免费预览已结束，剩余1页可下载查看
下载本文档
版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领
文档简介
单菌落的挑选,操作注意事项1.培养皿底部向上，在酒精灯火焰20cm内操作。2.操作时不要讲话，在无风处操作。3.挑斑器具要求无菌。4.挑选远离群菌落的单菌落，菌落不要过大。5.蓝白斑筛选（原理），挑取大小合适的白斑。,野生型大肠杆菌产生的-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。设计适用于蓝白斑筛选的基因工程菌为-半乳糖苷酶缺陷型菌株。这种宿主菌的染色体基因组中编码-半乳糖苷酶的基因突变，造成其编码的-半乳糖苷酶失去正常N段一个146个氨基酸的短肽（即肽链），从而不具有生物活性，即无法作用于X-gal产生蓝色物质。当菌体中含有带lacz的质粒后，质粒lacz基因编码的肽链和菌株基因组表达的端缺陷的-半乳糖苷酶突变体互补，具有与完整-半乳糖苷酶相同的作用X-gal生成蓝色物质的能力，这种现象即-互补。操作中，添加IPTG(异丙基硫代-半乳糖苷)以激活lacz中的-半乳糖苷酶的启动子，在含有X-gal的固体平板培养基中菌落呈现蓝色,实验中，通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。含X-gal的平板培养基中同时含有一种或多种载体所携带抗性相对应的抗生素，这样，一次筛选可以判断出：未转化的菌不具有抗性，不生长；转化了空载体，即未重组质粒的菌，长成蓝
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 阳极涂层性能优化-洞察与解读
- 2025广东广州市素社街道环监所招聘1人模拟试卷及一套答案详解
- 2025湖北武汉市通城县事业单位高层次和急需紧缺人才引进48人考前自测高频考点模拟试题及参考答案详解1套
- 跨渠道预算优化方法-洞察与解读
- 班组安全培训样板课件
- 2025年上半年浙江杭州高新区（滨江）劳动保障监察专职人员招聘6人考前自测高频考点模拟试题有答案详解
- 2025年商丘市睢阳区招聘公共安全服务人员体能测试模拟试卷及答案详解（各地真题）
- 2025黑龙江绥化市明水县人民医院招聘中医医生模拟试卷完整参考答案详解
- 2025广东广州市荔湾区沙面街道环卫站招聘管理人员1人考前自测高频考点模拟试题附答案详解（模拟题）
- 2025昆明市第二人民医院融城老年病医院（5人）模拟试卷有答案详解
- 规范格式的婚前财产协议格式6篇
- 2025年酒水行业精酿啤酒市场前景研究报告
- 2025年非高危行业安全生产管理能力考试练习题附答案
- 儿科常用急救技术
- IT运维服务合同(模板)7篇
- 仪器仪表安全培训课件
- 触电急救培训课件模板
- GB/T 9943-2025高速工具钢
- 猫咖设计案例解析与方案模板
- 《模拟电子技术（第三版）》全套教学课件
- 子宫破裂护理常规课件
评论
0/150
提交评论