，因此法律专业性好。三、操作方法多采用微量升华法，少采用坩埚法或蒸腾皿法，在此仅介绍微量升华。 六味地黄丸中的冰片升华物，六味地黄丸中的冰片升华物显微镜可见，六味地黄丸中的冰片升华物香草醛浓硫酸发色，四、注意事项升华时慢慢加热，温度过高，易焦化药粉，在载玻片上形成焦油状物，升华物的观察和检测温度的控制可以通过调节酒精灯火焰与石棉板的间隔来实现。 样品粉末的用量一般约为0.5g，过少，不易产生足够量的升华物。 向载玻片滴入少量水降温，可促进升华物的凝集析出。 没有金属片，可用载玻片代替。、五、应用例(P58 )、(一)万应锤鉴别(二)儿童痉挛散的鉴别(反应机理)(三)明目地黄丸的鉴别、第四节荧光鉴别法(Fluorescence )、原理荧光鉴别法是制剂中的某些成分，如黄酮类、蒽醌类、香豆素类一些成分本身不具有荧光性，但经酸、碱处理后或经其他化学方法处理后仍会产生荧光，可用于鉴别。2.特征本法操作简便，灵敏，具有一定的专业属性。 例如大黄和土大黄，前者显示茶色到茶色的红色荧光，后者显示蓝色荧光，容易区别。三、用操作方法将中成药的提取液点加入滤纸或放入蒸发皿中，用紫外光灯(365nm )观察约10cm处产生的荧光。 如有必要，可在试样中加入酸、碱或其他试剂，观察荧光及其变化。四、注意事项由于荧光强度弱，一般在暗室观察荧光。 供试液一般用毛细管吸取，少量的几次点加入滤纸，使斑点集中，具有一定的浓度。 紫外光会对人眼和皮肤造成损伤，因此操作者请勿长时间接触紫外光。五、应用实例(P59 ) (一)元胡止痛片(二)五味麝香丸(三)热炎宁颗粒，第五节薄层色谱鉴别法(ThinLayerChromatographyTLC )，一、原理基于相同物质表现相同色谱行为的基本规律，供同一薄层板试用在相同条件下展开，检测色谱斑点显色后，对得到的试样和对照物的色谱进行比较分析，进行药品的定性鉴别。二、特点(一)简便、快速、易推广，具有分离和分析双重功能，且采用共薄层对照分析法，专业性强。 (2)系统适应性测试。 (05版药房方新)1.检测灵敏度2 .分离度3 .再现性，1 .检测灵敏度主要用于限定检测。 用试样溶液、对照品溶液和几倍(10倍)稀释的对照品溶液，在同一薄层板上点状、展开、显示，后者应显示明显的斑点。2.分离度用于鉴别时，对照品溶液和供试品溶液中相应的主要斑点应显示明显分离的两个斑点。 用于限量检测和含量测定时，定量峰与邻近峰之间要求良好的分离度，除另有规定外，分离度必须大于1.0。 此外，分离度(r )计算式为，R=2(d2-d1)/W1 W2式中，d1为相邻的两个峰中的后者的峰与原点的距离即d2为相邻的两个峰中的前者的峰与原点的距离即W1及W2为相邻的两个峰各自的峰宽，3 .再现即，同样试样溶液在同一薄层板上平行地放置点那样的测定对象成分的峰面积的测定值的相对标准偏差(RSD )必须在3.0%以下. 显色后测量的相对标准偏差请控制在5.0%以下。(三)设置对照物的对照物分为对照品(主要是有效成分和特征成分的单体)、对照药剂和对照提取物3种。 设置对照物有4种方式：设置1种或数种对照品，设置对照提取物，设置1种或数种对照药，同时设置对照品和对照药。 样品色谱中的主要斑点与对照品和对照药色谱中的相关斑点一致，大大提高了薄层色谱鉴别法的专业性和整体性，有效检测药品是否使用假药材，已广泛应用于中药及其制剂的检验(五)中国药典多数品种采用硅胶薄层色谱，少数采用聚酰胺薄层色谱和氧化铝色谱。 