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分子生物学研究中最强大的实验技术之一其本质是在体外模拟胞内DNA分子复制的过程,美国科学家穆利斯(K.B.Mullis)发明了PCR技术1993年诺贝尔奖,课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段,PCR(多聚酶链式反应）,2.DNA聚合酶特性,不能从头合成DNA，只能从DNA的3端开始延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。,3.DNA聚合酶作用过程,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5端向3端延伸。,1.定义：是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。,母链,子链,变性,复性（退火）,温度下降到500C左右引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。,延伸,温度上升到72左右溶液中4种脱氧核苷酸，以母链为模板，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对的原则合成新的DNA链。,条件：结果：,温度上升到90以上时双链DNA解聚为单链,条件：结果：,条件：结果：,PCR过程,PCR过程,(a)第一轮,引物2,引物1,引物2互补链,(b)第二轮,变性新引物新延伸,(c)第三轮以第二轮产物为模板，重复第二轮过程。,DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。,耐高温的TaqDNA聚合酶解决了高温导致DNA聚合酶失活的问题，促成了PCR技术的自动化。,Taq酶的应用,需要为PCR反应提供的物质,缓冲液四种脱氧核苷酸DNA模板耐热的DNA聚合酶两种引物（控
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