薄层色谱法也可用于药品杂质检测和含量测定。、三、影响薄层色谱鉴别的因素很多，如供试液净化程度、吸附剂性能和薄层板质量、点样(原点)质量、展开剂组成和饱和状况、对照品纯度、展开距离、相对湿度和温度等。 重点介绍展示剂、相对湿度、温度和pH的影响。四、仪器和材料，(一)薄层片材1 .市售薄层片材(也称预制薄层片材)除另有规定外，一般要求使用市售薄层片材。 市售薄层片有普通薄层片和高效薄层片两种。 常用的有硅胶薄层板、硅胶GF254薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。2.自制薄层板在保证色谱质量的前提下，如果需要处理薄层板进行化学改性，以适应供试品分离的要求，也可以使用实验室自制的薄层板。 除有特别规定外，玻璃板为10cm10cm、10cm15cm、20cm10cm、20cm20cm20cm的不同规格，最常用的固定相为硅胶g、硅胶GF254、硅胶h、硅胶HF254等。 其粒子大小一般要求直径为1040m。 薄层板用湿法制造，用涂布机在玻璃板上均匀涂布制成的固定相糊。 所使用的涂布机可以将固定相涂在玻璃板上均匀的薄层。 涂布机有手动、半自动、全自动等类型。铺不同规格的薄层板、薄层板。(二)样本器材为提高药品定性鉴别的可比性，中国药典规定采用定量样本。 最常用的是微流毛细管(定容毛细管)，其还可以利用点样本的辅助设备，例如点样本保持器、半自动的或自动的点样本，以便提高点样本的效率和质量。展开容器使用专用的展开气缸，展开气缸有水平式和立式两种类型。 上行展开一般使用直立展开缸，分为平底式和双槽式，双槽展开缸具有节约溶剂、预压平衡片方便、可控制展开缸内湿度等优点。 展开气缸盖应密闭，体积应符合薄层板的大小。 生物样品气缸等其他玻璃器具不能作为展开气缸。 否则会影响推广质量。全自动检查器、微升毛细管、双槽展开气缸、(4)显色装置展开的薄层片材一般用相应的显色方法使片材上的被检测成分的斑点显色。 喷雾显色使用玻璃喷瓶或专用喷雾器，要求用压缩气体均匀地喷出显色剂的浸渍显色可以使用专用的玻璃器具或适当的展开缸作为浸渍槽的蒸汽熏蒸显色， 能够用双槽展开缸或大小适当的干燥器进行的荧光显示装置是具备与可见光、254nm和365nm的紫外光源对应的滤光器的腔室，能够附加摄像装置拍摄图像，腔室内的光源需要足够的照度。喷雾显色、荧光显色、五、操作方法的一般操作步骤为：薄层板的制备(制板)点样展开显色和显示(一)薄层板的制备1 .市售薄层板一般需要在110下活化30分钟. 聚酰胺薄膜没有被活化。 贮藏中被空气中的杂质污染时，使用前用氯仿、甲醇或者两者的混合溶剂在展开缸中预洗，在110下活化，在干燥器中预洗。2.除自制薄层板另有规定外，用乳钵将1份固定相和3份水(或0.20.5羧甲基纤维素钠水溶液)向同一方向研磨混合，除去表面气泡后，放入涂布机，在玻璃板上平滑移动涂布机，涂成薄层薄层片一般要求新鲜制造，当天使用。 使用前应在反射光和透射光下检查其质量。 板面不均匀，不均匀，有麻点，有气泡，有破损和污染等情况应予抛弃。 (2)样品1 .试样溶液的制备主要采用浸渍法、回流焊及超声波等方法进行提取，采用液液提取法或固液提取法进行精制。某些成分以糖苷、酯等结合状态存在于药品中，检